A keringő mikroRNS-ek azonosítása serdülőkori idiopátiás scoliosisban (IMIRSA)

ANYAG ÉS MÓDSZER: 1) Vénás vérminta vétele az AIS-sel vagy kontrollcsoporttal bevont betegektől, majd a plazma ezt követő elválasztása; 2) A keringő teljes RNS izolálása AIS betegek plazmájából (Kit Invitrogen: Total RNA Isolation Reagent) és mikroRNS-minták előkészítése (TaqMan™ MicroRNA Reverse Transcription Kit); 3) MikroRNS expressziós profilok elemzése micro-array technikával (Taqman Advanced miRNAs Human CardA + B); 4) Deregulált mikroRNS-ek validálása egyszeri qRT-PCR vizsgálattal és számítási funkcionális elemzésekkel; és 5) In vitro vizsgálatok a csontremodelling mechanizmusaiban azonosított mikroRNS-ek molekuláris szerepének vizsgálatára.

Jelentkezési eljárások:

Az alkalmasnak ítélt betegeket írásos beleegyező nyilatkozatuk után vonják be a vizsgálatba. Az egészséges alanyok (kontrollcsoport) felvétele önkéntes alapon, a Rizzoli Ortopédiai Intézet honlapján (www.ior.it) közzétett hirdetmény útján. "Hírek" rovatban.

Adatgyűjtés: A klinikai adatokat a páciens forrásdokumentuma fogja lekérni. Az elemzések eredményeit tartalmazó protokoll-specifikus CRF-t biztosítanak. A CRF kötelező, és ki kell tölteni minden egyes tárgyhoz.

Etika: A klinikai vizsgálati protokollt és dokumentumait a vizsgálat megkezdése előtt el kell küldeni az egyes részt vevő országok illetékes hatóságainak és etikai bizottságainak jóváhagyás céljából. A felelős vizsgáló gondoskodik arról, hogy ezt a vizsgálatot a legfrissebb Helsinki Nyilatkozattal, valamint a klinikai vizsgálatokra és a betegvédelemre vonatkozó nemzetközi és helyi jogszabályokkal összhangban végezzék. A jegyzőkönyvet megírták, és a vizsgálatot az ICH Harmonized Tripartite Guideline for Good Clinical Practice (Ref: http://www.emea.eu.int/pdfs/human/ich/013595en.pdf) elvei szerint végezzük. ).

Tájékozott hozzájárulás: A vizsgáló minden beteget tájékoztat a vizsgálat céljairól, a vizsgálatban való részvételből származó lehetséges kockázatokról és előnyökről. A vizsgálónak egyértelműen tájékoztatnia kell, hogy a beteg szabadon megtagadhatja a vizsgálatban való részvételt, és beleegyezését bármikor és bármilyen okból visszavonhatja. A betegek tájékoztatást kapnak személyes adataik szigorú titoktartásáról, de a beíratott betegek egészségügyi feljegyzéseit a kezelőorvostól eltérő, erre feljogosított személyek is megvizsgálhatják. A tájékoztatáson alapuló beleegyezési eljárásnak meg kell felelnie az ICH helyes klinikai gyakorlatra vonatkozó irányelveinek. Ez azt jelenti, hogy "az írásos beleegyező nyilatkozatot a betegnek vagy a beteg jogilag elfogadható képviselőjének alá kell írnia, és személyesen kelteznie kell".

A Kivizsgálónak alá kell írnia a Tájékoztatott beleegyező nyilatkozatot is, az eredeti példányt a helyszínen megőrzi, az eredeti másolatát pedig át kell adni a betegnek.

A vizsgálatban részt vevő valamennyi intézmény illetékes etikai bizottságának érvényesítenie kell a helyi tájékozott beleegyező dokumentumokat a vizsgálat megnyitása előtt. Hangsúlyozni kell, hogy a részvétel önkéntes, és a beteg bármikor visszautasíthatja a vizsgálatban való további részvételt. Ez nem sérti a beteg későbbi ellátását.

A humán biológiai anyagok (HBM) gyűjtésének általános elvei: Az emberi biológiai anyagok (HBM) gyűjtése során biológiai anyagokat, maradványbiológiai anyagokat vagy származékokat gyűjtenek és tárolnak az etikai és műszaki követelményeknek megfelelően. A biológiai anyagokat (vérmintákat) az Istituto Ortopedico Rizzoli - Dipartimento Rizzoli-Sicilia, Bagheria (Palermo) központban tárolják majd. Innentől kezdve a biológiai anyag felhasználása és tárolása a minta jellemzőinek és a vonatkozó szabályozásnak megfelelően történik.

A vérből nyert plazmát és keringő teljes RNS-t steril tartályokban (sólyom, csövek, eppendorf) tárolják fagyasztószekrényben -80 °C hőmérsékleten az Istituto Ortopedico Rizzoli - Dipartimento Rizzoli Sicilia-ban.

A HBM tárolására a következő alapelvek vonatkoznak: (a) Az Istituto Ortopedico Rizzolinak van egy kijelölt személye, aki felelős a begyűjtésért, és kommunikációs pontként fog működni; (b) A begyűjtött HBM-et dokumentálni kell, azaz a fennmaradó mennyiséget és annak helyét. kommunikációs pontként működik; és c) a biológiai anyagok tárolása és felhasználása a helyes laboratóriumi gyakorlat (GLP) szabványaival és a vonatkozó jogszabályokkal összhangban történik.

Titoktartás: A klinikai vizsgálati adatok nemzeti és európai szabályozás szerinti titkosságának biztosítása érdekében az adatok csak a vizsgálat szponzora és megbízottjai, a nyomon követési/auditálási eljárások, a vizsgáló és a munkatársak, valamint az egyes megfelelő országok etikai bizottsága számára lesznek hozzáférhetők. oldal és az Egészségügyi Hatóság. A Vizsgáló és az Intézmény az Egészségügyi Hatóság nyomon követése, auditálása, Etikai bizottsági felülvizsgálata és ellenőrzése céljából lehetővé teszi az adatokhoz és a forrásdokumentumokhoz való hozzáférést, de az érintett személyes adatok mindenkor a vonatkozó rendeletben meghatározott titoktartása mellett.

A Vizsgáló köteles garantálni, hogy a betegek anonimitását mindenkor megőrizzék, és személyazonosságát illetéktelen személyektől és intézményektől megvédjék.

A vizsgálatba bevont összes beteget numerikus kóddal azonosítjuk, így nem kerül sor azonosítható személyes adatok gyűjtésére. A Vizsgálónak rendelkeznie kell és meg kell őriznie egy betegfelvételi nyilvántartást, amely tartalmazza a beteg személyes adatait: név, vezetéknév, lakcím és a megfelelő azonosító kód a vizsgálatba, ez a nyilvántartás a vizsgálói aktán kerül vezetésre.

Közzétételi politika és adatok tulajdonjoga: A vizsgálat vezető kutatója felelős a zárójelentésért, a publikációért minden összegyűjtött adatot közzétesz a jegyzőkönyvben leírtak szerint, és gondoskodik az adatok felelősségteljes és következetes jelentéséről. Különösen a jelen tanulmányból származó adatok közzététele a kapott eredményektől függetlenül történik. Az adatok továbbítása vagy terjesztése tudományos publikációk és/vagy konferenciákon, kongresszusokon és szemináriumokon való előadásokon keresztül kizárólag ezek pusztán statisztikai feldolgozása után, vagy teljesen anonim formában történik. Az összes vizsgálati adat a szponzor tulajdona.