Борьба с иммуносенесценцией и укрепление иммунитета с помощью диеты, имитирующей голодание для пожилых людей.

Будет проведено рандомизированное клиническое исследование фазы I/II для оценки осуществимости, безопасности и эффективности (улучшение ответа на вакцинацию, а также улучшение или поддержание функционального статуса) двух циклов ящура (1 неделя), проводимых с интервалом 30 дней, предшествующих вакцинация против гриппа у пожилых людей в предослабленном состоянии. В исследовании примут участие 40 предослабленных субъектов в возрасте 65-80 лет. Субъекты будут исключены, если у них есть известные иммунодепрессивные расстройства или лекарства, или они не получали вакцинацию против гриппа в предыдущие два года. Субъекты будут рандомизированы 1: 1 в группу A (ящур) или группу B (обычная диета). Субъекты в группе A будут получать 5-дневную диету ящура один раз в месяц в течение 2 месяцев (2 цикла, завершенные за 40 дней: 5-30-5).

Это основано на схеме, принятой в нашем текущем исследовании с более молодыми субъектами, но включает на один цикл меньше, чтобы свести к минимуму потерю веса и другие потенциальные побочные эффекты у пожилых людей. Первичной конечной точкой будет безопасность диеты: побочные эффекты диеты будут оцениваться по изменению веса, головным болям, артериальному давлению и тщательному мониторингу состава тела, т. е. безжировой массы тела, измерениям биоимпеданса, силе захвата рук и сканированию DEXA. Вторичные конечные точки будут включать: i) соответствие ящуру; ii) улучшение показателей слабости и профилактика инвалидности у пациентов 65-80 лет; iii) улучшение иммунных параметров после 2 циклов диеты, которое будет основано на показателях улучшенного ответа Т-клеток, уменьшения воспаления, улучшения соотношения лимфоид/миелоид и количества HSC/pre-HSC, улучшения количества B-клеток и CSR; iv) эффективность противогриппозной вакцины оценивали по более высоким уровням титра антител. Кроме того, мы также будем документировать количество эпизодов гриппа в ходе испытания. Испытание будет проводиться в течение 3 лет, и все субъекты будут вакцинированы осенью каждого года текущим препаратом инактивированной вирусной вакцины против гриппа (высокая доза Fluzone®, Sanofi Pasteur Inc.) в больнице Сан-Мартино. . Во время сезона гриппа каждый участник будет получать еженедельные напоминания о необходимости звонить и сообщать о любых симптомах, похожих на грипп. К ним относятся респираторные симптомы (кашель, боль в горле, одышка и заложенность носа) и системные симптомы (головная боль, недомогание, утомляемость, лихорадка или лихорадка и мышечные боли). Гриппоподобные заболевания будут документированы на основании сообщения о двух респираторных симптомах или одном респираторном и одном системном симптоме, если известно, что грипп циркулирует в местном сообществе. Лабораторный диагноз гриппозного заболевания будет подтвержден по результатам мазков из носоглотки на культуру вируса и/или по 4-кратному или более высокому повышению титра антител до и после заболевания. Образцы крови будут собираться на исходном уровне, после 2 циклов диеты до вакцинации и через 4 недели после вакцинации. Период исследования для этого испытания будет состоять из 2-5-дневных циклов диеты (5-30-5) с последующей однократной вакцинацией против гриппа в год. Каждый цикл диеты будет состоять из 5 дней ящура, за которыми следуют 30 дней обычной диеты субъектов плюс ежедневная растительная белково-жировая добавка (20 г белков + 30 г оливкового масла и 30 г (всего) грецких орехов, фундук и миндаль). Эта ежедневная добавка служит для минимизации потери веса, вызванной 5-дневным ящуром. При первом посещении субъекты пройдут физическую оценку для оценки состояния здоровья и слабости, и будет отмечена история болезни. Образцы крови будут взяты для базовых измерений.

Субъектам в группе ящура будет предоставлен запас диеты на 2 цикла с инструкциями. Перед получением второго цикла ящура пациенты пройдут второе медицинское обследование в гериатрической клинике Университета Генуи, которое будет включать оценку состава тела, и назначение второго цикла ящура будет разрешено только при отсутствии снижения безжировая масса тела (по сравнению с базовый уровень) по данным BIA, силы хвата и DEXA. Через две недели после завершения второго цикла диеты субъекты вернутся для физического осмотра, сбора крови и вакцинации. Третий и последний визит состоится через 4 недели после вакцинации, субъекты пройдут физическое обследование и оценку состава тела, а также будут взяты образцы крови. Во время этого визита испытуемые также будут проинструктированы позвонить координатору исследования, чтобы сообщить о недомогании, дискомфорте, гриппе или респираторных симптомах. Дальнейшее наблюдение будет вестись по телефону для наблюдения за началом гриппа. Мазки из носоглотки для посева вируса и подтверждения гриппа будут взяты, если это возможно, в течение 72 часов после того, как субъект сообщит о симптомах гриппа. ДИЕТА: Субъекты, рандомизированные в группу с ограниченной диетой (A), будут получать все продукты питания, которые будут потребляться в течение каждого из трех циклов. Точные компоненты диеты будут зависеть от результатов, полученных в Задаче.

1, но ожидается, что диета будет примерно на 30% ограничена по калориям и на 50% по белкам, но дополнена 50% рекомендуемой суточной нормы витаминами и минералами, а также дополнена как заменимыми, так и незаменимыми аминокислотами, эффективность которых была выявлена ​​в исследованиях на животных. Уровни аминокислотных добавок будут зависеть от опубликованных клинических исследований, демонстрирующих безопасность, и не будут превышать рекомендуемые дневные уровни. Субъекты в контрольной группе получат диетические рекомендации в соответствии со стандартной практикой лечащего врача. Это будет включать консультацию с зарегистрированным диетологом. Основное внимание будет уделяться обеспечению того, чтобы субъекты не теряли вес (если только у них не было ожирения на исходном уровне) и не теряли безжировой массы тела. Их также попросят вести дневник потребляемой пищи и приблизительных количеств.

ВАКЦИНАЦИЯ: Субъекты будут вакцинированы стандартной дозой высокодозовой вакцины Fluzone® от Sanofi Pasteur Inc. каждый год. В этой вакцине содержится в четыре раза больше антигена, чем в обычной вакцине против гриппа, и она специально разработана для лиц в возрасте 60 лет и старше.

Критерии исключения из исследования:

Субъекты будут исключены из исследования, если они не получат вакцинацию. Субъекты будут исключены из исследования, если у них будет неприемлемая токсичность, связанная с диетой.

Субъекты будут исключены из исследования, если они не смогут восстановить по крайней мере 95% своей массы тела после первого и 92% после второго цикла. Субъекты будут исключены из исследования при наличии снижения фазового угла биоимпеданса более чем на 5% от исходного значения или всякий раз, когда фазовый угол упадет ниже 5°; или, альтернативно, у тех пациентов, у которых измерения биоимпеданса были недостоверными/недостижимыми, при наличии снижения силы хвата или безжировой массы тела, обнаруженного с помощью DEXA > 5% от исходного значения. Субъекты могут добровольно выйти из исследования в любое время по любой причине. НАБЛЮДЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЯ Посещение 1: Полный анамнез будет задокументирован при первом посещении больницы Сан-Мартино (проф.

П. Одетти, доктор медицинских наук, профессор А. Ненсиони). Это будет включать документирование хронических заболеваний и любых заболеваний, которые могут увеличить риск гриппа, включая застойную сердечную недостаточность, ишемическую болезнь сердца, хроническое заболевание легких, диабет, почечную недостаточность, неопластические заболевания и иммунную дисфункцию, вес и состояние здоровья. Все лекарства будут зарегистрированы. Будет проведено физическое обследование, а также будут определены индекс массы тела (ИМТ) и состав тела, которые должны быть в пределах параметров включения. Предварительная слабость будет диагностирована у участника независимо от того, будут ли присутствовать один или два модифицированных критерия Фрида для слабости. Будет проведен забор крови. Базовые лабораторные измерения будут включать общий анализ крови, глюкозу, кетоновые тела, инсулин, IGF-I, IGFBP-1, панель цитокинов, соотношение лимфоид/миелоид, соотношение CD4+/CD8+, соотношение наивных/Т-клеток памяти и CD8+CD28+ Т-клетки. Для оценки гуморального иммунитета будут оцениваться процентное содержание и абсолютное количество В-клеток CD19+, наивных, IgM-клеток памяти и В-клеток памяти переключения. Вкратце, РВМС, выделенные из цельной крови, будут обогащены CD19+ B-клетками с использованием анти-CD19 Microbeads (Miltenyi Biotech). Чтобы изолировать наивные клетки памяти и памяти переключения, клетки CD19 будут сортироваться с использованием проточного цитометра после окрашивания PE-конъюгированным анти-CD27, биотин-SP-конъюгированным ChromPure IgG человека и 20 мкл биотин-SP-конъюгированного ChromPure человеческого IgA. Для обнаружения CSR in vitro В-клетки CD19 культивируют с анти-CD40 и IL-4 в течение 6-7 дней. Экспрессию AID в стимулированных В-клетках измеряют с помощью ОТ-ПЦР. Экспрессию Е47 измеряют вестерн-блоттингом. Визит 2: Субъекты вернутся в клинику после завершения одного цикла диеты. Участники будут подвергнуты новому медицинскому обследованию для оценки их физической активности, нейропсихологии и определения индекса дряхлости. Кроме того, они также пройдут оценку состава тела с помощью измерения биоимпеданса, сканирования DEXA и силы хвата. Будет проведен забор крови.

Лабораторные значения будут включать все измерения, указанные выше, для оценки постдиетических изменений всех параметров, описанных выше. Посещение 3 (через две недели после второго цикла ящура): то же, что и при посещении 2. Кроме того, все субъекты получат одну инъекцию вакцины против гриппа. Визит 4: Субъекты вернутся через 4 недели после вакцинации, когда ожидается пик титров антител. Мы проведем клинические осмотры и оценку состава тела участников во время предыдущих посещений. Лабораторные измерения будут такими, как указано выше. Кроме того, титры антител в сыворотке будут измеряться методом ингибирования гемагглютинации. Гемагглютинин для каждого штамма вируса будет получен из запасов CDC. Используют 2-кратные разведения сыворотки от 1/10 до 1/1024. Хроническая возрастная потеря мышечной массы затрагивает >30% лиц старше 60 лет и >50% лиц старше 80 лет. Недостаточное потребление белка у пожилых людей может способствовать потере мышечной массы, препятствуя синтезу мышечного белка. Таким образом, будут проводиться измерения биоимпеданса и DEXA-сканирование всего тела, чтобы гарантировать, что диета не приведет к потере мышечной массы. Последующее наблюдение: Субъектов, включенных в исследование, будут вызывать каждые три месяца после четвертого визита (см. выше) для прохождения физических и психологических обследований с целью оценки эффективности ящура в предотвращении слабости, укреплении иммунной системы и повышении эффективности гриппа. вакцина. Во время прогнозируемого сезона гриппа в данной местности испытуемые будут получать еженедельные телефонные звонки от координатора испытаний, чтобы задокументировать любые симптомы и напомнить им позвонить и сообщить о симптомах. Если возможно, мазки от NP будут собраны в течение 72 часов после сообщения о симптомах, при этом RN отправится к субъектам на дом. Стимулом для участников, сообщающих о симптомах на ранней стадии, будет доступ к бесплатной диагностике и направлению к основному врачу для лечения заболевания гриппом. Несоблюдение будет определяться как потребление <50% предписанного рациона и/или потребление >150 ккал непрописанной пищи в любой из дней ящура. Будут проанализированы результаты для субъектов со снижением IGF-I менее чем на 50% и снижением уровня глюкозы на 40% по сравнению с исходным уровнем (намерение лечить), но может быть проведен вторичный анализ, исключающий этих пациентов (подозреваемых в несоответствии). выполненный.