Bekjempe immunosenescens og fremme immunitet ved å faste-lignende diett til eldre.

En fase I/II randomisert klinisk studie vil bli utført for å vurdere gjennomførbarhet, sikkerhet og effekt (forbedring av responsen på vaksinasjon, men også forbedring av funksjonsstatus eller vedlikehold) av to sykluser med MKS (1 uke) administrert med 30 dagers mellomrom, før influensavaksinasjon hos pre-skjøre eldre personer. Studien vil inkludere 40 pre-skjøre personer i alderen 65-80 år. Forsøkspersoner vil bli ekskludert dersom de har kjente immunsuppressive lidelser eller medisiner eller ikke har mottatt influensavaksine de siste to årene. Forsøkspersonene vil bli randomisert 1:1 til arm A (FMD) eller arm B (vanlig kosthold). Forsøkspersoner i arm A vil motta 5-dagers MKS-dietten en gang i måneden i 2 måneder (2 sykluser fullført på 40 dager: 5-30-5).

Dette er basert på regimet som ble tatt i bruk i vår pågående studie med yngre forsøkspersoner, men involverer en syklus mindre for å minimere vekttap og andre potensielle bivirkninger hos eldre forsøkspersoner. Det primære endepunktet vil være diettsikkerhet: bivirkningene av dietten vil bli vurdert ved vektendring, hodepine, blodtrykk og ved nøye overvåking av kroppssammensetning, dvs. mager kroppsmasse, ved bioimpedansmålinger, håndgrepsstyrke og DEXA-skanninger. De sekundære endepunktene vil inkludere: i) overholdelse av MKS; ii) forbedring av skrøpelighetsparametre og forebygging av funksjonshemming hos pasienter 65-80 år; iii) forbedringen i immunparametre etter 2 sykluser av dietten og vil være basert på mål for forbedret T-cellerespons, redusert inflammasjon, forbedret lymfoid/myeloid-forhold og HSC/pre-HSC-tall, forbedret B-celleantall og CSR; iv) effektiviteten til influensavaksinen analysert ved høyere antistofftiternivåer. I tillegg vil vi også dokumentere antall influensaepisoder i løpet av rettssaken. Forsøket vil bli utført over en periode på 3 år og alle forsøkspersoner vil bli vaksinert høsten hvert år med den nåværende forberedelsen av den inaktiverte virusinfluensavaksinen (Fluzone® høy dose, Sanofi Pasteur Inc.) ved San Martino Hospital . I løpet av influensasesongen vil hver deltaker motta ukentlige påminnelser om å ringe inn og rapportere eventuelle influensalignende symptomer. Disse vil inkludere luftveissymptomer (hoste, sår hals, kortpustethet og tett nese) og systemiske symptomer (hodepine, ubehag, tretthet, feber eller feber og muskelsmerter). Influensalignende sykdommer vil bli dokumentert basert på rapportering av to luftveissymptomer eller ett respiratorisk og ett systemisk symptom når det er kjent at influensa sirkulerer i lokalsamfunnet. En laboratoriediagnose av influensasykdom vil bli bekreftet fra resultatene av nasofaryngeale vattpinner for virusdyrking, og/eller en fire ganger eller mer økning i antistofftiter før til etter sykdom. Blodprøver vil bli tatt ved baseline, etter 2 diettsykluser før vaksinasjon og 4 uker etter vaksinasjon. Studieperioden for denne studien vil være 2-5 dagers diettsykluser (5-30-5) etterfulgt av en enkelt influensavaksine per år. Hver diettsyklus vil bestå av 5 dager med MKS etterfulgt av 30 dager med forsøkspersonens vanlige diett pluss et plantebasert daglig protein- og fetttilskudd (20 gram proteiner + 30 gram olivenolje og 30 gram (totalt) valnøtter, hasselnøtter og mandler). Dette daglige tilskuddet tjener til å minimere vekttap forårsaket av 5-dagers MKS. Ved det første besøket vil forsøkspersonene gjennomgå en fysisk evaluering for å vurdere helse- og skrøpelighetsstatus, og sykehistorien vil bli notert. Blodprøver vil bli samlet inn for baseline-målinger.

Personer i MKS-armen vil få en 2-syklus forsyning av dietten med instruksjoner. Før de mottar den andre MKS-syklusen, vil pasienter gjennomgå en andre fysisk undersøkelse ved geriatriklinikken ved Universitetet i Genova, som vil inkludere vurdering av kroppssammensetning og administrering av den andre MKS-syklusen vil kun være tillatt i fravær av en reduksjon i mager kroppsmasse (vs. baseline) som oppdaget av BIA, håndgrepsstyrke og av DEXA. To uker etter fullført andre diettsyklus vil forsøkspersonene returnere for fysisk evaluering, blodprøvetaking og vaksinasjon. Det tredje og siste besøket vil være 4 uker etter vaksinasjon, forsøkspersonene vil gjennomgå en fysisk evaluering og vurdering av kroppssammensetning og blodprøver vil bli tatt. Ved dette besøket vil forsøkspersonene også bli bedt om å ringe forskningskoordinatoren for å rapportere sykdomsfølelse, ubehag, influensa eller luftveissymptomer. Ytterligere oppfølging vil være over telefon for å overvåke utbruddet av influensa. Nasofaryngeale vattpinner for virusdyrking og bekreftelse av influensa vil om mulig bli samlet inn innen 72 timer etter at en person rapporterer symptomer på influensa. DIETT: Personer som er randomisert til den begrensede diettarmen (A) vil få all mat som skal konsumeres i løpet av hver av de tre syklusene. De nøyaktige komponentene i dietten vil avhenge av resultatene oppnådd i Oppgave

1, men dietten forventes å være ca. 30 % kaloribegrenset og 50 % proteinbegrenset, men supplert med 50 % av RDA i vitaminer og mineraler og også supplert med både ikke-essensielle og essensielle aminosyrer identifisert i dyrestudier for å være effektive. Aminosyretilskuddsnivåer vil avhenge av publiserte kliniske studier som viser sikkerhet og vil ikke overstige de anbefalte daglige nivåene. Forsøkspersoner i kontrollarmen vil motta kostholdsråd i henhold til standardpraksisen til den behandlende legen. Dette vil inkludere konsultasjon med en registrert kostholdsekspert. Et stort fokus vil bli plassert på å sikre at forsøkspersoner ikke går ned i vekt (med mindre de er overvektige ved baseline) eller mister mager kroppsmasse. De vil også bli bedt om å føre en dagbok over maten som konsumeres og omtrentlige mengder.

VAKSINASJON: Forsøkspersoner vil bli vaksinert med standarddosen av høydose-vaksinen Fluzone® fra Sanofi Pasteur Inc. for hvert år. Denne vaksinen har fire ganger det normale antigenet i den vanlige influensavaksinen og er spesielt utviklet for personer 60 år og eldre.

Kriterier for fjerning fra studien:

Forsøkspersoner vil bli fjernet fra studien hvis de ikke mottar vaksinasjonen. Forsøkspersoner vil bli fjernet fra studien hvis de har uakseptabel toksisitet relatert til kostholdet.

Forsøkspersonene vil bli fjernet fra studien hvis de ikke klarer å få tilbake minst 95 % av kroppsvekten etter den første og 92 % etter den andre syklusen. Forsøkspersoner vil bli fjernet fra studien i nærvær av en reduksjon i bioimpedansfasevinkel som overstiger 5 % av grunnlinjeverdien eller når fasevinkelen faller under 5°; eller, alternativt, hos de pasientene hvor bioimpedansmålinger var upålitelige/uoppnåelige, i nærvær av en reduksjon i håndgrepsstyrke eller i mager kroppsmasse detektert av DEXA >5 % av grunnlinjeverdien. Forsøkspersoner kan frivillig trekke seg fra studien når som helst, uansett årsak. STUDIEOBSERVASJONER Besøk 1: En fullstendig sykehistorie vil bli dokumentert ved det første besøket ved San Martino Hospital (Prof.

P. Odetti, MD, Prof. A. Nencioni). Dette vil inkludere dokumentasjon av kroniske sykdommer og eventuelle sykdommer som kan øke risikoen for influensa, inkludert kongestiv hjertesvikt, iskemisk hjertesykdom, kronisk lungesykdom, diabetes, nyresvikt, neoplastiske lidelser og immundysfunksjon vekt og prestasjonsstatus. Alle medisiner vil bli registrert. En fysisk vil bli utført, og Body Mass Index (BMI) og kroppssammensetning vil bli bestemt og må være innenfor inklusjonsparametere. Pre-skjørhet vil bli diagnostisert hos deltakeren om ett eller to av Fried modifiserte kriterier for skrøpelighet vil være tilstede. Det vil bli tatt blodprøver. Baseline laboratoriemålinger vil inkludere en CBC, glukose, ketonlegemer, insulin, IGF-I, IGFBP-1, cytokinpanel, lymfoid/myeloid ratio, CD4+/CD8+ ratio, naive/minne T-celler ratio og CD8+CD28+ T-celler. For å vurdere humoral immunitet vil prosenter og absolutt antall CD19+ B-celler, naivt, IgM-minne og switch-minne B-celler bli vurdert. Kort fortalt vil PBMC-er isolert fra fullblod bli anriket for CD19+ B-celler ved bruk av anti-CD19 Microbeads (Miltenyi Biotech). For å isolere naive, minne- og bytteminneceller, vil CD19-celler sorteres ved hjelp av et flowcytometer etter farging med PE-konjugert anti-CD27, biotin-SP-konjugert ChromPure human IgG og 20 μl biotin-SP-konjugert ChromPure human IgA. For å påvise CSR in vitro vil CD19 B-celler dyrkes med anti CD40 og IL-4 i 6-7 dager. AID-ekspresjon i de stimulerte B-cellene vil bli målt ved RT-PCR. E47-ekspresjon vil bli målt med western blot. Besøk 2: Forsøkspersonene vil returnere til klinikken etter fullført en syklus av dietten. Deltakerne vil bli gjenstand for en ny medisinsk undersøkelse for å evaluere deres fysiske aktivitet, nevropsykologisk og for å bestemme skrøpelighetsindeksen. I tillegg vil de også gjennomgå en vurdering av kroppssammensetning ved bioimpedansmåling, ved DEXA-skanning og ved håndgrepsstyrke. Det vil bli tatt blodprøver.

Laboratorieverdier vil inkludere alle målinger som ovenfor for å vurdere endringer etter diett i alle parameterne beskrevet ovenfor. Besøk 3 (to uker etter andre MKS-syklus): samme som i besøk 2. I tillegg vil alle forsøkspersoner få en enkelt injeksjon med influensavaksinasjon. Besøk 4: Forsøkspersonene kommer tilbake 4 uker etter vaksinasjon, når antistofftitere forventes å nå toppen. Vi vil utføre de kliniske undersøkelsene og kroppssammensetningsvurderingene utført ved tidligere besøk hos deltakerne. Laboratoriemålinger vil være som ovenfor. I tillegg vil antistofftitere i serum bli målt ved hemagglutinasjonshemmingsanalysen. Hemagglutinin for hver virusstamme vil bli hentet fra CDC-bestanden. 2 gangers fortynninger av serum fra 1/10 til 1/1024 vil bli brukt. Kronisk aldersrelatert muskeltap påvirker >30 % av individer over 60 og >50 % av individer over 80. Utilstrekkelig proteininntak hos eldre kan fremme tap i muskelmasse ved å forhindre muskelproteinsyntese. Derfor vil bioimpedansmålinger og DEXA-skanninger for hele kroppen bli utført for å sikre at dietten ikke forårsaker tap av muskelmasse. Oppfølging: Forsøkspersonene som er registrert i studien vil bli kalt hver tredje måned etter det fjerde besøket (se ovenfor) for å gjennomgå fysiske og psykologiske undersøkelser for å evaluere MKS-effekten for å forebygge skrøpelighet, forsterke immunsystemet og øke effekten av influensa vaksine. I løpet av den spådde influensasesongen i nærområdet vil forsøkspersonene motta ukentlige telefoner fra prøvekoordinatoren for å dokumentere eventuelle symptomer og for å minne dem på å ringe inn for å rapportere symptomer. Om mulig vil NP-pinneprøver bli samlet inn innen 72 timer etter rapportering av symptomer ved å la RN reise til forsøkspersonens hjem. Insentivet for deltakerne til å rapportere symptomer tidlig vil være tilgang til gratis diagnose og henvisning til primærlege for behandling av influensasykdom. Mislighold vil bli definert som inntak av <50 % av det foreskrevne kostholdet og/eller inntak av >150 kcal ikke-foreskrevet mat på en av dagene av MKS. Resultater for forsøkspersoner med mindre enn 50 % reduksjon i IGF-I og 40 % reduksjon i glukose sammenlignet med baseline vil bli analysert (intensjon å behandle), men en sekundær analyse som ekskluderer disse pasientene (mistenkt for å være ikke-kompatible) kan være utført.