Epigenetiikka ADHD:ssä
Epigenetiikan tuleva rooli tarkkaavaisuus-/hyperaktiivisuushäiriössä/hyperaktiivisuushäiriössä
Huomio-/hyperaktiivisuushäiriö (ADHD) on yksi yleisimmistä lasten ja nuorten psykiatrisista häiriöistä. ADHD:n nosologia perustuu suurelta osin kliiniseen fenomenologiaan, joka sisältää sellaisia oireita kuin tarkkaamattomuus, yliaktiivisuus ja impulsiivisuus. Luotettavaa ADHD-biomarkkeria ei kuitenkaan ole vielä määritetty erotusdiagnoosia tai hoitovaikutusten seurantaa varten. MikroRNA:t (miRNA:t) ovat pieniä ei-koodaavia RNA-molekyylejä, jotka toimivat RNA:n hiljentämisprosessissa ja geeniekspression transkription jälkeisessä säätelyssä. MiRNA:ita löytyy runsaasti kaikkialla hermostossa ja niillä on elintärkeä rooli transkriptioverkostoissa ihmisen aivojen kehityksen kannalta. Tällä hetkellä miRNA:iden osallistuminen ADHD:n patogeneesiin on edelleen epäselvää. Siksi tämän tutkimuksen tavoitteena on tutkia miRNA:iden tulevaa roolia ADHD:ssa ja määrittää, voivatko miRNA-tasot ääreisveressä toimia ADHD:n biomarkkerina ja diagnoosipaneelina.
Esitutkimuksessa otettiin verinäytteitä viideltä ADHD-potilaalta ja viideltä terveeltä kontrollihenkilöltä. Seuraavan sukupolven sekvensointitekniikoiden (NGS) käyttö on tunnistanut 23 miRNA:ta mahdollisiksi ADHD:n biomarkkeriksi. Tämän kolmivuotisen ehdotuksen aikana aiomme rekrytoida 100 ADHD-potilasta, jotka eivät ole aiemmin käyttäneet lääkkeitä, ja 100 iän ja sukupuolen mukaan verrokkihenkilöä (Training Set). Jokaiselta osallistujalta otetaan verta puhkaisemalla suoraan suonen miRNA:iden analysoimiseksi käyttämällä kvantitatiivista käänteistranskriptiopolymeraasiketjureaktiota (qRT-PCR). Jokaisen osallistujan käyttäytyminen ja neuropsykologia arvioidaan. Tämä tutkimus rakentaa miRNA-diagnoosipaneelin käyttämällä Support Vector Machine (SVM) -luokitusmallia ADHD:n erottamiseksi ei-ADHD:sta. MiRNA-diagnoosipaneelin validiteetti tutkitaan sitten uudelleen käyttämällä riippumatonta validointinäytettä, joka koostuu 50 ADHD-potilaasta ja 50 kontrollihenkilöstä (testaussarja). Kaikki 150 ADHD-potilasta saavat hoitoa perinteisessä kliinisessä käytännössä, minkä jälkeen heitä seurataan 12 kuukauden ajan. Kahdennentoista kuukauden kohdalla toistetaan samat menettelyt kuin lähtötilanteessa suoritetut toimenpiteet, jotta voidaan tutkia ADHD-lääkkeiden vaikutusta miRNA:ihin sekä määrittää, voivatko miRNA:t toimia biomarkkerina kuvaamaan hoidossa olevan ADHD:n tilaa. Myös MiRNA-kohdegeenin ennustaminen ja toiminnallinen annotaatioanalyysi suoritetaan.
Tämä tutkimus kehittää potentiaalisen diagnostisen paneelin ADHD:lle käyttämällä useiden miRNA-ilmentymien yhdistelmiä. Tarjoamme todisteita miRNA-profiilien ja ADHD-ilmiöiden suhteista kliinisissä näytteissä ja selitämme edelleen ADHD:n molekyylipatogeneesiä. Tällaisista tiedoista voi tulla tärkeä referenssi tulevaa tutkimusta ja ADHD-potilaiden kliinistä hoitoa varten.
Tutkimuksen yleiskatsaus
Tila
Yksityiskohtainen kuvaus
Vuosi 1: Rekrytoidaan 100 ADHD-potilasta ja 100 tervettä kontrollihenkilöä (koulutussarja) kehittämään ADHD:n miRNA-diagnoosipaneeli
1. Tähän tutkimukseen rekrytoidaan sata kelvollista ADHD-potilasta, joita hoidetaan Taiwanin Kaohsiung Chang Gung Memorial Hospitalin lastenpsykiatrian avohoitoosastolla. Sata ikään ja sukupuoleen sopivaa kontrollihenkilöä löytyy samalta vaikutusalueelta kuin potilaiden. Saatuaan tietoisen suostumuksen vanhemmiltaan tai huoltajilta tutkimuspsykiatrit haastattelevat osallistujia K-SADS-E:n avulla diagnoosin vahvistamiseksi. Osallistujat myös käyvät läpi WISC-IV-arvioinnin kehitysvammaisten sulkemiseksi pois.
2. Sekä ADHD-potilaille että terveille kontrollihenkilöille kokeneet lapsipsykologit suorittavat Conners CPT- ja Conners CATA -testauksen huoneessa, joka on suunniteltu vähentämään epäjohdonmukaisia testausolosuhteita. Vanhempien tai huoltajien on täytettävä SNAP-IV-vanhempainlomake ja SAICA. potilaiden opettajien on täytettävä SNAP-IV opettajalomake; ADHD-RS:n ja CGI:n suorittaa ja arvioi vastaavasti lastenpsykiatri.
3. Laskimoveri kerätään jokaiselta osallistujalta EDTA-antikoagulanttiputkeen. Verinäytteitä käsitellään edelleen mirVana miRNA-eristyssarjalla (Life-teknologia) kokonais-RNA:iden erottamiseksi. Alustavien havaintojen perusteella määritetään 22 miRNA-ehdokkaan ΔCt-arvot 100 ADHD-näytteelle ja 100 kontrollinäytteelle. Sitten valitaan 10 pienimmän p-arvon omaavaa miRNA:ta kehittämään miRNA-diagnoosipaneeli ADHD:lle toisena vuonna.
4. ADHD-potilaita ja terveitä kontrollihenkilöitä seurataan 12 kuukauden ajan. Tänä aikana ADHD-potilaiden hoitotoimenpiteet määräytyvät potilaiden psykiatrien perinteisen käytännön sekä potilaiden ja heidän vanhempiensa sopimuksen mukaan.
- ADHD-potilaille, jotka päättävät saada lääketieteellistä hoitoa, määrätään suun kautta annettava lyhytvaikutteinen MPH (MPH-IR) kaksi tai kolme kertaa päivässä, kunkin annoksen ollessa 0,3–1,0 mg/kg, joka määräytyy heidän kliinisen sairauden vaikeusasteen perusteella. oireita sekä heidän ikänsä, pituutensa ja painonsa.
- Annosta säädetään kahden viikon välein ADHD-oireiden parantamiseksi. Pitkävaikutteisen MPH:n (Ritalin-LA) tai pitkävaikutteisen metyylifenidaatin (Concerta) muutokset ovat sallittuja kliinisistä vaatimuksista riippuen. MPH-IR:n ja Ritalin-LA:n enimmäisannokset päivässä ovat 60 mg ja Concertan 54 mg, koska nämä ovat Taiwanissa hyväksytyt enimmäisvuorokausiannokset. Annosta pienennetään, jos ilmaantuu kliinisesti sietämättömiä haittavaikutuksia. MPH:n lopullinen titrausannos, jolla on hyväksyttävä vaste, säilytetään seurantajakson ajan.
- Samanaikainen lääkitys on kielletty. Lääkehoidon noudattaminen tarkistetaan jokaisella käynnillä potilaiden vanhempien raporttien ja reseptin jäljellä olevan määrän perusteella. Potilaat, jotka aloittavat uuden lääkkeen tutkimuksen eri ajankohtien välillä, katsotaan keskeyttäneiksi.
- ADHD-potilaat, jotka päättävät olla saamatta lääketieteellistä hoitoa, arvioidaan yleensä poliklinikalla kerran kuukaudessa uudelleen lastenpsykiatrin toimesta ja voivat saada käyttäytymisterapiaa tai uudelleenkasvatuspsykoterapiaa tutkimuksen ajan.
- Terveet kontrollihenkilöt arvioidaan vain kerran, lähtötilanteessa. 5. ADHD-potilaat arvioidaan uudelleen kahdentenatoista kuukauden kuluttua lähtötilanteesta. Arviointimenettelyt, mukaan lukien miRNA-analyysi ja ADHD-mittaukset, jotka annettiin lähtötilanteessa, toistetaan.
Vuosi 2: SVM-luokitusmallin kehittäminen ja riippumattoman validointiryhmän rekisteröinti, jossa on 50 ADHD-potilasta ja 50 tervettä kontrollihenkilöä (testaussarja)
- Jo kerättyjen näytteiden perusteella voidaan määrittää 10 erilaisesti ilmentynyttä miRNA:ta ADHD-ryhmän ja kontrolliryhmän välillä. Näitä 10 arvoa voidaan käyttää SVM-luokitusmallin johtamiseen ja luotettavan ja vahvan miRNA-diagnoosipaneelin luomiseen ADHD:lle. Tämän miRNA-diagnoosipaneelin validiteetin arvioimiseksi käytetään vastaanottimen toimintaominaisuuksien (ROC) käyriä. Tämän paneelin spesifisyyden ja herkkyyden odotetaan saavuttavan 80 %.
- Riippumattomaan validointiryhmään (testaussarja) rekrytoidaan 50 kelvollista ADHD-potilasta ja 50 ikään ja sukupuoleen sopivaa tervettä kontrollihenkilöä. Tutkimuspsykiatrit haastattelevat osallistujia K-SADS-E:n avulla diagnoosin vahvistamiseksi, ja osallistujille tehdään myös WISC-IV-arviointi, jolla voidaan sulkea pois kehitysvamma.
- Kaikilla ADHD-potilailla ja terveillä kontrollihenkilöillä on kokeneet lapsipsykologit, jotka suorittavat Connersin CPT- ja Connersin CATA-testejä. Osallistujien vanhempien tai huoltajien on täytettävä SNAP-IV-vanhempainlomake ja SAICA; potilaan opettajien on täytettävä SNAP-IV opettajalomake; ADHD-RS:n ja CGI:n suorittaa ja arvioi vastaavasti lastenpsykiatri.
- Laskimoveri kerätään jokaiselta osallistujalta EDTA-antikoagulanttiputkella. Verinäytteitä käsitellään edelleen mirVana miRNA-eristyssarjalla (Life-teknologia) kokonais-RNA:iden erottamiseksi. SVM-luokitusmalliin valitun 10 miRNA:n tasot määritetään qRT-PCR:llä.
- Harjoitussarjan tulosten tarkistamiseksi miRNA-diagnoosipaneeli käyttää testisarjan miRNA-tietoja (sekä 50 ADHD-potilasta että 50 tervettä kontrollihenkilöä) sokkotestaukseen. Erottelun validiteetti odottaa sekä herkkyyden että spesifisyyden saavuttavan 80 %.
- ADHD-potilaiden hoito- ja seurantamenettelyt ovat samat kuin ensimmäisenä vuonna. Ensimmäisen vuoden aikana palkattuja 100 ADHD-potilasta seurataan ja arvioidaan uudelleen
Vuosi 3: ADHD-potilaiden 12 kuukauden seuranta ja kohdegeenien ja miRNA:iden rikastumisreittien analyysi
- Uusia osallistujia ei rekrytoida kolmantena vuonna. Kaikkien 150 ADHD-potilaan 12 kuukauden seuranta valmistuu tämän vuoden aikana.
- Toinen ADHD-potilaiden arviointi suoritetaan tämän tutkimuksen päättämiseksi (kahdestoista kuukautta lähtötilanteen jälkeen). Samat arviointimenettelyt, joita annettiin lähtötilanteessa, toistetaan.
(1) Verinäytteet kerätään ja käsitellään uudelleen miRNA:iden uuttamiseksi. (2) Tutkimuspsykiatri haastattelee ADHD-potilaita K-SADS-E:n avulla varmistaakseen, että potilaat täyttävät edelleen ADHD:n diagnostiset kriteerit.
(3) ADHD-potilaille tehdään neuropsykologiset testit (WISC-IV, Conners CPT ja Conners CATA) ja heidän käyttäytymisoireensa (SNAP-IV, SAICA, ADHD-RS ja CGI) arvioivat sama arvioija lähtötilanteessa. Lääkkeistä johtuvien harhojen välttämiseksi ADHD-potilaita kehotetaan olemaan ottamatta lääkitystään neuropsykologisen arvioinnin päivänä.
3. MiRNA-tasojen trendit 12 kuukauden seurannan aikana tunnistetaan. Erilaiset miRNA-tasot potilaiden välillä, joilla on MPH-hoitoa ja ilman MPH-hoitoa, sekä potilaiden välillä, jotka jatkavat hoitoa verrattuna ADHD-diagnoosista poistuviin potilaisiin, arvioidaan. Selvitetään, voivatko miRNA:t toimia biomarkkerina, joka kuvaa ADHD-tilaa hoidon jälkeen.
4. Erilaisesti ilmentyneiden miRNA:iden ennustetut kohdegeenit ja niiden rikastumisreitit saadaan käyttämällä TargetScan v6.2:ta, miRWalkia ja DIANA-microT:tä. Haku keskittyy yksinomaan kohdemiRNA:iden 3'-UTR-alueisiin, joiden p-arvo on 0,05, mikä määrittää ohjelmistoon asetettujen satunnaisten osumien todennäköisyysjakauman, jonka miRNA-siemenpituus on vähintään 7.
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Todellinen)
Yhteystiedot ja paikat
Opiskelupaikat
-
-
-
Kaohsiung, Taiwan
- Liang-Jen Wang
-
-
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Sukupuolet, jotka voivat opiskella
Näytteenottomenetelmä
Tutkimusväestö
- ADHD-potilaat rekrytoidaan Kaohsiung Chang Gung Memorial Hospitalin avohoitoosastolta, Kaohsiungin kaupungista Taiwanista
- Terveet kontrollit rekrytoidaan Kaohsiung Chang Gung Memorial Hospitalin henkilökunnasta ja Kaohsiungin kaupungin yhteisöistä Taiwanissa
Kuvaus
ADHD
Sisällyttämiskriteerit:
- Mielenterveyshäiriöiden diagnostinen ja tilastollinen käsikirja, neljäs painos
- Jokaisen lapsen diagnoosin piti tehdä lastenpsykiatri jäsennellyssä haastattelussa, jossa käytettiin Kiddie Epidemiologic Version of the Schedule for Affective Disorders and Skitsofrenia (K-SADS-E) -versiota.
Poissulkemiskriteerit:
- Neuropsykiatristen sairauksien historia
- Kaikki tunnetut vakavat fyysiset sairaudet
- Ollut mitä tahansa lääkkeitä ADHD:n hoitoon
Terveys
Sisällyttämiskriteerit:
- Ikä- ja sukupuolisuhteet lapset, joilla ei ole ADHD:tä
Poissulkemiskriteerit:
- Neuropsykiatristen sairauksien historia
- Kaikki tunnetut vakavat fyysiset sairaudet
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
- Havaintomallit: Case-Control
- Aikanäkymät: Tulevaisuuden
Kohortit ja interventiot
Ryhmä/Kohortti |
|---|
|
ADHD
Verinäyte miRNA qRT-PCR:ää varten Käyttäytymis- ja neuropsykologiset arvioinnit |
|
Terve
Verinäyte miRNA qRT-PCR:ää varten Käyttäytymis- ja neuropsykologiset arvioinnit |
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
miRNA:t
Aikaikkuna: 10 min
|
Alustavat tulokset 23 ehdokkaasta miRNA:sta, jotka voivat toimia NGS-tekniikalla tunnistettuina biomarkkereina
|
10 min
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Sponsori
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus (Todellinen)
Ensisijainen valmistuminen (Todellinen)
Opintojen valmistuminen (Todellinen)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (Todellinen)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Todellinen)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja
Muut tutkimustunnusnumerot
- 104-3522C
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .