Bekæmpelse af immunosenescens og fremme af immunitet ved en faste-lignende diæt ældre.

Et fase I/II randomiseret klinisk studie vil blive udført for at vurdere gennemførlighed, sikkerhed og effektivitet (forbedring af respons på vaccination, men også forbedring af funktionsstatus eller vedligeholdelse) af to cyklusser af MKS (1 uge) administreret med 30 dages mellemrum, forud for influenzavaccination hos præ-svage ældre forsøgspersoner. Undersøgelsen vil omfatte 40 præ-svage forsøgspersoner i alderen 65-80 år. Forsøgspersoner vil blive udelukket, hvis de har kendte immunsuppressive lidelser eller medicin eller ikke har modtaget influenzavaccination i de foregående to år. Forsøgspersoner vil blive randomiseret 1:1 til Arm A (FMD) eller Arm B (almindelig kost). Forsøgspersoner i arm A vil modtage 5-dages MKS-diæt én gang om måneden i 2 måneder (2 cyklusser gennemført på 40 dage: 5-30-5).

Dette er baseret på den kur, der blev vedtaget i vores igangværende undersøgelse med yngre forsøgspersoner, men involverer en cyklus mindre for at minimere vægttab og andre potentielle bivirkninger hos ældre forsøgspersoner. Det primære endepunkt vil være diætsikkerhed: diætens bivirkninger vil blive vurderet ved vægtændring, hovedpine, blodtryk og ved nøje at overvåge kropssammensætning, det vil sige lean body mass, ved bioimpedansmålinger, håndgrebsstyrke og DEXA-scanninger. De sekundære endepunkter vil omfatte: i) overholdelse af MKS; ii) forbedring af skrøbelighedsparametre og forebyggelse af handicap hos patienter i alderen 65-80 år; iii) forbedringen i immunparametre efter 2 cyklusser af diæten og vil være baseret på målinger af forbedret T-cellerespons, reduceret inflammation, forbedret lymfoid/myeloid-forhold og HSC/præ-HSC-tal, forbedret B-celleantal og CSR; iv) effektiviteten af ​​influenzavaccinen analyseret ved højere antistoftiterniveauer. Derudover vil vi også dokumentere antallet af influenzaepisoder i løbet af forsøget. Forsøget vil blive udført over en periode på 3 år, og alle forsøgspersoner vil blive vaccineret i efteråret hvert år med det nuværende præparat af den inaktiverede virusinfluenzavaccine (Fluzone® høj dosis, Sanofi Pasteur Inc.) på San Martino Hospitalet . I løbet af influenzasæsonen vil hver deltager modtage ugentlige påmindelser om at ringe ind og rapportere eventuelle influenzalignende symptomer. Disse vil omfatte luftvejssymptomer (hoste, ondt i halsen, åndenød og tilstoppet næse) og systemiske symptomer (hovedpine, utilpashed, træthed, feber eller feber og muskelsmerter). Influenzalignende sygdomme vil blive dokumenteret ud fra indberetningen af ​​to luftvejssymptomer eller et respiratorisk og et systemisk symptom, når influenza vides at cirkulere i lokalsamfundet. En laboratoriediagnose af influenzasygdom vil blive bekræftet ud fra resultaterne af nasopharyngeale podninger til virusdyrkning og/eller en 4-fold eller større stigning i antistoftiter før til post-sygdom. Blodprøver vil blive indsamlet ved baseline, efter 2 diætcyklusser før vaccination og 4 uger efter vaccination. Studieperioden for dette forsøg vil være 2-5 dages diætcyklusser (5-30-5) efterfulgt af en enkelt influenzavaccination om året. Hver diætcyklus vil bestå af 5 dages mund- og klovsyge efterfulgt af 30 dage af forsøgspersonernes sædvanlige kost plus et plantebaseret dagligt protein- og fedttilskud (20 gram proteiner + 30 gram olivenolie og 30 gram (i alt) valnødder, hasselnødder og mandler). Dette daglige tilskud tjener til at minimere vægttab forårsaget af 5-dages MKS. Ved det første besøg vil forsøgspersonerne gennemgå en fysisk evaluering for at vurdere helbreds- og skrøbelighedsstatus, og sygehistorie vil blive noteret. Blodprøver vil blive indsamlet til baseline målinger.

Forsøgspersoner i MKS-armen vil få en 2-cyklus forsyning af diæten med instruktioner. Før de modtager den anden MKS-cyklus, vil patienterne gennemgå en anden fysisk undersøgelse på den geriatriske klinik ved University of Genova, som vil omfatte vurdering af kropssammensætning og administration af den anden MKS-cyklus vil kun være tilladt i fravær af et fald i mager kropsmasse (vs. baseline) som detekteret af BIA, håndgrebsstyrke og af DEXA. To uger efter afslutningen af ​​anden diætcyklus vil forsøgspersonerne vende tilbage til fysisk evaluering, blodopsamling og vaccination. Det tredje og sidste besøg vil være 4 uger efter vaccination, forsøgspersonerne vil gennemgå en fysisk evaluering og vurdering af kropssammensætning og blodprøver vil blive indsamlet. Ved dette besøg vil forsøgspersoner også blive bedt om at ringe til forskningskoordinatoren for at rapportere utilpashed, ubehag, influenza eller luftvejssymptomer. Yderligere opfølgning vil være over telefonen for at overvåge debut af influenza. Nasopharyngeale podninger til virusdyrkning og bekræftelse af influenza vil om muligt blive indsamlet inden for 72 timer efter, at en forsøgsperson har rapporteret symptomer på influenza. DIET: Forsøgspersoner, der er randomiseret til den begrænsede diætarm (A), vil blive forsynet med al mad, der skal indtages i hver af de tre cyklusser. De nøjagtige komponenter i kosten vil afhænge af resultater opnået i Opgave

1, men kosten forventes at være ca. 30 % kaloriebegrænset og 50 % proteinbegrænset, men suppleret med 50 % af RDA i vitaminer og mineraler og også suppleret med både ikke-essentielle og essentielle aminosyrer identificeret i dyreforsøg for at være effektiv. Aminosyretilskudsniveauer vil afhænge af offentliggjorte kliniske undersøgelser, der viser sikkerhed og vil ikke overstige de anbefalede daglige niveauer. Forsøgspersoner i kontrolarmen vil modtage kostråd i henhold til den behandlende læges standardpraksis. Dette vil omfatte konsultation med en registreret diætist. Et stort fokus vil blive lagt på at sikre, at forsøgspersoner ikke taber sig (medmindre de er overvægtige ved baseline) eller taber slank kropsmasse. De vil også blive bedt om at føre en dagbog over den forbrugte mad og omtrentlige mængder.

VACCINATION: Forsøgspersoner vil blive vaccineret med standarddosis af Fluzone® højdosisvaccinen fra Sanofi Pasteur Inc. for hvert år. Denne vaccine har fire gange det normale antigen indeholdt i den almindelige influenzavaccine og er specielt designet til personer på 60 år og derover.

Kriterier for fjernelse fra undersøgelse:

Forsøgspersoner vil blive fjernet fra undersøgelsen, hvis de ikke modtager vaccinationen. Forsøgspersoner vil blive fjernet fra undersøgelsen, hvis de har uacceptabel toksicitet relateret til kosten.

Forsøgspersoner vil blive fjernet fra undersøgelsen, hvis de ikke er i stand til at genvinde mindst 95 % af deres kropsvægt efter den første og 92 % efter den anden cyklus. Forsøgspersoner vil blive fjernet fra undersøgelsen ved tilstedeværelse af et fald i bioimpedansfasevinklen, der overstiger 5 % af basislinjeværdien, eller når som helst fasevinklen falder til under 5°; eller alternativt hos de patienter, hvor bioimpedansmålinger var upålidelige/uopnåelige, ved tilstedeværelsen af ​​et fald i håndgrebsstyrke eller i mager kropsmasse detekteret af DEXA >5 % af basislinjeværdien. Forsøgspersoner kan frivilligt trække sig fra undersøgelsen til enhver tid, uanset årsag. STUDIEOBSERVATIONER Besøg 1: En komplet sygehistorie vil blive dokumenteret ved det første besøg på San Martino Hospital (Prof.

P. Odetti, MD, Prof. A. Nencioni). Dette vil omfatte dokumentation af kroniske sygdomme og eventuelle sygdomme, der kan øge risikoen for influenza, herunder kongestiv hjertesvigt, iskæmisk hjertesygdom, kronisk lungesygdom, diabetes, nyresvigt, neoplastiske lidelser og immundysfunktion vægt og præstationsstatus. Al medicin vil blive registreret. En fysisk vil blive udført, og Body Mass Index (BMI) og kropssammensætning vil blive bestemt og skal være inden for inklusionsparametre. Præ-svaghed vil blive diagnosticeret hos deltageren, uanset om et eller to af Fried modificerede kriterier for skrøbelighed vil være til stede. Der vil blive taget blodprøver. Baseline laboratoriemålinger vil omfatte en CBC, glucose, ketonstoffer, insulin, IGF-I, IGFBP-1, cytokinpanel, lymfoid/myeloid-forhold, CD4+/CD8+-forhold, naive/hukommelses-T-celler-forhold og CD8+CD28+-T-celler. For at vurdere humoral immunitet vil procenter og absolutte antal af CD19+ B-celler, naive, IgM-hukommelse og switch-hukommelse B-celler blive vurderet. Kort fortalt vil PBMC'er isoleret fra fuldblod blive beriget for CD19+ B-celler ved hjælp af anti-CD19 Microbeads (Miltenyi Biotech). For at isolere naive, hukommelses- og switch-hukommelsesceller vil CD19-celler blive sorteret ved hjælp af et flowcytometer efter farvning med PE-konjugeret anti-CD27, biotin-SP-konjugeret ChromPure human IgG og 20 μl biotin-SP-konjugeret ChromPure human IgA. For at påvise CSR in vitro vil CD19 B-celler blive dyrket med anti CD40 og IL-4 i 6-7 dage. AID-ekspression i de stimulerede B-celler vil blive målt ved RT-PCR. E47-ekspression vil blive målt ved western blot. Besøg 2: Forsøgspersonerne vender tilbage til klinikken efter afslutning af en cyklus af diæten. Deltagerne vil blive underkastet en ny lægeundersøgelse for at evaluere deres fysiske aktivitet, neuropsykologisk og for at bestemme skrøbelighedsindekset. Derudover vil de også gennemgå en vurdering af kropssammensætning ved bioimpedansmåling, ved DEXA-scanning og ved håndgrebsstyrke. Der vil blive taget blodprøver.

Laboratorieværdier vil inkludere alle målinger som ovenfor for at vurdere ændringer efter diæt i alle de ovenfor beskrevne parametre. Besøg 3 (to uger efter den anden MKS-cyklus): samme som i besøg 2. Derudover vil alle forsøgspersoner modtage en enkelt injektion af influenzavaccination. Besøg 4: Forsøgspersonerne vender tilbage 4 uger efter vaccination, når antistoftitere forventes at toppe. Vi udfører de kliniske undersøgelser og kropssammensætningsvurderingerne udført ved tidligere besøg hos deltagerne. Laboratoriemålinger vil være som ovenfor. Derudover vil antistoftitre i serum blive målt ved hæmagglutinationshæmningsassayet. Hæmagglutinin for hver virusstamme vil blive opnået fra CDC-bestanden. 2 gange serumfortyndinger fra 1/10 til 1/1024 vil blive brugt. Kronisk aldersrelateret muskeltab påvirker >30 % af personer over 60 og >50 % af personer over 80. Utilstrækkeligt proteinindtag hos ældre kan fremme tab af muskelmasse ved at forhindre muskelproteinsyntese. Der vil således blive udført bioimpedansmålinger og DEXA-scanninger af hele kroppen for at sikre, at kosten ikke forårsager tab af muskelmasse. Opfølgning: De forsøgspersoner, der er tilmeldt undersøgelsen, vil hver tredje måned efter det fjerde besøg (se ovenfor) blive indkaldt til at gennemgå fysiske og psykologiske undersøgelser for at evaluere MKS-effektiviteten til at forebygge skrøbelighed, styrke immunsystemet og øge effektiviteten af ​​influenza vaccine. Under den forudsagte influenzasæson i lokalområdet vil forsøgspersonerne modtage ugentlige telefonopkald fra forsøgskoordinatoren for at dokumentere eventuelle symptomer og minde dem om at ringe ind for at rapportere symptomer. Om muligt vil NP-podninger blive indsamlet inden for 72 timer efter rapportering af symptomer ved at lade RN rejse til forsøgspersonernes hjem. Incitamentet for deltagerne til at rapportere symptomer tidligt vil være adgang til gratis diagnose og henvisning til den primære læge for behandling af influenzasygdom. Manglende overholdelse vil blive defineret som indtagelse af <50 % af den foreskrevne kost og/eller indtagelse af >150 kcal ikke-ordineret mad på en af ​​dagene for MKS. Resultater for forsøgspersoner med mindre end 50 % reduktion i IGF-I og 40 % reduktion i glukose sammenlignet med baseline vil blive analyseret (intention-to-treat), men en sekundær analyse, der ekskluderer disse patienter (mistænkt for at være ikke-kompatible) kan være udført.