Identifikace cirkulujících mikroRNA u adolescentní idiopatické skoliózy (IMIRSA)

MATERIÁLY A METODY: 1) Odběr vzorku žilní krve od pacientů zařazených do AIS nebo kontrol a následná separace plazmy; 2) Izolace cirkulující celkové RNA z plazmy pacientů s AIS (Kit Invitrogen: Total RNA Isolation Reagent) a příprava vzorků mikroRNA (TaqMan™ MicroRNA Reverse Transscription Kit); 3) Analýza profilů exprese mikroRNA technikou micro-array (Taqman Advanced miRNAs Human CardA + B); 4) Validace deregulovaných mikroRNA testem single-qRT-PCR a výpočetními funkčními analýzami; a 5) In vitro studie pro zkoumání molekulární role mikroRNA identifikovaných v mechanismech kostní remodelace.

Postupy registrace:

Pacienti, kteří jsou považováni za způsobilé, budou zařazeni do studie po poskytnutí písemného informovaného souhlasu. Zdravé subjekty (kontrolní skupina) budou přijímány dobrovolně prostřednictvím oznámení zveřejněného na webové stránce Rizzoli Orthopedic Institute (www.ior.it), Sekce "Novinky".

Sběr dat: Klinická data budou načtena zdrojovým dokumentem pacienta. Bude poskytnut protokol CRF s hlášením o výsledcích analýz. CRF je vyžadován a měl by být vyplněn pro každý zahrnutý předmět.

Etika: Protokol klinického hodnocení a jeho dokumenty budou před zahájením studie zaslány příslušným úřadům a etickým komisím každé zúčastněné země ke schválení. Odpovědný zkoušející zajistí, že tato studie bude provedena v souladu buď s nejaktuálnější Helsinskou deklarací a všemi mezinárodními a místními zákony, které se vztahují na klinická hodnocení a na ochranu pacientů. Protokol byl sepsán a studie bude provedena podle zásad ICH Harmonizovaného tripartitního pokynu pro správnou klinickou praxi (viz: http://www.emea.eu.int/pdfs/human/ich/013595en.pdf ).

Informovaný souhlas: Všichni pacienti budou zkoušejícím informováni o cílech studie, možných rizicích a přínosech, které budou plynout z účasti ve studii. Zkoušející musí jasně informovat, že pacient může odmítnout účast ve studii a že může svůj souhlas kdykoli a z jakéhokoli důvodu odvolat. Pacienti budou informováni o přísné důvěrnosti jejich osobních údajů, ale zdravotní záznamy zapsaných pacientů mohou být pro účely hodnocení přezkoumány oprávněnými osobami jinými než jejich ošetřujícím lékařem. Postup informovaného souhlasu musí být v souladu s pokyny ICH pro správnou klinickou praxi. To znamená, že „formulář písemného informovaného souhlasu by měl být podepsán a opatřen osobním datem pacientem nebo jeho právně přijatelným zástupcem“.

Zkoušející musí také podepsat formulář informovaného souhlasu a originál si ponechá na místě a kopii originálu musí předat pacientovi.

Před zahájením studie musí kompetentní etická komise pro každou instituci účastnící se studie ověřit místní dokumenty informovaného souhlasu. Bude zdůrazněno, že účast je dobrovolná a že pacient může odmítnout další účast ve studii, kdykoli bude chtít. Tím není dotčena následná péče o pacienta.

Obecné zásady pro odběr lidského biologického materiálu (HBM): Odběr lidského biologického materiálu (HBM) zahrnuje odběr a skladování biologického materiálu, zbytkového biologického materiálu nebo derivátů v souladu s etickými a technickými požadavky. Biologický materiál (vzorky krve) bude centralizován a skladován v Istituto Ortopedico Rizzoli - Dipartimento Rizzoli-Sicilia, Bagheria (Palermo). Odtud bude biologický materiál využíván a skladován podle charakteristiky vzorku a platného předpisu.

Plazma a cirkulující celková RNA získaná z krve budou uchovávány ve sterilních nádobách (falcon, zkumavky, eppendorf) v mrazáku při teplotě -80 °C v Istituto Ortopedico Rizzoli - Dipartimento Rizzoli Sicilia.

Pro skladování HBM platí následující zásady: (a) Istituto Ortopedico Rizzoli bude mít určenou osobu odpovědnou za sběr a bude fungovat jako komunikační bod; (b) Vybrané HBM by měly být zdokumentovány, tj. zbývající množství a jeho umístění. fungovat jako komunikační bod; a (c) Skladování a používání biologického materiálu bude probíhat v souladu se standardy správné laboratorní praxe (GLP) a platnou legislativou.

Důvěrnost: Aby byla zajištěna důvěrnost údajů klinického hodnocení, jak je stanoveno v národním a evropském platném nařízení, budou údaje přístupné pouze pro zadavatele hodnocení a jeho určené osoby, pro postupy monitorování/auditů, zkoušejícího a spolupracovníky, Etickou komisi každé odpovídající místě a Zdravotním úřadem. Zkoušející a Instituce umožní přístup k datům a zdrojové dokumentaci pro monitorování, audit, revizi Etické komise a inspekce Zdravotního úřadu, ale za všech okolností zachová důvěrnost osobních údajů subjektu, jak je uvedeno v platném nařízení.

Zkoušející musí zaručit, že je vždy zachována anonymita pacienta a že jeho identita musí být chráněna před neoprávněnými osobami a institucemi.

Všichni pacienti zařazení do studie budou označeni číselným kódem, takže nebudou shromažďovány žádné identifikovatelné osobní údaje. Zkoušející musí mít a uchovávat registr zařazování pacientů, kde do studie zapisuje osobní údaje pacienta: jméno, příjmení, adresu a odpovídající identifikační kód, tento registr bude veden ve složce zkoušejícího.

Publikační politika a vlastnictví dat: Hlavní řešitel studie je odpovědný za závěrečnou zprávu, publikace zveřejňuje všechna shromážděná data, jak je popsáno v protokolu, a zajistí, že data budou hlášena zodpovědně a konzistentně. Zejména zveřejnění údajů odvozených z této studie bude probíhat nezávisle na získaných výsledcích. Předávání nebo šíření dat prostřednictvím vědeckých publikací a/nebo prezentací na konferencích, kongresech a seminářích bude probíhat výhradně po jejich čistě statistickém zpracování nebo v absolutně anonymní formě. Všechna data studie jsou ve vlastnictví sponzora.