Identifizierung zirkulierender microRNAs bei idiopathischer Skoliose bei Jugendlichen (IMIRSA)

MATERIALIEN UND METHODEN: 1) Entnahme einer venösen Blutprobe von Patienten mit AIS oder Kontrollpersonen und anschließende Plasmatrennung; 2) Isolierung zirkulierender Gesamt-RNA aus dem Plasma von AIS-Patienten (Kit Invitrogen: Total RNA Isolation Reagent) und Vorbereitung von microRNA-Proben (TaqMan™ MicroRNA Reverse Transcription Kit); 3) Analyse von microRNA-Expressionsprofilen mittels Micro-Array-Technik (Taqman Advanced miRNAs Human CardA + B); 4) Validierung deregulierter microRNAs durch Single-qRT-PCR-Assay und rechnergestützte Funktionsanalysen; und 5) In-vitro-Studien zur Untersuchung der molekularen Rolle der identifizierten microRNAs bei den Mechanismen des Knochenumbaus.

Anmeldeverfahren:

Als geeignet erachtete Patienten werden nach Vorlage einer schriftlichen Einverständniserklärung in die Studie aufgenommen. Gesunde Probanden (Kontrollgruppe) werden auf freiwilliger Basis durch eine auf der Webseite des Orthopädischen Instituts Rizzoli (www.ior.it) veröffentlichte Ankündigung rekrutiert. Rubrik „Neuigkeiten“.

Datenerfassung: Klinische Daten werden anhand des Quelldokuments des Patienten abgerufen. Es wird ein protokollspezifisches CRF mit den Ergebnissen der Analysen bereitgestellt. Ein CRF ist erforderlich und sollte für jedes enthaltene Fach ausgefüllt werden.

Ethik: Das klinische Studienprotokoll und seine Dokumente werden vor Beginn der Studie an die zuständigen Behörden und Ethikkommissionen jedes teilnehmenden Landes zur Genehmigung gesendet. Der verantwortliche Prüfer wird sicherstellen, dass diese Studie in Übereinstimmung mit der aktuellsten Deklaration von Helsinki und allen internationalen und lokalen Gesetzen durchgeführt wird, die für klinische Studien und den Patientenschutz gelten. Das Protokoll wurde erstellt und die Studie wird gemäß den Grundsätzen der ICH Harmonized Tripartite Guideline for Good Clinical Practice (Ref: http://www.emea.eu.int/pdfs/human/ich/013595en.pdf) durchgeführt ).

Einverständniserklärung: Alle Patienten werden vom Prüfarzt über die Ziele der Studie sowie die möglichen Risiken und Vorteile informiert, die sich aus der Studienteilnahme ergeben. Der Prüfer muss deutlich darüber informieren, dass es dem Patienten freisteht, die Teilnahme an der Studie abzulehnen, und dass er seine Einwilligung jederzeit und aus beliebigem Grund widerrufen kann. Die Patienten werden über die strikte Vertraulichkeit ihrer persönlichen Daten informiert, die Krankenakten der aufgenommenen Patienten können jedoch zu Studienzwecken von anderen autorisierten Personen als ihrem behandelnden Arzt eingesehen werden. Das Verfahren der Einwilligung nach Aufklärung muss den ICH-Richtlinien zur Guten Klinischen Praxis entsprechen. Dies impliziert, dass „die schriftliche Einwilligungserklärung vom Patienten oder seinem gesetzlich zulässigen Vertreter unterzeichnet und persönlich datiert werden sollte“.

Der Prüfer muss außerdem das Formular der Einverständniserklärung unterzeichnen und das Original vor Ort aufbewahren. Eine Kopie des Originals muss dem Patienten ausgehändigt werden.

Die zuständige Ethikkommission für jede an der Studie teilnehmende Institution muss die lokalen Einverständniserklärungen validieren, bevor die Studie eröffnet werden kann. Es wird betont, dass die Teilnahme freiwillig ist und dass der Patient die weitere Teilnahme an der Studie jederzeit ablehnen kann. Die weitere Betreuung des Patienten wird dadurch nicht beeinträchtigt.

Allgemeine Grundsätze für die Sammlung von humanem biologischem Material (HBM): Die Sammlung von humanem biologischem Material (HBM) umfasst die Sammlung und Lagerung von biologischem Material, biologischem Restmaterial oder Derivaten unter Einhaltung ethischer und technischer Anforderungen. Biologisches Material (Blutproben) wird zentralisiert und im Istituto Ortopedico Rizzoli - Dipartimento Rizzoli-Sicilia, Bagheria (Palermo) gelagert. Von hier aus wird das biologische Material gemäß den Probeneigenschaften und den geltenden Vorschriften verwendet und gelagert.

Aus Blut gewonnenes Plasma und zirkulierende Gesamt-RNA werden in sterilen Behältern (Falcon, Röhrchen, Eppendorf) in einem Gefrierschrank bei einer Temperatur von -80 °C im Istituto Ortopedico Rizzoli - Dipartimento Rizzoli Sicilia gelagert.

Für die Lagerung von HBM gelten die folgenden Grundsätze: (a) Das Istituto Ortopedico Rizzoli verfügt über eine benannte Person, die für die Sammlung verantwortlich ist und als Kommunikationsstelle fungiert. (b) Das gesammelte HBM sollte dokumentiert werden, d. h. die verbleibende Menge und sein Standort. als Kommunikationspunkt fungieren; und (c) Die Lagerung und Verwendung von biologischem Material erfolgt in Übereinstimmung mit den Standards der Guten Laborpraxis (GLP) und der geltenden Gesetzgebung.

Vertraulichkeit: Um die Vertraulichkeit der Daten klinischer Studien gemäß den geltenden nationalen und europäischen Vorschriften zu gewährleisten, sind die Daten nur für den Sponsor der Studie und seine Beauftragten, für Überwachungs-/Prüfverfahren, den Prüfer und seine Mitarbeiter sowie die Ethikkommission der jeweiligen Beteiligten zugänglich Website und die Gesundheitsbehörde. Der Prüfer und die Institution gestatten den Zugriff auf Daten und Quellendokumentation für die Überwachung, Prüfung, Überarbeitung durch den Ethikausschuss und Inspektionen der Gesundheitsbehörde, wahren jedoch jederzeit die Vertraulichkeit personenbezogener Daten des Probanden gemäß den geltenden Vorschriften.

Der Prüfer muss gewährleisten, dass die Anonymität des Patienten jederzeit gewahrt bleibt und seine Identität vor unbefugten Personen und Institutionen geschützt werden muss.

Alle in die Studie einbezogenen Patienten werden mit einem Zahlencode identifiziert, so dass keine identifizierbaren personenbezogenen Daten erhoben werden. Der Prüfer muss über ein Patienteneinschlussregister verfügen und dieses aufbewahren, in dem die personenbezogenen Daten des Patienten (Vor- und Nachname, Adresse und entsprechender Identifikationscode) in die Studie eingetragen werden. Dieses Register wird in der Prüferakte gespeichert.

Veröffentlichungsrichtlinien und Dateneigentum: Der Hauptforscher der Studie ist für den Abschlussbericht verantwortlich, veröffentlicht alle gesammelten Daten gemäß der Beschreibung im Protokoll und stellt sicher, dass die Daten verantwortungsbewusst und konsistent gemeldet werden. Insbesondere erfolgt die Veröffentlichung der aus der vorliegenden Studie abgeleiteten Daten unabhängig von den erzielten Ergebnissen. Die Übermittlung oder Verbreitung der Daten durch wissenschaftliche Veröffentlichungen und/oder Präsentationen auf Konferenzen, Kongressen und Seminaren erfolgt ausschließlich im Anschluss an die rein statistische Verarbeitung derselben oder in absolut anonymer Form. Alle Studiendaten sind Eigentum des Sponsors.