Identificação de microRNAs circulantes na escoliose idiopática do adolescente (IMIRSA)

MATERIAIS E MÉTODOS: 1) Coleta de amostra de sangue venoso de pacientes inscritos com EIA ou controles e posterior separação do plasma; 2) Isolamento do RNA total circulante do plasma de pacientes com EIA (Kit Invitrogen: Total RNA Isolation Reagent) e preparação de amostras de microRNA (TaqMan™ MicroRNA Reverse Transcription Kit); 3) Análise de perfis de expressão de microRNA pela técnica de micro-array (Taqman Advanced miRNAs Human CardA + B); 4) Validação de microRNAs desregulados por ensaio single-qRT-PCR e análises funcionais computacionais; e 5) Estudos in vitro para investigar o papel molecular dos microRNAs identificados nos mecanismos de remodelação óssea.

Procedimentos de inscrição:

Os pacientes considerados elegíveis serão incluídos no estudo, após o consentimento informado por escrito. Sujeitos saudáveis ​​(grupo controle) serão recrutados, de forma voluntária, por meio de anúncio publicado na página web do Rizzoli Orthopaedic Institute (www.ior.it), Seção "Notícias".

Coleta de dados: Os dados clínicos serão recuperados pelo documento de origem do paciente. Será fornecido um CRF específico do protocolo relatando os resultados das análises. Um CRF é necessário e deve ser preenchido para cada assunto incluído.

Ética: O protocolo do ensaio clínico e seus documentos serão enviados antes do início do estudo às Autoridades e Comitês de Ética competentes de cada país participante para sua aprovação. O investigador responsável garantirá que este estudo seja conduzido de acordo com a Declaração de Helsinki mais atualizada e todas as leis internacionais e locais que se aplicam a ensaios clínicos e à proteção do paciente. O protocolo foi escrito e o estudo será conduzido de acordo com os princípios da Diretriz Tripartite Harmonizada ICH para Boas Práticas Clínicas (ref: http://www.emea.eu.int/pdfs/human/ich/013595en.pdf ).

Consentimento Informado: Todos os pacientes serão informados, pelo investigador, sobre os objetivos do estudo, os possíveis riscos e benefícios que derivarão da participação no estudo. O Investigador deve informar claramente que o paciente é livre para recusar a participação no estudo e que pode retirar o consentimento a qualquer momento e por qualquer motivo. Os pacientes serão informados sobre a estrita confidencialidade de seus dados pessoais, mas os registros médicos dos pacientes inscritos podem ser revisados ​​para fins de teste por indivíduos autorizados que não sejam seus médicos assistentes. O procedimento de consentimento informado deve estar em conformidade com as diretrizes do ICH sobre Boas Práticas Clínicas. Isso implica que "o formulário de consentimento informado por escrito deve ser assinado e datado pessoalmente pelo paciente ou pelo representante legalmente aceitável do paciente".

O Investigador também deverá assinar o Termo de Consentimento Livre e Esclarecido, e manterá o original no local e uma cópia do original deverá ser entregue ao paciente.

O comitê de ética competente de cada Instituição participante do estudo deve validar os documentos de consentimento informado locais antes que o estudo possa ser aberto. Será enfatizado que a participação é voluntária e que o paciente pode recusar a continuação da participação no estudo sempre que desejar. Isso não prejudicará os cuidados subsequentes do paciente.

Princípios Gerais para Coleta de Material Biológico Humano (HBM): A coleta de material biológico humano (HBM) envolve a coleta e armazenamento de material biológico, material biológico residual ou derivados em conformidade com requisitos éticos e técnicos. O material biológico (amostras de sangue) será centralizado e armazenado no Istituto Ortopedico Rizzoli - Dipartimento Rizzoli-Sicilia, Bagheria (Palermo). A partir daqui, o material biológico será utilizado e armazenado de acordo com a característica da amostra e regulamentação aplicável.

O plasma e o RNA total circulante obtidos do sangue serão armazenados em recipientes estéreis (falcon, tubes, eppendorf) em freezer à temperatura de -80 °C no Istituto Ortopedico Rizzoli - Dipartimento Rizzoli Sicilia.

Os seguintes princípios se aplicam ao armazenamento de HBM: (a) O Istituto Ortopedico Rizzoli terá uma pessoa designada responsável pela coleta e atuará como um ponto de comunicação; (b) O HBM coletado deve ser documentado, ou seja, o valor restante e sua localização. atuar como ponto de comunicação; e (c) O armazenamento e uso do material biológico ocorrerá de acordo com as normas de boas práticas de laboratório (BPL) e legislação aplicável.

Confidencialidade: A fim de garantir a confidencialidade dos dados do ensaio clínico conforme disposto na regulamentação nacional e europeia aplicável, os dados serão acessíveis apenas para o Patrocinador do estudo e seus designados, para procedimentos de monitoramento/auditoria, o Investigador e colaboradores, o Comitê de Ética de cada local e a Autoridade de Saúde. O Investigador e a Instituição permitirão o acesso aos dados e documentação de origem para monitoramento, auditoria, revisão do Comitê de Ética e inspeções da Autoridade de Saúde, mas mantendo sempre a confidencialidade dos dados pessoais do sujeito, conforme especificado na regulamentação aplicável.

O Investigador deve garantir que o anonimato do paciente seja mantido em todos os momentos e sua identidade deve ser protegida de pessoas e instituições não autorizadas.

Todos os pacientes incluídos no estudo serão identificados com um código numérico, de modo que nenhum dado pessoal identificável seja coletado. O Investigador deve ter e conservar um registro de inclusão de pacientes onde constam os dados pessoais do paciente: nome, sobrenome, endereço e código de identificação correspondente ao estudo, este registro será mantido no Arquivo do Investigador.

Política de publicação e propriedade dos dados: O investigador principal do estudo é responsável pelo relatório final, da publicação publicará todos os dados coletados conforme descrito no protocolo e garantirá que os dados sejam relatados de forma responsável e consistente. Em particular, a publicação dos dados decorrentes do presente estudo ocorrerá independentemente dos resultados obtidos. A transmissão ou divulgação de dados, através de publicações científicas e/ou apresentação em conferências, congressos e seminários, decorrerá exclusivamente na sequência do tratamento meramente estatístico dos mesmos, ou de forma absolutamente anónima. Todos os dados do estudo são de propriedade do patrocinador.