Identificatie van circulerende microRNA's bij idiopathische scoliose bij adolescenten (IMIRSA)

MATERIALEN EN METHODEN: 1) Afname van een veneus bloedmonster van patiënten ingeschreven met AIS of controles, en daaropvolgende scheiding van plasma; 2) Isolatie van circulerend totaal RNA uit het plasma van AIS-patiënten (Kit Invitrogen: Total RNA Isolation Reagent) en bereiding van microRNA-monsters (TaqMan™ MicroRNA Reverse Transcription Kit); 3) Analyse van microRNA-expressieprofielen door middel van microarraytechniek (Taqman Advanced miRNAs Human CardA + B); 4) Validatie van gedereguleerde microRNA's door single-qRT-PCR-assay en computationele functionele analyses; en 5) In vitro studies om de moleculaire rol van de geïdentificeerde microRNA's binnen de mechanismen van botremodellering te onderzoeken.

Inschrijvingsprocedures:

Patiënten die in aanmerking komen, zullen in het onderzoek worden opgenomen, na schriftelijke geïnformeerde toestemming te hebben gegeven. Gezonde proefpersonen (controlegroep) zullen op vrijwillige basis worden aangeworven door middel van een aankondiging gepubliceerd op de webpagina van het Rizzoli Orthopedisch Instituut (www.ior.it), rubriek "Nieuws".

Gegevensverzameling: Klinische gegevens worden opgehaald via het brondocument van de patiënt. Er zal een protocolspecifiek CRF worden verstrekt waarin de resultaten van de analyses worden gerapporteerd. Een CRF is vereist en moet worden ingevuld voor elk opgenomen onderwerp.

Ethiek: Het protocol van de klinische proef en de bijbehorende documenten worden vóór aanvang van de studie naar de bevoegde autoriteiten en ethische commissies van elk deelnemend land gestuurd ter goedkeuring. De verantwoordelijke onderzoeker zal ervoor zorgen dat dit onderzoek wordt uitgevoerd in overeenstemming met de meest recente Verklaring van Helsinki en alle internationale en lokale wetten die van toepassing zijn op klinische proeven en op de bescherming van patiënten. Het protocol is geschreven en het onderzoek zal worden uitgevoerd volgens de principes van de ICH Harmonised Tripartite Guideline for Good Clinical Practice (ref: http://www.emea.eu.int/pdfs/human/ich/013595en.pdf ).

Geïnformeerde toestemming: Alle patiënten zullen door de onderzoeker worden geïnformeerd over de doelstellingen van het onderzoek, de mogelijke risico's en voordelen die zullen voortvloeien uit deelname aan het onderzoek. De onderzoeker moet er duidelijk op wijzen dat het de patiënt vrij staat deelname aan het onderzoek te weigeren en dat hij zijn toestemming op elk moment en om welke reden dan ook kan intrekken. De patiënten zullen worden geïnformeerd over de strikte vertrouwelijkheid van hun persoonlijke gegevens, maar de medische dossiers van de ingeschreven patiënten kunnen voor onderzoeksdoeleinden worden ingezien door andere bevoegde personen dan hun behandelend arts. De procedure voor geïnformeerde toestemming moet voldoen aan de ICH-richtlijnen voor goede klinische praktijken. Dit houdt in dat "het schriftelijke geïnformeerde toestemmingsformulier moet worden ondertekend en persoonlijk gedateerd door de patiënt of door de wettelijk aanvaardbare vertegenwoordiger van de patiënt".

De onderzoeker moet ook het formulier voor geïnformeerde toestemming ondertekenen en zal het origineel op de locatie bewaren en een kopie van het origineel moet aan de patiënt worden overhandigd.

De bevoegde ethische commissie van elke instelling die aan de studie deelneemt, moet lokale documenten voor geïnformeerde toestemming valideren voordat de studie kan worden geopend. Benadrukt wordt dat de deelname vrijwillig is en dat de patiënt toestemming heeft om verdere deelname aan het onderzoek te weigeren wanneer hij/zij dat wil. Dit doet geen afbreuk aan de verdere zorg van de patiënt.

Algemene principes voor het verzamelen van menselijk biologisch materiaal (HBM): Het verzamelen van menselijk biologisch materiaal (HBM) omvat het verzamelen en opslaan van biologisch materiaal, resterend biologisch materiaal of derivaten in overeenstemming met ethische en technische vereisten. Biologisch materiaal (bloedmonsters) zal worden gecentraliseerd en opgeslagen bij Istituto Ortopedico Rizzoli - Dipartimento Rizzoli-Sicilia, Bagheria (Palermo). Van hieruit wordt het biologisch materiaal gebruikt en opgeslagen volgens het monsterkenmerk en de geldende regelgeving.

Plasma en circulerend totaal RNA verkregen uit bloed zullen worden opgeslagen in steriele containers (falcon, tubes, eppendorf) in een vriezer bij een temperatuur van -80 °C in het Istituto Ortopedico Rizzoli - Dipartimento Rizzoli Sicilia.

De volgende principes zijn van toepassing op de opslag van HBM: (a) Het Istituto Ortopedico Rizzoli heeft een aangewezen persoon die verantwoordelijk is voor de inzameling en zal optreden als communicatiepunt; (b) De verzamelde HBM moet worden gedocumenteerd, d.w.z. de resterende hoeveelheid en de locatie ervan. fungeren als communicatiepunt; en (c) De opslag en het gebruik van biologisch materiaal zal plaatsvinden in overeenstemming met de normen van goede laboratoriumpraktijken (GLP) en toepasselijke wetgeving.

Vertrouwelijkheid: om de vertrouwelijkheid van klinische onderzoeksgegevens te waarborgen, zoals bepaald in de nationale en Europese toepasselijke regelgeving, zijn gegevens alleen toegankelijk voor de onderzoekssponsor en zijn aangewezen personen, voor monitoring-/auditprocedures, de onderzoeker en medewerkers, de ethische commissie van elke corresponderende site en de GGD. De onderzoeker en de instelling zullen toegang verlenen tot gegevens en brondocumentatie voor monitoring, auditing, herziening door de ethische commissie en inspecties van de gezondheidsautoriteit, maar zullen te allen tijde de vertrouwelijkheid van de persoonlijke gegevens van de betrokkenen behouden zoals gespecificeerd in de toepasselijke regelgeving.

De Onderzoeker moet garanderen dat de anonimiteit van de patiënt te allen tijde wordt bewaard en dat zijn identiteit wordt beschermd tegen onbevoegde personen en instellingen.

Alle patiënten die in de studie worden opgenomen, worden geïdentificeerd met een cijfercode, zodat er geen identificeerbare persoonlijke gegevens worden verzameld. De onderzoeker moet een patiëntenregistratieregister hebben en bewaren waarin de persoonlijke gegevens van de patiënt worden ingevoerd: naam, achternaam, adres en bijbehorende identificatiecode in het onderzoek. Dit register wordt bewaard in het dossier van de onderzoeker.

Publicatiebeleid en data-eigendom: De hoofdonderzoeker van het onderzoek is verantwoordelijk voor het eindrapport, van de publicatie publiceert alle verzamelde gegevens zoals beschreven in het protocol en zorgt ervoor dat de gegevens op verantwoorde en consistente wijze worden gerapporteerd. In het bijzonder zal de publicatie van gegevens die voortvloeien uit de huidige studie onafhankelijk van de verkregen resultaten plaatsvinden. De overdracht of verspreiding van gegevens, via wetenschappelijke publicaties en/of presentaties op conferenties, congressen en seminaries, vindt uitsluitend plaats na zuiver statistische verwerking ervan, of in absoluut anonieme vorm. Alle onderzoeksgegevens zijn eigendom van de opdrachtgever.