Diasereiinin tutkimuksen suunnittelu Covid-19-potilailla

Tutkimuksen suunnittelu Tämä on satunnaistettu, lumekontrolloitu, kaksoissokkoutettu pilottitutkimus, jonka tarkoituksena on varmistaa, vaimentaako diasereiini systeemistä tulehdusvastetta sairaalahoidossa olevilla COVID-19-potilailla. Campinasin osavaltion yliopiston eettinen komitea (CAAE: 50440921.6.0000.5404) on tarkistanut ja hyväksynyt tämän tutkimuksen.

Tutkimuspopulaatio Neljäkymmentä potilasta, joilla on vahvistettu COVID-19-diagnoosi, otetaan mukaan tutkimukseen. Potilaat tunnistetaan joko Hospital Estadual Sumaré (Sumaré, Brasilia) ja Unicamp Clinical Hospital (Campinas, Brasilia) sairaalaan. Ilmoittautumisen jälkeen potilaat satunnaistetaan (n = 20 ryhmää kohti) suhteessa 1:1 saamaan joko diasereiinia 50 mg tai lumelääkettä 12 tunnin välein 10 päivän ajan.

Rekrytointi Kaikki COVID-19-potilaat, jotka täyttävät sisällyttämis- ja poissulkemiskriteerit, kutsutaan osallistumaan tutkimukseen. Luettuaan ja allekirjoitettuaan tietoisen suostumuslomakkeen potilas jaetaan satunnaisesti kahteen hoitoryhmään.

Satunnaistaminen ja sokkoutus Ilmoittautumisen jälkeen potilaat satunnaistetaan (n = 20 ryhmää kohti) 1:1 saamaan joko 50 mg diasereiinia tai lumelääkettä 12 tunnin välein 10 päivän ajan. Satunnaistusjärjestelmänä käytetään tutkimuksen sähköistä tiedonkeruualustaa (REDCap). Potilaat, tutkijat ja muu tukihenkilöstö sokeutuvat kokeelliseen terapiaan. Tutkimuslääke, diasereiini (Artrodar®-kapselit 50 mg) ja lumekapselit (laktoosi ja magnesiumstearaatti), ovat kooltaan ja ulkonäöltään samanlaisia ​​sokeuden ylläpitämiseksi. Kaikki laboratorioanalyysit tehdään sokkoutuneena hoitoon. Tutkimuslääkkeen tunnistaminen tapahtuu vasta tietojoukon lukitsemisen jälkeen.

Kokeiluinterventio Satunnaistamisen jälkeen aktiiviseen hoitoon osoitetut potilaat saavat 1 kapselin diasereiinia (Artrodar®, 50 mg) suun kautta 12 tunnin välein 10 päivän ajan. Lumeryhmään satunnaistetut potilaat saavat 1 kapselin (laktoosi ja magnesiumstearaatti) suun kautta 12 tunnin välein 10 päivän ajan. Tutkimuslääkityksen (diasereiini tai lumelääke) annosta muutetaan 1 kapseliin 24 tunnin välein (diasereiinia vähennetään 50 mg:aan 24 tunnin välein 12 tunnin välein) osallistujille, joilla on akuutti munuaisvaurio, jonka arvioitu glomerulussuodatusnopeus on <30 ml/min tai vaativat munuaiskorvaushoitoa. Jos munuaiskorvaushoitoa tarvitaan, tutkimuslääke annetaan välittömästi dialyysin jälkeen.

Jos potilas intuboidaan, diasereiini- tai lumekapselit avataan ja niiden sisältö laitetaan aiemmin puhdistettuihin ja asianmukaisesti tunnistettuihin nailonpusseihin. Pussin sisältö liuotetaan 10-20 ml:aan tislattua vettä 20 ml:n ruiskussa, kun hoitaja antaa tutkijan läsnäollessa. Tutkimusinterventio ei viivytä tai vaikuta potilaan kliiniseen hoitoon paikallisten keskuksen käytäntöjen mukaisesti.

Laboratorioanalyysit Sisäänpääsyn yhteydessä otetaan ensimmäinen verinäyte ennen ensimmäistä tutkimuslääkeannosta (päivä 0) ja sen jälkeen kolme ja kymmenen tuntia lääkkeen antamisen jälkeen. Verinäytteet otetaan myös toisena (päivä 2), viidentenä (päivä 5) ja kymmenentenä (päivä 10) hoitopäivänä. Verinäytteet otetaan 12 tunnin paaston jälkeen, lukuun ottamatta vastaanoton yhteydessä otettuja näytteitä. Välittömästi keräämisen jälkeen kaikki näytteet sentrifugoidaan nopeudella 3 500 rpm ja pakastetaan nestetypessä yhden erän käsittelyä varten. Tulehdukselliset sytokiinit (c-reaktiivinen proteiini, IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12p70, IFN-α2, IFN-β, IFN-y, TNF-α, IP-10 GM-CSF ) mitataan multipleksisellä immunomäärityksellä (Bio-Plex 200®, Bio-Rad) sekä muilla markkereilla, kuten troponiini-T- ja D-dimeerimittauksilla.

Tutkimuksen päätepisteet Päätepisteet ovat muutos seerumin sytokiinien, troponiini-T:n ja D-dimeerin pitoisuuksissa sairaalahoidon päivästä 0 päivään 5 ja päivästä 0 päivään 10 sekä käyrän alla oleva pinta-ala ottaen huomioon kaikki mittaukset Päivä 0 - Päivä 10.

Toissijaisia ​​päätepisteitä ovat (i) aika kliiniseen huononemiseen, joka määritellään ajalla satunnaistamisesta kuolleisuuteen tai Maailman terveysjärjestön (WHO) kliinisen etenemisasteikon pahenemiseen, arvioituna kahden pisteen lisäyksellä tällä asteikolla; ii) haittatapahtumien kumulatiivinen ilmaantuvuus; (iii) vakavien haittatapahtumien kumulatiivinen ilmaantuvuus.

Diasereiinin hyötyosuus Diasereiinin ja sen aktiivisen metaboliitin, reiinin, biologinen hyötyosuus arvioidaan diasereiinihoitoon satunnaistettujen potilaiden seerumissa, jotta voidaan varmistaa biosaatavuus COVID-19-potilailla. Siinä käytetään näytteitä päivästä 0 ja aikapisteistä: pian ennen tutkimuslääkkeen antamista, kolme ja kymmenen tuntia sen jälkeen. Kaikille potilaille otetaan nämä näytteet tutkimuksen sokeuden ylläpitämiseksi. Seerumin diasereiini- ja reiinipitoisuudet määritetään nestekromatografialla ja tandemmassaspektrometrialla tutkimuksen lopussa.

Näytteen koon laskeminen Koska käytettävissä ei ole tietoja diasereiinin vaikutuksesta tulehdusvasteeseen COVID-19-potilailla, otoskoko määritettiin empiirisesti 40 koehenkilölle konservatiivisena odotuksena pienestä standardoidusta vaikutuksen koosta (0,2). Siksi päätimme suorittaa pilottinäytteen 40 potilaalla (n = 20 per tutkimushaara), joiden tulokset perustuivat systeemiseen tulehdusvasteeseen ja turvallisuuteen.

Turvallisuusanalyysipopulaatio Koskee kaikkia satunnaistettuja potilaita, jotka saivat vähintään yhden annoksen diasereiinia. Turvallisuusarviointi perustuu turvallisuustulosten, haittatapahtumien, fyysisten tarkastusten, elintoimintojen ja turvallisuuslaboratoriotutkimusten kumulatiiviseen ilmaantuvuuteen. Ensisijainen turvallisuuspäätetapahtuma on satunnaistamisen ja ensimmäisen esiintymisen välinen aika.

Tilastollinen analyysi Jatkuvia muuttujia edustaa mediaani ja siihen liittyvä kvartiiliväli. Kategoriset muuttujat esitetään absoluuttisena frekvenssinä (n) ja suhteellisena frekvenssinä (%). Hoitoryhmä toimittaa yhteenvetotilastotiedot (keskiarvo, keskihajonta, mediaani, minimi ja maksimi) demografisista ja perusominaisuuksista käyttämällä khin neliötestiä (esim. kategorisia muuttujia) ja yksisuuntaista varianssianalyysiä (ANOVA) -mallia. käsittelyn tekijänä (esim. jatkuvat muuttujat). Lisäksi demografisia tietoja ja lähtötilanteen ominaisuuksia verrataan hoitoryhmien välillä hoitoaikeen (ITT) väestön osalta. Tämän testin merkitystä käytetään alustavana arviona satunnaistuksen tyytyväisyydestä.

Plasman proinflammatoristen sytokiinien pitoisuuksia pidetään tehokkuuden päätepisteinä. Ryhmiä verrataan sisäänpääsyn muutoksilla (päivä 0) verrattuna arviointipäiviin (päivä 2, päivä 5 ja päivä 10). Myös kunkin parametrin käyrän alla olevien alueiden vertailu päivästä 0 päivään 10. Jatkuvia muuttujia, joilla on normaali ja ei-parametrinen jakauma, verrataan kovarianssianalyysillä (ANCOVA) tai varianssiarvoanalyysillä (RANKOVA), joka on säädetty perusarvoilla regression lieventämiseksi kohti keskiarvoa.