Identificación de microARN circulantes en la escoliosis idiopática del adolescente (IMIRSA)

MATERIALES Y MÉTODOS: 1) Recolección de una muestra de sangre venosa de pacientes incluidos en AIS o controles, y posterior separación del plasma; 2) Aislamiento del ARN total circulante del plasma de pacientes con AIS (Kit Invitrogen: Total RNA Isolation Reagent) y preparación de muestras de microARN (TaqMan™ MicroRNA Reverse Transcription Kit); 3) Análisis de perfiles de expresión de microRNA mediante técnica de microarrays (Taqman Advanced miRNAs Human CardA+B); 4) Validación de microARN desregulados mediante ensayo de qRT-PCR simple y análisis funcionales computacionales; y 5) Estudios in vitro para investigar el papel molecular de los microARN identificados dentro de los mecanismos de remodelación ósea.

Procedimientos de inscripción:

Los pacientes considerados elegibles serán inscritos en el estudio, después de proporcionar un consentimiento informado por escrito. Los sujetos sanos (grupo de control) serán reclutados, de forma voluntaria, por medio de un anuncio publicado en la página web del Instituto Ortopédico Rizzoli (www.ior.it), Sección "Noticias".

Recopilación de datos: los datos clínicos se recuperarán mediante el documento fuente del paciente. Se proporcionará un CRF específico del protocolo que informa los resultados de los análisis. Se requiere un CRF y debe completarse para cada tema incluido.

Ética: El protocolo del ensayo clínico y sus documentos serán enviados antes de iniciar el estudio a las Autoridades competentes y Comités de Ética de cada país participante para su aprobación. El investigador responsable se asegurará de que este estudio se realice de acuerdo con la Declaración de Helsinki más actualizada y todas las leyes internacionales y locales que se aplican a los ensayos clínicos y a la protección del paciente. Se ha escrito el protocolo y el estudio se llevará a cabo de acuerdo con los principios de la Guía Tripartita Armonizada de Buenas Prácticas Clínicas de la ICH (ref: http://www.emea.eu.int/pdfs/human/ich/013595en.pdf) ).

Consentimiento informado: Todos los pacientes serán informados, por parte del investigador, de los objetivos del estudio, los posibles riesgos y beneficios que se derivarán de la participación en el estudio. El Investigador debe informar claramente que el paciente es libre de rechazar la participación en el estudio y que puede retirar el consentimiento en cualquier momento y por cualquier motivo. Se informará a los pacientes sobre la estricta confidencialidad de sus datos personales, pero las historias clínicas de los pacientes inscritos podrán ser revisadas con fines de prueba por personas autorizadas que no sean su médico tratante. El procedimiento de consentimiento informado debe ajustarse a las directrices de la ICH sobre Buenas Prácticas Clínicas. Esto implica que "el formulario de consentimiento informado por escrito debe ser firmado y fechado personalmente por el paciente o por el representante legalmente aceptable del paciente".

El Investigador también debe firmar el formulario de Consentimiento Informado, y mantendrá el original en el sitio y una copia del original debe ser entregada al paciente.

El comité de ética competente de cada institución que participe en el estudio debe validar los documentos de consentimiento informado locales antes de que se pueda abrir el estudio. Se enfatizará que la participación es voluntaria y que el paciente puede negarse a continuar participando en el estudio cuando lo desee. Esto no perjudicará la atención posterior del paciente.

Principios generales para la recolección de material biológico humano (HBM): La recolección de material biológico humano (HBM) implica la recolección y el almacenamiento de material biológico, material biológico residual o derivados de conformidad con los requisitos éticos y técnicos. El material biológico (muestras de sangre) se centralizará y almacenará en el Istituto Ortopedico Rizzoli - Dipartimento Rizzoli-Sicilia, Bagheria (Palermo). A partir de aquí, el material biológico será utilizado y almacenado de acuerdo con las características de la muestra y la normativa aplicable.

El plasma y el ARN total circulante obtenido de la sangre se almacenarán en recipientes estériles (falcon, tubos, eppendorf) en un congelador a la temperatura de -80 °C en el Istituto Ortopedico Rizzoli - Dipartimento Rizzoli Sicilia.

Los siguientes principios se aplican al almacenamiento de HBM: (a) El Istituto Ortopedico Rizzoli tendrá una persona designada responsable de la recolección y actuará como punto de comunicación; (b) Se debe documentar la HBM recolectada, es decir, la cantidad restante y su ubicación. actuar como punto de comunicación; y (c) El almacenamiento y uso del material biológico se realizará de acuerdo con las normas de buenas prácticas de laboratorio (BPL) y la legislación aplicable.

Confidencialidad: Con el fin de garantizar la confidencialidad de los datos de los ensayos clínicos tal y como dispone la normativa aplicable nacional y europea, los datos solo serán accesibles para el Patrocinador del ensayo y sus designados, para los procedimientos de seguimiento/auditoría, el Investigador y colaboradores, el Comité de Ética de cada uno de los correspondientes sitio y la Autoridad Sanitaria. El Investigador y la Institución permitirán el acceso a los datos y documentación fuente para el seguimiento, auditoría, revisión del Comité de Ética e inspecciones de la Autoridad Sanitaria, pero manteniendo en todo momento la confidencialidad de los datos personales del sujeto conforme a lo establecido en la normativa aplicable.

El Investigador debe garantizar que se mantenga en todo momento el anonimato del paciente y que se proteja su identidad de personas e instituciones no autorizadas.

Todos los pacientes incluidos en el estudio serán identificados con un código numérico, por lo que no se recogerán datos personales identificables. El Investigador deberá tener y conservar un registro de inclusión de pacientes donde consigne los datos personales del paciente: nombre, apellido, dirección y código de identificación correspondiente al estudio, este registro se mantendrá en el Archivo del Investigador.

Política de publicación y propiedad de los datos: El investigador principal del estudio es responsable del informe final, de la publicación publica todos los datos recopilados como se describe en el protocolo y se asegurará de que los datos se informen de manera responsable y coherente. En particular, la publicación de los datos derivados del presente estudio se realizará con independencia de los resultados obtenidos. La transmisión o difusión de datos, a través de publicaciones científicas y/o presentación en congresos, congresos y seminarios, se realizará exclusivamente siguiendo el tratamiento puramente estadístico de los mismos, o de forma absolutamente anónima. Todos los datos del estudio son propiedad del patrocinador.