Combatendo a Imunossenescência e Promovendo a Imunidade por meio de uma Dieta Idosa que Simula o Jejum.

Um estudo clínico randomizado de fase I/II será realizado para avaliar a viabilidade, segurança e eficácia (melhora da resposta à vacinação, mas também melhora ou manutenção do estado funcional) de dois ciclos de febre aftosa (1 semana) administrados com 30 dias de intervalo, precedendo vacinação contra a gripe em idosos pré-frágeis. O estudo incluirá 40 indivíduos pré-frágeis com idade entre 65 e 80 anos. Os indivíduos serão excluídos se tiverem distúrbios ou medicamentos imunossupressores conhecidos ou não tiverem recebido vacinação contra influenza nos dois anos anteriores. Os indivíduos serão randomizados 1:1 para o Braço A (FMD) ou Braço B (dieta regular). Os indivíduos no Braço A receberão a dieta FMD de 5 dias uma vez por mês durante 2 meses (2 ciclos concluídos em 40 dias: 5-30-5).

Isso se baseia no regime adotado em nosso estudo em andamento com indivíduos mais jovens, mas envolve um ciclo a menos para minimizar a perda de peso e outros efeitos colaterais potenciais em indivíduos idosos. O endpoint primário será a segurança da dieta: os efeitos colaterais da dieta serão avaliados por alteração de peso, dores de cabeça, pressão arterial e monitoramento de perto da composição corporal, ou seja, massa corporal magra, por medições de bioimpedância, força de preensão manual e varreduras DEXA. Os endpoints secundários incluirão: i) o cumprimento da FMD; ii) a melhoria dos parâmetros de fragilidade e prevenção da incapacidade em doentes dos 65 aos 80 anos; iii) a melhora nos parâmetros imunológicos após 2 ciclos da dieta e será baseada em medidas de resposta melhorada de células T, inflamação reduzida, razão linfóide/mielóide melhorada e número HSC/pré-HSC, número melhorado de células B e CSR; iv) a eficácia da vacina contra influenza testada por níveis de títulos de anticorpos mais elevados. Além disso, também documentaremos o número de episódios de gripe ao longo do estudo. O estudo será realizado por um período de 3 anos e todos os indivíduos serão vacinados no outono de cada ano com a preparação atual da vacina contra influenza de vírus inativado (Fluzone® alta dose, Sanofi Pasteur Inc.) no San Martino Hospital . Durante a temporada de gripe, cada participante receberá lembretes semanais para ligar e relatar quaisquer sintomas semelhantes aos da gripe. Estes incluirão sintomas respiratórios (tosse, dor de garganta, falta de ar e congestão nasal) e sintomas sistêmicos (dor de cabeça, mal-estar, fadiga, febre ou febre e dores musculares). Doenças semelhantes à gripe serão documentadas com base no relato de dois sintomas respiratórios ou um respiratório e um sintoma sistêmico quando a influenza estiver circulando na comunidade local. Um diagnóstico laboratorial de doença influenza será confirmado a partir dos resultados de esfregaços nasofaríngeos para cultura de vírus e/ou um aumento de 4 vezes ou mais no título de anticorpos antes e depois da doença. Amostras de sangue serão coletadas no início, após 2 ciclos de dieta antes da vacinação e 4 semanas após a vacinação. O período de estudo para este ensaio será de 2 a 5 dias de ciclos de dieta (5-30-5) seguidos por uma única vacinação contra a gripe por ano. Cada ciclo de dieta consistirá em 5 dias de febre aftosa seguidos de 30 dias de dieta habitual dos indivíduos mais um suplemento diário de proteína e gordura à base de plantas (20 gramas de proteínas + 30 gramas de azeite e 30 gramas (total) de nozes, avelãs e amêndoas). Este suplemento diário serve para minimizar a perda de peso causada pela febre aftosa de 5 dias. Na primeira visita, os indivíduos passarão por uma avaliação física para avaliar o estado de saúde e fragilidade, e o histórico médico será anotado. Amostras de sangue serão coletadas para medições de linha de base.

Indivíduos no braço FMD receberão um suprimento de 2 ciclos da dieta com instruções. Antes de receber o segundo ciclo de FMD, os pacientes serão submetidos a um segundo exame físico na clínica de geriatria da Universidade de Gênova, que incluirá a avaliação da composição corporal e a administração do segundo ciclo de FMD só será permitida na ausência de diminuição da massa corporal magra (vs. basal) detectado por BIA, força de preensão manual e por DEXA. Duas semanas após a conclusão do segundo ciclo de dieta, os indivíduos retornarão para avaliação física, coleta de sangue e vacinação. A terceira e última visita será 4 semanas após a vacinação, os indivíduos passarão por uma avaliação física e avaliação da composição corporal e amostras de sangue serão coletadas. Nessa visita, os sujeitos também serão orientados a ligar para o coordenador da pesquisa para relatar mal-estar, desconforto, gripe ou sintomas respiratórios. O acompanhamento adicional será por telefone para monitorar o início da gripe. Swabs nasofaríngeos para cultura de vírus e confirmação de influenza serão coletados, se possível, dentro de 72 horas após um indivíduo relatar sintomas de influenza. DIETA: Os indivíduos randomizados para o braço de dieta restrita (A) receberão todos os alimentos a serem consumidos durante cada um dos três ciclos. Os componentes exatos da dieta dependerão dos resultados obtidos na Tarefa

1, mas prevê-se que a dieta tenha aproximadamente 30% de restrição calórica e 50% de restrição de proteína, mas suplementada com 50% da RDA em vitaminas e minerais e também suplementada com aminoácidos não essenciais e essenciais identificados em estudos com animais como eficazes. Os níveis de suplementação de aminoácidos dependerão de estudos clínicos publicados que demonstrem segurança e não excederão os níveis diários recomendados. Os indivíduos no braço de controle receberão aconselhamento dietético de acordo com a prática padrão do médico assistente. Isso incluirá a consulta com um nutricionista registrado. Um foco principal será colocado em garantir que os indivíduos não percam peso (a menos que sejam obesos no início do estudo) nem percam massa corporal magra. Eles também serão solicitados a manter um diário dos alimentos consumidos e quantidades aproximadas.

VACINAÇÃO: Os indivíduos serão vacinados com a dose padrão da vacina de alta dose Fluzone® da Sanofi Pasteur Inc. para cada ano. Esta vacina tem quatro vezes o antígeno normal contido na vacina contra a gripe comum e é especialmente projetada para indivíduos com 60 anos ou mais.

Critérios para Remoção do Estudo:

Os indivíduos serão removidos do estudo se não receberem a vacinação. Os indivíduos serão removidos do estudo se apresentarem toxicidade inaceitável relacionada à dieta.

Os indivíduos serão removidos do estudo se não conseguirem recuperar pelo menos 95% de seu peso corporal após o primeiro e 92% após o segundo ciclo. Os indivíduos serão removidos do estudo na presença de uma diminuição no ângulo de fase da bioimpedância superior a 5% do valor da linha de base ou sempre que o ângulo de fase cair abaixo de 5°; ou, alternativamente, naqueles pacientes em que as medidas de bioimpedância não eram confiáveis/inatingíveis, na presença de diminuição da força de preensão manual ou da massa corporal magra detectada por DEXA > 5% do valor basal. Os sujeitos podem se retirar voluntariamente do estudo a qualquer momento, por qualquer motivo. OBSERVAÇÕES DO ESTUDO Visita 1: Um histórico médico completo será documentado na primeira visita no Hospital San Martino (Prof.

P. Odetti, MD, Prof. A. Nencioni). Isso incluirá a documentação de doenças crônicas e quaisquer doenças que possam aumentar o risco de gripe, incluindo insuficiência cardíaca congestiva, doença cardíaca isquêmica, doença pulmonar crônica, diabetes, insuficiência renal, distúrbios neoplásicos e disfunção imunológica de peso e desempenho. Todos os medicamentos serão registrados. Um exame físico será realizado e o Índice de Massa Corporal (IMC) e a composição corporal serão determinados e devem estar dentro dos parâmetros de inclusão. A pré-fragilidade será diagnosticada no participante se um ou dois dos critérios modificados de Fried para fragilidade estiverem presentes. Uma coleta de sangue será realizada. As medições laboratoriais de linha de base incluirão hemograma completo, glicose, corpos cetônicos, insulina, IGF-I, IGFBP-1, painel de citocinas, razão linfóide/mielóide, razão CD4+/CD8+, razão células T virgens/de memória e células T CD8+CD28+. Para avaliar a imunidade humoral, serão avaliados percentuais e números absolutos de células B CD19+, células B virgens, de memória IgM e de memória switch. Resumidamente, PBMC's isolados de sangue total serão enriquecidos para células B CD19+ usando Microbeads anti-CD19 (Miltenyi Biotech). Para isolar células virgens, de memória e de troca de memória, as células CD19 serão classificadas usando um citômetro de fluxo após coloração com anti-CD27 conjugado com PE, IgG humana ChromPure conjugada com biotina SP e 20 μl de IgA humana ChromPure conjugada com biotina-SP. Para detectar CSR in vitro, as células CD19 B serão cultivadas com anti CD40 e IL-4 por 6-7 dias. A expressão de AID nas células B estimuladas será medida por RT-PCR. A expressão de E47 será medida por western blot. Visita 2: Os indivíduos retornarão à clínica após a conclusão de um ciclo da dieta. Os participantes serão submetidos a um novo exame médico para avaliação de sua atividade física, neuropsicológica e para determinação do índice de fragilidade. Além disso, também passarão por avaliação da composição corporal por bioimpedância, por DEXA scan e por força de preensão manual. Uma coleta de sangue será realizada.

Os valores laboratoriais incluirão todas as medições acima para avaliar as alterações pós-dieta em todos os parâmetros descritos acima. Visita 3 (duas semanas após o segundo ciclo de febre aftosa): igual à visita 2. Além disso, todos os indivíduos receberão uma única injeção de vacinação contra influenza. Visita 4: Os indivíduos retornarão 4 semanas após a vacinação, quando os títulos de anticorpos devem atingir o pico. Faremos os exames clínicos e as avaliações de composição corporal realizadas em visitas anteriores nos participantes. As medições de laboratório serão como acima. Além disso, os títulos de anticorpos no soro serão medidos pelo ensaio de inibição da hemaglutinação. A hemaglutinina para cada cepa de vírus será obtida do estoque do CDC. Serão usadas diluições de 2 vezes de soro de 1/10 a 1/1024. A perda muscular crônica relacionada à idade afeta >30% dos indivíduos com mais de 60 anos e >50% dos indivíduos com mais de 80 anos. A ingestão insuficiente de proteínas em idosos pode promover perda de massa muscular ao impedir a síntese de proteínas musculares. Assim, medidas de bioimpedância e DEXA de corpo inteiro serão realizadas para garantir que a dieta não cause perda de massa muscular. Acompanhamento: Os sujeitos incluídos no estudo serão convocados a cada três meses após a quarta visita (ver acima) para passar por exames físicos e psicológicos, a fim de avaliar a eficácia da febre aftosa na prevenção da fragilidade, reforço do sistema imunológico e aumento da eficácia da influenza vacina. Durante a temporada de gripe prevista na área local, os indivíduos receberão telefonemas semanais do coordenador do estudo para documentar quaisquer sintomas e lembrá-los de ligar para relatar os sintomas. Se possível, os swabs NP serão coletados dentro de 72 horas após o relato dos sintomas, fazendo com que o RN viaje até as casas dos sujeitos. O incentivo para os participantes relatarem os sintomas precocemente será o acesso ao diagnóstico gratuito e encaminhamento ao médico primário para tratamento da doença influenza. A não adesão será definida como consumo de <50% da dieta prescrita e/ou consumo de >150 kcal de alimentos não prescritos em qualquer um dos dias da febre aftosa. Os resultados para indivíduos com menos de 50% de redução no IGF-I e 40% de redução na glicose em comparação com a linha de base serão analisados ​​(intenção de tratar), mas uma análise secundária excluindo esses pacientes (suspeitos de não adesão) pode ser realizada.