Identyfikacja krążących mikroRNA w młodzieńczej skoliozie idiopatycznej (IMIRSA)

MATERIAŁY I METODY: 1) Pobranie próbki krwi żylnej od pacjentów włączonych do AIS lub z grupy kontrolnej, a następnie oddzielenie osocza; 2) Izolacja krążącego całkowitego RNA z osocza pacjentów z AIS (Kit Invitrogen: Total RNA Isolation Reagent) i przygotowanie próbek mikroRNA (TaqMan™ MicroRNA Reverse Transcription Kit); 3) Analiza profili ekspresji mikroRNA techniką mikromacierzy (Taqman Advanced miRNAs Human CardA + B); 4) Walidacja rozregulowanych mikroRNA za pomocą pojedynczego testu qRT-PCR i obliczeniowych analiz funkcjonalnych; oraz 5) Badania in vitro w celu zbadania molekularnej roli mikroRNA zidentyfikowanych w mechanizmach przebudowy kości.

Procedury rejestracji:

Pacjenci uznani za kwalifikujących się zostaną włączeni do badania po wyrażeniu pisemnej świadomej zgody. Osoby zdrowe (grupa kontrolna) będą rekrutowane na zasadzie dobrowolności, poprzez ogłoszenie opublikowane na stronie internetowej Rizzoli Orthopaedic Institute (www.ior.it), dział "Aktualności".

Gromadzenie danych: Dane kliniczne zostaną pobrane z dokumentu źródłowego pacjenta. Zostanie dostarczony CRF specyficzny dla protokołu, zawierający wyniki analiz. Wymagany jest CRF, który należy wypełnić dla każdego uwzględnionego przedmiotu.

Etyka: Protokół badania klinicznego i jego dokumenty zostaną przesłane przed rozpoczęciem badania do właściwych władz i komisji etycznych każdego uczestniczącego kraju w celu ich zatwierdzenia. Odpowiedzialny badacz dopilnuje, aby to badanie zostało przeprowadzone zgodnie z najbardziej aktualną Deklaracją Helsińską oraz wszystkimi międzynarodowymi i lokalnymi przepisami mającymi zastosowanie do badań klinicznych i ochrony pacjentów. Protokół został spisany, a badanie zostanie przeprowadzone zgodnie z zasadami ICH Harmonized Tripartite Guideline for Good Clinical Practice (ref: http://www.emea.eu.int/pdfs/human/ich/013595en.pdf ).

Świadoma zgoda: wszyscy pacjenci zostaną poinformowani przez badacza o celach badania, możliwych zagrożeniach i korzyściach wynikających z udziału w badaniu. Badacz musi wyraźnie poinformować, że pacjent może odmówić udziału w badaniu oraz że może wycofać zgodę w dowolnym momencie iz dowolnego powodu. Pacjenci zostaną poinformowani o ścisłej poufności ich danych osobowych, ale dokumentacja medyczna zapisanych pacjentów może być przeglądana do celów próbnych przez upoważnione osoby inne niż ich lekarz prowadzący. Procedura świadomej zgody musi być zgodna z wytycznymi ICH dotyczącymi dobrej praktyki klinicznej. Oznacza to, że „pisemny formularz świadomej zgody powinien być podpisany i opatrzony datą własnoręcznie przez pacjenta lub przez jego prawnie akceptowanego przedstawiciela”.

Badacz musi również podpisać formularz świadomej zgody i zachowa oryginał w miejscu badania, a kopię oryginału należy przekazać pacjentowi.

Właściwa komisja etyczna dla każdej instytucji uczestniczącej w badaniu musi zweryfikować lokalne dokumenty świadomej zgody przed otwarciem badania. Zostanie podkreślone, że udział w badaniu jest dobrowolny i pacjent może odmówić dalszego udziału w badaniu, kiedy tylko zechce. Nie wpłynie to negatywnie na późniejszą opiekę nad pacjentem.

Ogólne zasady pobierania ludzkiego materiału biologicznego (HBM): Gromadzenie ludzkiego materiału biologicznego (HBM) obejmuje gromadzenie i przechowywanie materiału biologicznego, pozostałości materiału biologicznego lub pochodnych zgodnie z wymogami etycznymi i technicznymi. Materiał biologiczny (próbki krwi) będzie scentralizowany i przechowywany w Istituto Ortopedico Rizzoli - Dipartimento Rizzoli-Sicilia, Bagheria (Palermo). Odtąd materiał biologiczny będzie używany i przechowywany zgodnie z charakterystyką próbki i obowiązującymi przepisami.

Osocze i krążący całkowity RNA pozyskany z krwi będzie przechowywany w sterylnych pojemnikach (falcon, probówki, eppendorf) w zamrażarce w temperaturze -80°C w Istituto Ortopedico Rizzoli - Dipartimento Rizzoli Sicilia.

Następujące zasady mają zastosowanie do przechowywania HBM: (a) Istituto Ortopedico Rizzoli będzie miało wyznaczoną osobę odpowiedzialną za pobieranie i będzie działać jako punkt komunikacyjny; (b) Pobrany HBM powinien być udokumentowany, tj. pozostała ilość i miejsce jej umieszczenia. działać jako punkt komunikacyjny; oraz (c) Przechowywanie i wykorzystywanie materiału biologicznego odbywać się będzie zgodnie ze standardami dobrej praktyki laboratoryjnej (GLP) i obowiązującymi przepisami prawa.

Poufność: Aby zapewnić poufność danych z badania klinicznego zgodnie z obowiązującymi przepisami krajowymi i europejskimi, dane będą dostępne wyłącznie dla Sponsora badania i wyznaczonych przez niego osób, na potrzeby procedur monitorowania/audytu, Badacza i współpracowników, Komitetu ds. witrynę i Urząd ds. Zdrowia. Badacz i Instytucja zezwolą na dostęp do danych i dokumentacji źródłowej w celu monitorowania, audytu, rewizji Komisji Etyki oraz inspekcji Urzędu Zdrowia, ale zachowując przez cały czas poufność danych osobowych podmiotu, zgodnie z obowiązującymi przepisami.

Badacz musi gwarantować stałe zachowanie anonimowości pacjentów i ochronę ich tożsamości przed osobami i instytucjami nieupoważnionymi.

Wszyscy pacjenci włączeni do badania zostaną zidentyfikowani za pomocą kodu numerycznego, dzięki czemu nie zostaną zebrane żadne dane osobowe umożliwiające identyfikację. Badacz musi posiadać i przechowywać rejestr włączenia pacjentów, w którym umieszcza dane osobowe pacjenta: imię, nazwisko, adres i odpowiedni kod identyfikacyjny do badania, rejestr ten będzie prowadzony w aktach badacza.

Polityka publikacji i własność danych: Główny badacz badania jest odpowiedzialny za raport końcowy, publikuje wszystkie zebrane dane zgodnie z protokołem i zapewnia odpowiedzialne i spójne zgłaszanie danych. W szczególności publikacja danych pochodzących z niniejszego badania będzie miała miejsce niezależnie od uzyskanych wyników. Przekazywanie lub rozpowszechnianie danych poprzez publikacje naukowe i/lub prezentacje na konferencjach, kongresach i seminariach będzie odbywać się wyłącznie po ich czysto statystycznym przetworzeniu lub w całkowicie anonimowej formie. Wszystkie dane z badania są własnością sponsora.