Immunosenescentie bestrijden en immuniteit bevorderen door een vasten-nabootsend dieet Ouderen.

Er zal een fase I/II gerandomiseerde klinische studie worden uitgevoerd om de haalbaarheid, veiligheid en werkzaamheid (verbetering van de respons op vaccinatie, maar ook verbetering of behoud van de functionele status) te beoordelen van twee cycli FMD (1 week) toegediend met een tussenpoos van 30 dagen, voorafgaand aan griepvaccinatie bij pre-kwetsbare oudere proefpersonen. De studie zal 40 pre-kwetsbare proefpersonen in de leeftijd van 65-80 jaar inschrijven. Proefpersonen worden uitgesloten als ze immunosuppressieve stoornissen of medicijnen hebben gekend of de afgelopen twee jaar geen griepvaccinatie hebben gekregen. Proefpersonen worden 1:1 gerandomiseerd naar arm A (MKZ) of arm B (normaal dieet). Proefpersonen in arm A krijgen het 5-daagse FMD-dieet eenmaal per maand gedurende 2 maanden (2 cycli voltooid in 40 dagen: 5-30-5).

Dit is gebaseerd op het regime dat is toegepast in onze lopende studie met jongere proefpersonen, maar omvat één cyclus minder om gewichtsverlies en andere mogelijke bijwerkingen bij oudere proefpersonen te minimaliseren. Het primaire eindpunt zal de veiligheid van het dieet zijn: de bijwerkingen van het dieet zullen worden beoordeeld aan de hand van gewichtsverandering, hoofdpijn, bloeddruk en door de lichaamssamenstelling, d.w.z. vetvrije massa, nauwkeurig te volgen door bio-impedantiemetingen, handgreepkracht en DEXA-scans. De secundaire eindpunten omvatten: i) de naleving van de MKZ; ii) de verbetering van kwetsbaarheidsparameters en preventie van invaliditeit bij patiënten van 65-80 jaar; iii) de verbetering van immuunparameters na 2 cycli van het dieet en zal gebaseerd zijn op metingen van verbeterde T-celrespons, verminderde ontsteking, verbeterde lymfoïde/myeloïde-ratio's en HSC/pre-HSC-aantal, verbeterde B-celaantallen en CSR; iv) de werkzaamheid van het griepvaccin getest door hogere antilichaamtiterniveaus. Daarnaast zullen we ook het aantal griepepisodes in de loop van de proef documenteren. De proef zal over een periode van 3 jaar worden uitgevoerd en alle proefpersonen zullen in de herfst van elk jaar worden gevaccineerd met het huidige preparaat van het geïnactiveerde virusgriepvaccin (Fluzone® hoge dosis, Sanofi Pasteur Inc.) in het San Martino-ziekenhuis . Tijdens het griepseizoen krijgt elke deelnemer wekelijks een herinnering om zich te melden en eventuele griepachtige symptomen te melden. Deze omvatten ademhalingssymptomen (hoesten, keelpijn, kortademigheid en verstopte neus) en systemische symptomen (hoofdpijn, malaise, vermoeidheid, koorts of koorts en spierpijn). Griepachtige ziekten zullen worden gedocumenteerd op basis van de melding van twee ademhalingssymptomen of één ademhalings- en één systemisch symptoom wanneer bekend is dat griep in de lokale gemeenschap circuleert. Een laboratoriumdiagnose van griepziekte zal worden bevestigd aan de hand van de resultaten van nasofaryngeale uitstrijkjes voor viruskweek, en/of een 4-voudige of grotere stijging van de antilichaamtiter vóór tot na de ziekte. Bloedmonsters zullen worden afgenomen bij baseline, na 2 dieetcycli voorafgaand aan vaccinatie en 4 weken na vaccinatie. De studieperiode voor deze proef bestaat uit dieetcycli van 2-5 dagen (5-30-5) gevolgd door een enkele griepvaccinatie per jaar. Elke dieetcyclus bestaat uit 5 dagen MKZ gevolgd door 30 dagen van het gebruikelijke dieet van de proefpersonen plus een dagelijks plantaardig eiwit- en vetsupplement (20 gram eiwitten + 30 gram olijfolie en 30 gram (totaal) walnoten, hazelnoten en amandelen). Dit dagelijkse supplement dient om het gewichtsverlies als gevolg van de 5-daagse MKZ te minimaliseren. Bij het eerste bezoek ondergaan proefpersonen een fysieke evaluatie om de gezondheid en kwetsbaarheid te beoordelen, en wordt de medische geschiedenis genoteerd. Er worden bloedmonsters afgenomen voor nulmetingen.

Proefpersonen in de FMD-arm krijgen een voeding met instructies voor 2 cycli. Alvorens de tweede MKZ-cyclus te krijgen, ondergaan patiënten een tweede lichamelijk onderzoek in de geriatrische kliniek van de Universiteit van Genua, waarbij de lichaamssamenstelling wordt beoordeeld en de toediening van de tweede MKZ-cyclus is alleen toegestaan ​​als er geen afname van de vetvrije massa (vs. basislijn) zoals gedetecteerd door BIA, handgreepkracht en door DEXA. Twee weken na voltooiing van de tweede dieetcyclus komen de proefpersonen terug voor lichamelijk onderzoek, bloedafname en vaccinatie. Het derde en laatste bezoek is 4 weken na vaccinatie, de proefpersonen ondergaan een fysieke evaluatie en beoordeling van de lichaamssamenstelling en er worden bloedmonsters afgenomen. Tijdens dit bezoek krijgen proefpersonen ook de instructie om de onderzoekscoördinator te bellen om malaise, ongemak, griep of luchtwegsymptomen te melden. Verdere follow-up zal telefonisch zijn om het begin van griep te volgen. Nasofaryngeale uitstrijkjes voor viruskweek en bevestiging van griep zullen indien mogelijk worden afgenomen binnen 72 uur nadat een proefpersoon symptomen van griep heeft gemeld. DIEET: Proefpersonen die gerandomiseerd zijn naar de arm met beperkt dieet (A) krijgen al het voedsel dat tijdens elk van de drie cycli moet worden geconsumeerd. De exacte componenten van het dieet zullen afhangen van de resultaten verkregen in Task

1, maar het dieet zal naar verwachting ongeveer 30% caloriebeperkt en 50% eiwitbeperkt zijn, maar aangevuld met 50% van de ADH aan vitamines en mineralen en ook aangevuld met zowel niet-essentiële als essentiële aminozuren waarvan in dierstudies is vastgesteld dat ze effectief zijn. De niveaus van aminozuursuppletie zijn afhankelijk van gepubliceerde klinische onderzoeken die de veiligheid aantonen en zullen de aanbevolen dagelijkse niveaus niet overschrijden. Proefpersonen in de controle-arm krijgen voedingsadvies volgens de standaardpraktijk van de behandelend arts. Dit omvat overleg met een geregistreerde diëtist. Er zal veel aandacht worden besteed aan het ervoor zorgen dat proefpersonen niet afvallen (tenzij zwaarlijvig bij baseline) of vetvrije massa verliezen. Ze zullen ook worden gevraagd om een ​​dagboek bij te houden van het geconsumeerde voedsel en de geschatte hoeveelheden.

VACCINATIE: De proefpersonen worden elk jaar gevaccineerd met de standaarddosis van het Fluzone®-vaccin met hoge dosis van Sanofi Pasteur Inc. Dit vaccin heeft vier keer het normale antigeen in het reguliere griepvaccin en is speciaal ontworpen voor personen van 60 jaar en ouder.

Criteria voor verwijdering uit onderzoek:

Proefpersonen worden uit het onderzoek verwijderd als ze de vaccinatie niet krijgen. Proefpersonen worden uit het onderzoek verwijderd als ze een onaanvaardbare toxiciteit hebben die verband houdt met het dieet.

Proefpersonen worden uit het onderzoek verwijderd als ze niet in staat zijn om ten minste 95% van hun lichaamsgewicht terug te krijgen na de eerste en 92% na de tweede cyclus. Proefpersonen worden uit het onderzoek verwijderd als de bio-impedantiefasehoek meer dan 5% van de basislijnwaarde afneemt of als de fasehoek onder de 5° zakt; of, als alternatief, bij die patiënten bij wie bio-impedantiemetingen onbetrouwbaar/onbereikbaar waren, in de aanwezigheid van een afname in handgreepkracht of in vetvrije massa gedetecteerd door DEXA >5% van de basislijnwaarde. Proefpersonen kunnen zich op elk moment en om welke reden dan ook vrijwillig terugtrekken uit het onderzoek. ONDERZOEKSOBSERVATIES Bezoek 1: Bij het eerste bezoek aan het San Martino-ziekenhuis (prof.

P. Odetti, MD, prof. A. Nencioni). Dit omvat documentatie van chronische ziekten en alle ziekten die het risico op griep kunnen verhogen, waaronder congestief hartfalen, ischemische hartziekte, chronische longziekte, diabetes, nierfalen, neoplastische aandoeningen en immuundisfunctie, gewicht en prestatiestatus. Alle medicijnen worden geregistreerd. Er wordt een lichamelijk onderzoek uitgevoerd en de Body Mass Index (BMI) en lichaamssamenstelling worden bepaald en moeten binnen de inclusieparameters vallen. Pre-kwetsbaarheid zal bij de deelnemer worden gediagnosticeerd of een of twee van Fried gemodificeerde criteria voor kwetsbaarheid aanwezig zullen zijn. Er zal bloed worden afgenomen. Baseline laboratoriummetingen omvatten een CBC, glucose, ketonlichamen, insuline, IGF-I, IGFBP-1, cytokinepanel, lymfoïde/myeloïde ratio, CD4+/CD8+ ratio, naïeve/geheugen T-cellen ratio en CD8+CD28+ T-cellen. Om humorale immuniteit te beoordelen, zullen percentages en absolute aantallen van CD19+ B-cellen, naïeve, IgM-geheugen- en switch-geheugen-B-cellen worden beoordeeld. In het kort, PBMC's geïsoleerd uit volbloed zullen worden verrijkt voor CD19+ B-cellen met behulp van anti-CD19 Microbeads (Miltenyi Biotech). Om naïeve, geheugen- en schakelgeheugencellen te isoleren, zullen CD19-cellen worden gesorteerd met behulp van een flowcytometer na kleuring met PE-geconjugeerd anti-CD27, biotine-SP-geconjugeerd ChromPure humaan IgG en 20 μl biotine-SP-geconjugeerd ChromPure humaan IgA. Om CSR in vitro te detecteren, worden CD19 B-cellen gekweekt met anti-CD40 en IL-4 gedurende 6-7 dagen. AID-expressie in de gestimuleerde B-cellen zal worden gemeten met RT-PCR. E47-expressie zal worden gemeten met Western-blot. Bezoek 2: proefpersonen keren terug naar de kliniek na voltooiing van één cyclus van het dieet. De deelnemers zullen worden onderworpen aan een nieuw medisch onderzoek om hun fysieke activiteit, neuropsychologisch en om de kwetsbaarheidsindex te bepalen, te evalueren. Daarnaast ondergaan ze ook een beoordeling van de lichaamssamenstelling door middel van bio-impedantiemeting, DEXA-scan en handgreepkracht. Er zal bloed worden afgenomen.

Laboratoriumwaarden omvatten alle metingen zoals hierboven om veranderingen na het dieet in alle hierboven beschreven parameters te beoordelen. Bezoek 3 (twee weken na de tweede MKZ-cyclus): hetzelfde als bezoek 2. Bovendien krijgen alle proefpersonen een eenmalige injectie met griepvaccinatie. Bezoek 4: Proefpersonen komen 4 weken na vaccinatie terug, wanneer verwacht wordt dat de antilichaamtiters hun hoogtepunt bereiken. We zullen de klinische onderzoeken en de beoordelingen van de lichaamssamenstelling uitvoeren die tijdens eerdere bezoeken bij de deelnemers zijn uitgevoerd. Laboratoriummetingen zijn zoals hierboven. Daarnaast zullen antilichaamtiters in serum worden gemeten door middel van de hemagglutinatie-inhibitietest. Hemagglutinine voor elke virusstam zal worden verkregen uit de CDC-voorraad. Tweevoudige verdunningen van serum van 1/10 tot 1/1024 zullen worden gebruikt. Chronisch leeftijdsgebonden spierverlies treft >30% van de personen ouder dan 60 en >50% van de personen ouder dan 80. Onvoldoende eiwitinname bij ouderen kan verlies van spiermassa bevorderen door spiereiwitsynthese te voorkomen. Zo zullen bio-impedantiemetingen en DEXA-scans van het hele lichaam worden uitgevoerd om ervoor te zorgen dat het dieet geen verlies van spiermassa veroorzaakt. Follow-up: De proefpersonen die deelnemen aan het onderzoek zullen na het vierde bezoek (zie hierboven) om de drie maanden worden gebeld voor lichamelijk en psychologisch onderzoek om de werkzaamheid van MKZ te evalueren bij het voorkomen van kwetsbaarheid, het versterken van het immuunsysteem en het verhogen van de werkzaamheid van griep vaccin. Tijdens het voorspelde griepseizoen in de omgeving zullen de proefpersonen wekelijks worden gebeld door de proefcoördinator om eventuele symptomen te documenteren en hen eraan te herinneren dat ze moeten bellen om symptomen te melden. Indien mogelijk zullen NP-uitstrijkjes binnen 72 uur na melding van symptomen worden verzameld door de RN naar de huizen van de proefpersonen te laten reizen. De stimulans voor deelnemers om symptomen vroegtijdig te melden, is toegang tot gratis diagnose en doorverwijzing naar de huisarts voor behandeling van griepziekte. Niet-naleving wordt gedefinieerd als consumptie van <50% van het voorgeschreven dieet en/of consumptie van >150 kcal niet-voorgeschreven voedsel op een van de dagen van de MKZ. Resultaten voor proefpersonen met minder dan 50% verlaging van IGF-I en 40% verlaging van glucose in vergelijking met de uitgangswaarde zullen worden geanalyseerd (intention-to-treat), maar een secundaire analyse waarbij deze patiënten worden uitgesloten (vermoedelijk niet-conform) kan worden uitgevoerd. uitgevoerd.