Identifikation af cirkulerende mikroRNA'er i adolescent idiopatisk skoliose (IMIRSA)

MATERIALER OG METODER: 1) Indsamling af en venøs blodprøve fra patienter indskrevet med AIS eller kontroller og efterfølgende adskillelse af plasma; 2) Isolering af cirkulerende totalt RNA fra plasma fra AIS-patienter (Kit Invitrogen: Total RNA Isolation Reagent) og klargøring af mikroRNA-prøver (TaqMan™ MicroRNA Reverse Transcription Kit); 3) Analyse af mikroRNA-ekspressionsprofiler ved mikro-array-teknik (Taqman Advanced miRNAs Human CardA + B); 4) Validering af deregulerede mikroRNA'er ved enkelt-qRT-PCR-assay og beregningsmæssige funktionelle analyser; og 5) In vitro undersøgelser for at undersøge den molekylære rolle af mikroRNA'erne identificeret inden for mekanismerne for knogleombygning.

Tilmeldingsprocedurer:

Patienter, der anses for kvalificerede, vil blive tilmeldt undersøgelsen efter at have givet et skriftligt informeret samtykke. Sunde forsøgspersoner (kontrolgruppe) vil blive rekrutteret på frivillig basis ved hjælp af en meddelelse offentliggjort på hjemmesiden for Rizzoli Orthopaedic Institute (www.ior.it), "Nyheder".

Dataindsamling: Kliniske data vil blive hentet af patientens kildedokument. En protokolspecifik CRF, der rapporterer resultaterne af analyserne, vil blive leveret. En CRF er påkrævet og bør udfyldes for hvert inkluderet emne.

Etik: Protokollen for det kliniske forsøg og dens dokumenter vil blive sendt til de kompetente myndigheder og etiske komitéer i hvert deltagende land, inden undersøgelsen påbegyndes, til godkendelse. Den ansvarlige investigator vil sikre, at denne undersøgelse udføres i overensstemmelse med enten den mest opdaterede Helsinki-erklæring og alle de internationale og lokale love, der gælder for kliniske forsøg og patientbeskyttelse. Protokollen er skrevet, og undersøgelsen vil blive udført i overensstemmelse med principperne i ICH Harmonized Tripartite Guideline for Good Clinical Practice (ref: http://www.emea.eu.int/pdfs/human/ich/013595en.pdf ).

Informeret samtykke: Alle patienter vil af investigator blive informeret om formålet med undersøgelsen, de mulige risici og fordele, der vil være forbundet med undersøgelsesdeltagelsen. Investigator skal tydeligt informere om, at patienten frit kan nægte deltagelse i undersøgelsen, og at han til enhver tid og uanset årsag kan trække sit samtykke tilbage. Patienterne vil blive informeret om den strenge fortrolighed af deres personlige data, men de tilmeldte patienters lægejournaler kan blive gennemgået til forsøgsformål af andre autoriserede personer end deres behandlende læge. Proceduren for informeret samtykke skal være i overensstemmelse med ICHs retningslinjer for god klinisk praksis. Dette indebærer, at "den skriftlige informerede samtykkeformular skal være underskrevet og personligt dateret af patienten eller af patientens juridisk acceptable repræsentant".

Efterforskeren skal også underskrive formularen med informeret samtykke og opbevarer originalen på stedet, og en kopi af originalen skal udleveres til patienten.

Den kompetente etiske komité for hver institution, der deltager i undersøgelsen, skal validere lokale informerede samtykkedokumenter, før undersøgelsen kan åbnes. Det vil blive understreget, at deltagelsen er frivillig, og at patienten har lov til at nægte yderligere deltagelse i undersøgelsen, når han/hun ønsker det. Dette vil ikke være til skade for patientens efterfølgende pleje.

Generelle principper for indsamling af humant biologisk materiale (HBM): Indsamling af humant biologisk materiale (HBM) involverer indsamling og opbevaring af biologisk materiale, biologisk restmateriale eller derivater i overensstemmelse med etiske og tekniske krav. Biologisk materiale (blodprøver) vil blive centraliseret og opbevaret i Istituto Ortopedico Rizzoli - Dipartimento Rizzoli-Sicilia, Bagheria (Palermo). Herfra vil det biologiske materiale blive brugt og opbevaret i overensstemmelse med prøvekarakteristika og gældende regulering.

Plasma og cirkulerende total-RNA opnået fra blod vil blive opbevaret i sterile beholdere (falk, rør, eppendorf) i en fryser ved en temperatur på -80 °C ved Istituto Ortopedico Rizzoli - Dipartimento Rizzoli Sicilia.

Følgende principper gælder for opbevaring af HBM: (a) Istituto Ortopedico Rizzoli vil have en udpeget person, der er ansvarlig for indsamling og vil fungere som et kommunikationspunkt; (b) Den indsamlede HBM skal dokumenteres, dvs. den resterende mængde og dens placering. fungere som et kommunikationspunkt; og (c) Opbevaring og brug af biologisk materiale vil finde sted i overensstemmelse med standarderne for god laboratoriepraksis (GLP) og gældende lovgivning.

Fortrolighed: For at sikre fortroligheden af ​​kliniske forsøgsdata som disponeret i den nationale og europæiske gældende lovgivning, vil data kun være tilgængelige for forsøgssponsoren og dens udpegede, til overvågnings-/revisionsprocedurer, investigator og samarbejdspartnere, den etiske komité for hver tilsvarende stedet og Sundhedsstyrelsen. Efterforsker og institutionen vil give adgang til data og kildedokumentation til overvågning, revision, revision af den etiske komité og inspektioner af sundhedsmyndighederne, men opretholder til enhver tid underlagt persondatafortrolighed som specificeret i den gældende forordning.

Investigator skal garantere, at patientens anonymitet til enhver tid bevares, og deres identitet skal beskyttes mod uvedkommende personer og institutioner.

Alle patienter, der indgår i undersøgelsen, vil blive identificeret med en numerisk kode, således at der ikke vil blive indsamlet identificerbare persondata. Investigator skal have og opbevare et patientinklusionsregister, hvor det registrerer patientens personlige data: navn, efternavn, adresse og tilsvarende identifikationskode i undersøgelsen. Dette register vil blive opbevaret i Investigator File.

Publikationspolitik og dataejerskab: Undersøgelsens hovedinvestigator er ansvarlig for den endelige rapport, af publikationen offentliggøre alle de indsamlede data som beskrevet i protokollen og vil sikre, at dataene rapporteres ansvarligt og konsekvent. Især vil offentliggørelsen af ​​data, der stammer fra denne undersøgelse, finde sted uafhængigt af de opnåede resultater. Overførslen eller formidlingen af ​​data, gennem videnskabelige publikationer og/eller præsentation på konferencer, kongresser og seminarer, vil udelukkende finde sted efter den rent statistiske behandling af samme, eller i en absolut anonym form. Alle undersøgelsesdata ejes af sponsoren.