Immunosesenssin torjunta ja immuniteetin edistäminen paastoamista jäljittelevällä ruokavaliolla Vanhukset.

Suoritetaan vaiheen I/II satunnaistettu kliininen tutkimus, jossa arvioidaan kahden suu- ja sorkkatautisyklin (1 viikko) toteutettavuutta, turvallisuutta ja tehokkuutta (rokotusvasteen paraneminen, mutta myös toiminnallisen tilan paraneminen tai ylläpito), jotka annetaan 30 päivän välein influenssarokotus iäkkäillä potilailla. Tutkimukseen otetaan mukaan 40 iältään 65-80-vuotiasta esihairasta koehenkilöä. Koehenkilöt suljetaan pois, jos heillä on tiedossa immunosuppressiivisia sairauksia tai lääkkeitä tai he eivät ole saaneet influenssarokotusta kahden edellisen vuoden aikana. Koehenkilöt satunnaistetaan 1:1 käsivarteen A (FMD) tai käsivarteen B (tavallinen ruokavalio). Käsien A koehenkilöt saavat 5 päivän suu- ja sorkkatautiruokavalion kerran kuukaudessa 2 kuukauden ajan (2 sykliä 40 päivässä: 5-30-5).

Tämä perustuu hoito-ohjelmaan, joka omaksuttiin käynnissä olevassa tutkimuksessamme nuoremmilla koehenkilöillä, mutta siihen sisältyy yksi sykli vähemmän painonpudotuksen ja muiden mahdollisten sivuvaikutusten minimoimiseksi iäkkäillä koehenkilöillä. Ensisijainen päätepiste on ruokavalion turvallisuus: ruokavalion sivuvaikutuksia arvioidaan painonmuutoksen, päänsäryn, verenpaineen ja tarkkailemalla kehon koostumusta eli laihaa massaa bioimpedanssimittauksilla, kädensijan vahvuudella ja DEXA-skannauksilla. Toissijaisia ​​päätepisteitä ovat: i) suu- ja sorkkataudin noudattaminen; ii) heikkousparametrien parantaminen ja vamman ehkäisy 65–80-vuotiailla potilailla; iii) immuuniparametrien paraneminen 2 ruokavaliosyklin jälkeen ja perustuu parantuneen T-soluvasteen, vähentyneen tulehduksen, parantuneiden lymfoidi/myeloidisuhteiden ja HSC/pre-HSC-luvun, parantuneiden B-solujen ja CSR:n mittauksiin; iv) influenssarokotteen tehokkuus korkeammilla vasta-ainetiitteritasoilla mitattuna. Lisäksi dokumentoimme myös flunssajaksojen määrän kokeen aikana. Koe kestää 3 vuotta, ja kaikki koehenkilöt rokotetaan joka vuoden syksyllä San Martinon sairaalassa nykyisellä inaktivoidun virusinfluenssarokotteen valmisteella (Fluzone® high dose, Sanofi Pasteur Inc.) . Influenssakauden aikana jokainen osallistuja saa viikoittain muistutuksia soittaa ja ilmoittaa influenssan kaltaisista oireista. Näitä ovat hengitystieoireet (yskä, kurkkukipu, hengenahdistus ja nenän tukkoisuus) ja systeemiset oireet (päänsärky, huonovointisuus, väsymys, kuume tai kuume ja lihaskivut). Flunssan kaltaiset sairaudet dokumentoidaan kahden hengitystieoireen tai yhden hengitystieoireen ja yhden systeemisen oireen raportin perusteella, kun influenssaa tiedetään leviävän paikallisyhteisössä. Influenssasairauden laboratoriodiagnoosi vahvistetaan virusviljelyä varten otetuista nenänielun pyyhkäisynäytteistä ja/tai ennen sairauden jälkeisestä vasta-ainetiitterin 4-kertaisesta tai suuremmasta noususta. Verinäytteet otetaan lähtötilanteessa, 2 ruokavaliosyklin jälkeen ennen rokotusta ja 4 viikkoa rokotuksen jälkeen. Tämän kokeen tutkimusjakso on 2–5 päivän ruokavaliojaksot (5–30–5), jota seuraa yksi influenssarokote vuodessa. Jokainen ruokavaliosykli koostuu viidestä suu- ja sorkkatautipäivästä, jota seuraa 30 päivää koehenkilön tavanomaisesta ruokavaliosta sekä kasviperäisestä päivittäisestä proteiini- ja rasvalisästä (20 grammaa proteiinia + 30 grammaa oliiviöljyä ja 30 grammaa (yhteensä) saksanpähkinöitä, hasselpähkinät ja mantelit). Tämä päivittäinen lisäaine auttaa minimoimaan 5 päivän suu- ja sorkkataudin aiheuttaman painonpudotuksen. Ensimmäisellä käynnillä koehenkilöille tehdään fyysinen arviointi terveyden ja heikkouden arvioimiseksi, ja sairaushistoria kirjataan. Verinäytteet otetaan perusmittauksia varten.

Suu- ja sorkkatautihaarassa oleville koehenkilöille annetaan 2-syklinen ruokavalio ohjeineen. Ennen toisen suu- ja sorkkatautijakson saamista potilaille tehdään toinen fyysinen tarkastus Genovan yliopiston geriatrian klinikalla, joka sisältää kehon koostumuksen arvioinnin, ja toisen suu- ja sorkkatautijakson antaminen sallitaan vain, jos potilas ei alene. vähärasvainen massa (vs. lähtötaso), kuten BIA, kädensijan vahvuus ja DEXA ovat havainneet. Kaksi viikkoa toisen ruokavaliosyklin päättymisen jälkeen koehenkilöt palaavat fyysistä arviointia, verenottoa ja rokotuksia varten. Kolmas ja viimeinen käynti on 4 viikkoa rokotuksen jälkeen, koehenkilöille suoritetaan fyysinen arviointi ja kehon koostumuksen arviointi ja verinäytteitä otetaan. Tällä vierailulla koehenkilöitä ohjataan myös soittamaan tutkimuskoordinaattorille ja ilmoittamaan huonovointisuudesta, epämukavuudesta, influenssasta tai hengitystieoireista. Influenssan alkamista seurataan jatkossa puhelimitse. Nenänielun vanupuikko virusviljelyä ja influenssan varmistusta varten kerätään mahdollisuuksien mukaan 72 tunnin kuluessa siitä, kun koehenkilö on ilmoittanut influenssan oireista. RUOKAVALMISTELU: Rajoitettuun ruokavalioon (A) satunnaistetuille koehenkilöille tarjotaan kaikki ruoat, jotka on nautittava kunkin kolmen syklin aikana. Ruokavalion tarkat komponentit riippuvat Tehtävässä saaduista tuloksista

1, mutta ruokavalion odotetaan olevan noin 30 % kalorirajoitettu ja 50 % proteiinirajoitettu, mutta sitä on täydennetty 50 %:lla vitamiinien ja kivennäisaineiden RDA:sta sekä sekä ei-välttämättömillä että välttämättömillä aminohapoilla, jotka on eläinkokeissa todettu tehokkaaksi. Aminohappolisäpitoisuudet riippuvat julkaistuista kliinisistä tutkimuksista, jotka osoittavat turvallisuuden, eivätkä ne ylitä suositeltuja päivittäisiä tasoja. Kontrolliryhmän koehenkilöt saavat ravitsemusneuvoja hoitavan lääkärin tavanomaisen käytännön mukaisesti. Tähän sisältyy konsultaatio rekisteröidyn ravitsemusterapeutin kanssa. Pääpaino kiinnitetään sen varmistamiseen, etteivät tutkittavat laihdu (elleivät he ole lihavia lähtötilanteessa) eivätkä menetä vähärasvaista ruumiinmassaa. Heitä pyydetään myös pitämään päiväkirjaa kulutetusta ruoasta ja likimääräisistä määristä.

ROKOTUS: Tutkittavat rokotetaan Sanofi Pasteur Inc:n Fluzone®-suurannoksisen rokotteen standardiannoksella joka vuosi. Tässä rokotteessa on neljä kertaa enemmän antigeeniä kuin tavallisessa influenssarokotteessa, ja se on erityisesti suunniteltu 60-vuotiaille ja sitä vanhemmille henkilöille.

Kriteerit tutkimuksesta poistamiselle:

Koehenkilöt poistetaan tutkimuksesta, jos he eivät saa rokotusta. Koehenkilöt poistetaan tutkimuksesta, jos heillä on ruokavalioon liittyvää myrkyllisyyttä, jota ei voida hyväksyä.

Koehenkilöt poistetaan tutkimuksesta, jos he eivät pysty saamaan takaisin vähintään 95 % painostaan ​​ensimmäisen ja 92 % toisen syklin jälkeen. Koehenkilöt poistetaan tutkimuksesta, jos bioimpedanssin vaihekulman lasku on yli 5 % perusarvosta tai aina, kun vaihekulma putoaa alle 5°; tai vaihtoehtoisesti niille potilaille, joilla bioimpedanssimittaukset olivat epäluotettavia/ei saavutettavissa, kun kädensijan vahvuus tai DEXA:n havaitsema vähärasvainen massa on heikentynyt > 5 % perusarvosta. Koehenkilöt voivat vapaaehtoisesti vetäytyä tutkimuksesta milloin tahansa ja mistä tahansa syystä. TUTKIMUKSEN HUOMAUTUKSET Vierailu 1: Täydellinen sairaushistoria dokumentoidaan ensimmäisellä käynnillä San Martinon sairaalassa (prof.

P. Odetti, MD, prof. A. Nencioni). Tämä sisältää dokumentaation kroonisista sairauksista ja kaikista sairauksista, jotka voivat lisätä influenssan riskiä, ​​mukaan lukien kongestiivinen sydämen vajaatoiminta, iskeeminen sydänsairaus, krooninen keuhkosairaus, diabetes, munuaisten vajaatoiminta, neoplastiset sairaudet ja immuunijärjestelmän toimintahäiriöiden paino ja suorituskyky. Kaikki lääkkeet kirjataan. Suoritetaan fyysinen testi, ja Body Mass Index (BMI) ja kehon koostumus määritetään, ja niiden on oltava sisällyttämisparametrien sisällä. Esihauraus diagnosoidaan osallistujalla, onko yksi vai kaksi Friedin muokatuista haurauden kriteereistä. Verenotto suoritetaan. Perustason laboratoriomittauksiin kuuluvat CBC, glukoosi, ketoaineet, insuliini, IGF-I, IGFBP-1, sytokiinipaneeli, lymfoidi/myeloidisuhde, CD4+/CD8+-suhde, naiivi/muisti T-solusuhde ja CD8+CD28+ T-solut. Humoraalisen immuniteetin arvioimiseksi CD19+ B-solujen, naiivien, IgM-muistin ja vaihtomuistin B-solujen prosenttiosuudet ja absoluuttiset lukumäärät arvioidaan. Lyhyesti sanottuna kokoverestä eristetyt PBMC:t rikastetaan CD19+ B-solujen suhteen käyttämällä anti-CD19 Microbeads (Miltenyi Biotech). Naiivien, muistin ja vaihtomuistisolujen eristämiseksi CD19-solut lajitellaan virtaussytometrillä sen jälkeen, kun ne on värjätty PE-konjugoidulla anti-CD27:llä, biotiini-SP-konjugoidulla ihmisen ChromPure IgG:llä ja 20 μl:lla biotiinilla SP-konjugoitua ihmisen ChromPure IgA:ta. CSR:n havaitsemiseksi in vitro CD19 B-soluja viljellään anti-CD40:n ja IL-4:n kanssa 6-7 päivää. AID:n ilmentyminen stimuloiduissa B-soluissa mitataan RT-PCR:llä. E47:n ilmentyminen mitataan Western blot -menetelmällä. Vierailu 2: Koehenkilöt palaavat klinikalle yhden ruokavaliojakson päätyttyä. Osallistujille tehdään uusi lääkärintarkastus fyysisen aktiivisuuden, neuropsykologisen ja heikkousindeksin määrittämiseksi. Lisäksi he käyvät läpi kehon koostumuksen arvioinnin bioimpedanssimittauksella, DEXA-skannauksella ja kädensijan vahvuudella. Verenotto suoritetaan.

Laboratorioarvot sisältävät kaikki edellä mainitut mittaukset, jotta voidaan arvioida ruokavalion jälkeisiä muutoksia kaikissa edellä kuvatuissa parametreissa. Käynti 3 (kaksi viikkoa toisen suu- ja sorkkatautisyklin jälkeen): sama kuin käynnillä 2. Lisäksi kaikki tutkittavat saavat yhden influenssarokotteen. Vierailu 4: Koehenkilöt palaavat 4 viikkoa rokotuksen jälkeen, jolloin vasta-ainetiitterien odotetaan saavuttavan huippunsa. Suoritamme osallistujille aiemmilla käynneillä tehdyt kliiniset tutkimukset ja kehonkoostumusarvioinnit. Laboratoriomittaukset ovat kuten edellä. Lisäksi seerumin vasta-ainetiitterit mitataan hemagglutinaation estomäärityksellä. Jokaisen viruskannan hemagglutiniini saadaan CDC-kannasta. Seerumin 2-kertaisia ​​laimennoksia 1/10 - 1/1024 käytetään. Krooninen ikääntymiseen liittyvä lihasten menetys vaikuttaa > 30 %:iin yli 60-vuotiaista ja >50 %:iin yli 80-vuotiaista. Riittämätön proteiinin saanti iäkkäillä voi edistää lihasmassan menetystä estämällä lihasproteiinisynteesiä. Siten bioimpedanssimittauksia ja koko kehon DEXA-skannauksia tehdään sen varmistamiseksi, että ruokavalio ei aiheuta lihasmassan menetystä. Seuranta: Tutkimukseen osallistuvat koehenkilöt kutsutaan kolmen kuukauden välein neljännen käynnin jälkeen (katso yllä) fyysisiin ja psykologisiin tutkimuksiin, jotta voidaan arvioida suu- ja sorkkataudin tehoa haurauden ehkäisyssä, immuunijärjestelmän vahvistamisessa ja influenssan tehon lisäämisessä. rokote. Paikallisen alueen ennustetun influenssakauden aikana koehenkilöt saavat viikoittain puheluita tutkimuskoordinaattorilta, jotta he dokumentoivat mahdolliset oireet ja muistuttavat heitä soittamaan oireiden ilmoittamiseksi. Jos mahdollista, NP-näytteet kerätään 72 tunnin kuluessa oireiden ilmoittamisesta antamalla RN matkustaa koteihin. Osallistujia kannustaa ilmoittamaan oireista ajoissa maksuttomaan diagnoosiin ja lähetteeseen influenssasairauden hoitoa varten. Säännösten noudattamatta jättäminen määritellään alle 50 %:n määrätyn ruokavalion kulutuksena ja/tai yli 150 kcal:n ei-määrätyn ruoan kulutuksena minä tahansa suu- ja sorkkatautipäivänä. Tulokset koehenkilöistä, joiden IGF-I alenee alle 50 % ja glukoosi 40 % lähtötasoon verrattuna, analysoidaan (hoitoaikeet), mutta toissijainen analyysi, jossa nämä potilaat suljetaan pois (epäillään, että ne eivät ole vaatimusten mukaisia). suoritettu.