Bekämpa immunosenscens och främja immunitet genom en fasteliknande diet för äldre.

En randomiserad klinisk fas I/II studie kommer att utföras för att bedöma genomförbarhet, säkerhet och effekt (förbättring av svaret på vaccination, men också förbättring av funktionsstatus eller underhåll) av två cykler av MKS (1 vecka) administrerade med 30 dagars mellanrum, före influensavaccination hos pre-svaga äldre personer. Studien kommer att registrera 40 pre-frail-personer i åldern 65-80 år. Försökspersoner kommer att exkluderas om de har kända immunsuppressiva störningar eller mediciner eller inte har fått influensavaccination under de senaste två åren. Försökspersoner kommer att randomiseras 1:1 till arm A (FMD) eller arm B (vanlig kost). Försökspersoner i arm A kommer att få 5-dagars MKS-dieten en gång i månaden i 2 månader (2 cykler genomförda på 40 dagar: 5-30-5).

Detta är baserat på den regim som antagits i vår pågående studie med yngre försökspersoner men involverar en cykel mindre för att minimera viktminskning och andra potentiella biverkningar hos äldre försökspersoner. Den primära slutpunkten kommer att vara dietsäkerhet: biverkningarna av kosten kommer att bedömas genom viktförändring, huvudvärk, blodtryck och genom att noggrant övervaka kroppssammansättningen, dvs mager kroppsmassa, genom bioimpedansmätningar, handgreppsstyrka och DEXA-skanningar. De sekundära effektmåtten kommer att omfatta: i) överensstämmelse med mul- och klövsjuka; ii) förbättring av svaghetsparametrar och förebyggande av funktionshinder hos patienter 65-80 år; iii) förbättringen av immunparametrar efter 2 cykler av kosten och kommer att baseras på mått på förbättrat T-cellssvar, minskad inflammation, förbättrade lymfoid/myeloid-förhållanden och HSC/pre-HSC-tal, förbättrat antal B-celler och CSR; iv) effektiviteten av influensavaccinet analyserat genom högre antikroppstiternivåer. Dessutom kommer vi också att dokumentera antalet influensaepisoder under rättegångens gång. Försöket kommer att genomföras under en period av 3 år och alla försökspersoner kommer att vaccineras under hösten varje år med den nuvarande beredningen av det inaktiverade virusinfluensavaccinet (Fluzone® hög dos, Sanofi Pasteur Inc.) på San Martinos sjukhus . Under influensasäsongen kommer varje deltagare att få veckovisa påminnelser om att ringa in och rapportera eventuella influensaliknande symtom. Dessa kommer att inkludera luftvägssymtom (hosta, ont i halsen, andnöd och nästäppa) och systemiska symtom (huvudvärk, sjukdomskänsla, trötthet, feber eller feber och muskelvärk). Influensaliknande sjukdomar kommer att dokumenteras baserat på rapporten om två luftvägssymtom eller ett andningssymtom och ett systemiskt symtom när det är känt att influensa cirkulerar i det lokala samhället. En laboratoriediagnos av influensasjukdom kommer att bekräftas från resultaten av nasofarynxprover för virusodling och/eller en 4-faldig eller större ökning av antikroppstiter före till efter sjukdom. Blodprover kommer att tas vid baslinjen, efter 2 dietcykler före vaccination och 4 veckor efter vaccination. Studieperioden för detta försök kommer att vara 2-5 dagars dietcykler (5-30-5) följt av en enda influensavaccination per år. Varje dietcykel kommer att bestå av 5 dagars mul- och klövsjuka följt av 30 dagar av försökspersonernas vanliga diet plus ett växtbaserat dagligt protein- och fetttillskott (20 gram proteiner + 30 gram olivolja och 30 gram (totalt) valnötter, hasselnötter och mandel). Detta dagliga tillskott tjänar till att minimera viktminskning orsakad av 5-dagars MKS. Vid det första besöket kommer försökspersonerna att genomgå en fysisk utvärdering för att bedöma hälsa och svaghetsstatus, och medicinsk historia kommer att noteras. Blodprover kommer att samlas in för baslinjemätningar.

Försökspersoner i mul- och klövsjuka-armen kommer att ges en 2-cykels tillförsel av kosten med instruktioner. Innan de får den andra mul- och klövsjuka-cykeln kommer patienterna att genomgå en andra fysisk undersökning på geriatriska kliniken vid universitetet i Genua som kommer att omfatta bedömning av kroppssammansättning och administrering av den andra mul- och klövsjuka-cykeln kommer endast att tillåtas i frånvaro av en minskning av mager kroppsmassa (vs. baseline) som detekterats av BIA, handgreppsstyrka och av DEXA. Två veckor efter avslutad andra dietcykel kommer försökspersonerna tillbaka för fysisk utvärdering, blodinsamling och vaccination. Det tredje och sista besöket kommer att vara fyra veckor efter vaccination, försökspersonerna kommer att genomgå en fysisk utvärdering och bedömning av kroppssammansättning och blodprover kommer att samlas in. Vid detta besök kommer försökspersonerna också att instrueras att ringa forskningskoordinatorn för att rapportera sjukdomskänsla, obehag, influensa eller luftvägssymtom. Ytterligare uppföljning kommer att ske via telefon för att övervaka uppkomsten av influensa. Nasofaryngeala pinnprover för virusodling och bekräftelse av influensa kommer om möjligt att samlas in inom 72 timmar efter att en patient rapporterat influensasymtom. DIET: Försökspersoner som randomiserats till armen med begränsad diet (A) kommer att förses med all mat som ska konsumeras under var och en av de tre cyklerna. De exakta komponenterna i kosten kommer att bero på resultat som erhålls i Uppgift

1 men kosten förväntas vara cirka 30 % kaloribegränsad och 50 % proteinbegränsad men kompletterad med 50 % av RDA i vitaminer och mineraler och även kompletterad med både icke-essentiella och essentiella aminosyror som identifierats i djurstudier för att vara effektiv. Aminosyratillskottsnivåer kommer att bero på publicerade kliniska studier som visar säkerhet och kommer inte att överskrida de rekommenderade dagliga nivåerna. Försökspersoner i kontrollarmen kommer att få kostråd enligt den behandlande läkarens standardpraxis. Detta kommer att innefatta konsultation med en legitimerad dietist. Ett stort fokus kommer att läggas på att säkerställa att försökspersoner inte går ner i vikt (såvida de inte är överviktiga vid baslinjen) eller förlorar mager kroppsmassa. De kommer också att uppmanas att föra en dagbok över maten som konsumeras och ungefärliga mängder.

VACCINATION: Försökspersonerna kommer att vaccineras med standarddosen av högdosvaccinet Fluzone® från Sanofi Pasteur Inc. för varje år. Detta vaccin har fyra gånger det normala antigenet i det vanliga influensavaccinet och är speciellt utformat för individer 60 år och äldre.

Kriterier för borttagning från studien:

Försökspersoner kommer att tas bort från studien om de inte får vaccinationen. Försökspersoner kommer att tas bort från studien om de har oacceptabel toxicitet relaterad till kosten.

Försökspersoner kommer att tas bort från studien om de inte kan återta minst 95 % av sin kroppsvikt efter den första och 92 % efter den andra cykeln. Försökspersoner kommer att tas bort från studien i närvaro av en minskning av bioimpedansfasvinkeln som överstiger 5 % av baslinjevärdet eller närhelst fasvinkeln sjunker under 5°; eller, alternativt, hos de patienter där bioimpedansmätningar var otillförlitliga/ouppnåbara, i närvaro av en minskning i handgreppsstyrka eller i mager kroppsmassa detekterad av DEXA >5 % av baslinjevärdet. Försökspersoner kan frivilligt dra sig ur studien när som helst, av vilken anledning som helst. STUDIEOBSERVATIONER Besök 1: En fullständig medicinsk historia kommer att dokumenteras vid det första besöket på San Martino Hospital (Prof.

P. Odetti, MD, Prof. A. Nencioni). Detta kommer att inkludera dokumentation av kroniska sjukdomar och alla sjukdomar som kan öka risken för influensa, inklusive kronisk hjärtsvikt, ischemisk hjärtsjukdom, kronisk lungsjukdom, diabetes, njursvikt, neoplastiska sjukdomar och immundysfunktion i vikt och prestationsstatus. Alla mediciner kommer att registreras. En fysisk kommer att utföras och Body Mass Index (BMI) och kroppssammansättning kommer att bestämmas och måste ligga inom inklusionsparametrar. Pre-bräcklighet kommer att diagnostiseras hos deltagaren oavsett om ett eller två av Fried modifierade kriterier för svaghet kommer att finnas. En blodtagning kommer att göras. Baseline laboratoriemätningar kommer att inkludera CBC, glukos, ketonkroppar, insulin, IGF-I, IGFBP-1, cytokinpanel, lymfoid/myeloid-kvot, CD4+/CD8+-kvot, naiva/minnes-T-cellskvot och CD8+CD28+ T-celler. För att bedöma humoral immunitet kommer procentsatser och absoluta antal av CD19+ B-celler, naiva, IgM-minne och switchminne B-celler att bedömas. Kortfattat kommer PBMC isolerade från helblod att berikas för CD19+ B-celler med hjälp av anti-CD19 Microbeads (Miltenyi Biotech). För att isolera naiva, minnes- och switchminnesceller kommer CD19-celler att sorteras med en flödescytometer efter färgning med PE-konjugerad anti-CD27, biotin-SP-konjugerad ChromPure human IgG och 20 μl biotin-SP-konjugerad ChromPure human IgA. För att detektera CSR in vitro kommer CD19 B-celler att odlas med anti CD40 och IL-4 i 6-7 dagar. AID-uttryck i de stimulerade B-cellerna kommer att mätas med RT-PCR. E47-uttryck kommer att mätas med western blöt. Besök 2: Försökspersoner kommer att återvända till kliniken efter att ha avslutat en cykel av dieten. Deltagarna kommer att genomgå en ny medicinsk undersökning för att utvärdera deras fysiska aktivitet, neuropsykologisk och för att bestämma svaghetsindex. Dessutom kommer de också att genomgå en kroppssammansättningsbedömning genom bioimpedansmätning, genom DEXA-skanning och genom handgreppsstyrka. En blodtagning kommer att göras.

Laboratorievärden kommer att inkludera alla mätningar enligt ovan för att bedöma förändringar efter diet i alla parametrar som beskrivs ovan. Besök 3 (två veckor efter den andra MKS-cykeln): samma som vid besök 2. Dessutom kommer alla försökspersoner att få en enda injektion av influensavaccination. Besök 4: Försökspersonerna kommer tillbaka fyra veckor efter vaccination, då antikroppstitrarna förväntas nå sin topp. Vi kommer att utföra de kliniska undersökningarna och de kroppssammansättningsbedömningar som gjorts vid tidigare besök på deltagarna. Laboratoriemätningar kommer att vara enligt ovan. Dessutom kommer antikroppstitrar i serum att mätas med hemagglutinationsinhiberingsanalysen. Hemagglutinin för varje virusstam kommer att erhållas från CDC-stammen. 2-faldiga spädningar av serum från 1/10 till 1/1024 kommer att användas. Kronisk åldringsrelaterad muskelförlust drabbar >30% av individer över 60 och >50% av individer över 80. Otillräckligt proteinintag hos äldre kan främja förlust av muskelmassa genom att förhindra muskelproteinsyntes. Således kommer bioimpedansmätningar och DEXA-skanningar av hela kroppen att utföras för att säkerställa att kosten inte orsakar förlust av muskelmassa. Uppföljning: De försökspersoner som är inskrivna i studien kommer att kallas var tredje månad efter det fjärde besöket (se ovan) för att genomgå fysiska och psykologiska undersökningar för att utvärdera MKS-effekten för att förebygga svaghet, stärka immunförsvaret och öka effekten av influensa vaccin. Under den förutspådda influensasäsongen i närområdet kommer försökspersonerna att få telefonsamtal varje vecka från försökskoordinatorn för att dokumentera eventuella symtom och för att påminna dem om att ringa in för att rapportera symtom. Om möjligt kommer NP-provpinnar att samlas in inom 72 timmar efter rapportering av symtom genom att låta RN resa till patientens hem. Incitamentet för deltagarna att rapportera symtom tidigt kommer att vara tillgång till gratis diagnos och remiss till primärläkare för behandling av influensasjukdom. Bristande efterlevnad kommer att definieras som konsumtion av <50 % av den föreskrivna kosten och/eller konsumtion av >150 kcal icke-föreskriven mat under någon av dagarna av mul- och klövsjukan. Resultat för försökspersoner med mindre än 50 % minskning av IGF-I och 40 % minskning av glukos jämfört med baslinjen kommer att analyseras (intention-to-treat), men en sekundär analys som exkluderar dessa patienter (misstänks vara icke-kompatibla) kan vara genomförde.