Covid-19患者におけるジアセレインの研究デザイン

研究デザイン これは、ジアセレインが COVID-19 の入院患者の全身性炎症反応を軽減するかどうかを検証するために設計された無作為化プラセボ対照二重盲検パイロット研究です。 この研究は、カンピナス州立大学の倫理委員会によって審査および承認されました (CAAE: 50440921.6.0000.5404)。

研究集団 COVID-19 の診断が確認された 40 人の患者が研究に登録されます。 患者は、Hospital Estadual Sumaré (Sumaré、ブラジル) および Unicamp Clinical Hospital (Campinas、ブラジル) のいずれかに入院した患者として識別されます。 登録後、患者は無作為に割り付けられ（グループあたり n = 20）、1：1 の方法で、12 時間ごとに 10 日間、ジアセレイン 50 mg またはプラセボ治療のいずれかを受けます。

募集 包含および除外基準を満たすCOVID-19で入院したすべての患者は、研究への参加に招待されます。 インフォームド コンセント フォームを読んで署名した後、患者はランダムに 2 つの治療群に割り当てられます。

無作為化および盲検化 登録後、患者は無作為化されます (グループあたり n = 20) 1:1 で、12 時間ごとに 10 日間、ジアセレイン 50 mg またはプラセボ治療のいずれかを受けます。 研究電子データ収集 (REDCap) プラットフォームは、無作為化システムとして使用されます。 患者、治験責任医師、およびその他の支援スタッフは、実験的治療に対して盲検化されます。 治験薬であるジアセレイン (Artrodar® カプセル 50mg) とプラセボ カプセル (ラクトースとステアリン酸マグネシウム) は、盲検を維持するためにサイズと外観が類似しています。 すべての実験室分析は、治療を知らずに行われます。 治験薬の識別は、データセットをロックした後にのみ行われます。

試験的介入 無作為化後、積極的な治療に割り当てられた患者は、10 日間、12 時間ごとに経口で 1 カプセルのジアセレイン (Artrodar®、50mg) を受け取ります。 プラセボ群に無作為に割り付けられた患者は、10 日間、12 時間ごとに 1 カプセル (ラクトースとステアリン酸マグネシウム) を経口投与されます。 推定糸球体濾過率の速度で急性腎障害を経験した参加者では、24時間ごとに1カプセルに治験薬（ジアセレインまたはプラセボ）の用量調整があります（12時間ごとではなく24時間ごとにジアセレインを50mgに減らします）。 30mL/分未満または腎代替療法が必要。 腎代替療法が必要な場合、治験薬は透析直後に投与されます。

患者が挿管されている場合は、ジアセレインまたはプラセボのカプセルが開かれ、その内容物が事前に洗浄され、適切に識別されたナイロン製の小袋に入れられます。 研究者立ち会いの下、看護師が投与する際に、20mlシリンジで10～20mlの蒸留水にサシェ内容物を溶解させます。 試験的介入は、ローカルセンターのポリシーに従って、患者の臨床管理を遅らせたり、影響を与えたりしません。

実験室分析 入院時に、最初の血液サンプルは、治験薬の最初の投与前（0日目）に収集され、その後、薬物投与の3時間後および10時間後に収集されます。 血液サンプルは、治療の2日目（2日目）、5日目（5日目）、10日目（10日目）にも採取されます。 入院時に採取されたサンプルを除いて、血液サンプルは 12 時間の絶食後に採取されます。 収集後すぐに、すべてのサンプルを 3,500 rpm で遠心分離し、単一バッチ処理のために液体窒素で凍結します。 炎症性サイトカイン (c 反応性タンパク質、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12p70、IFN-α2、IFN-β、IFN-γ、TNF-α、IP-10 GM-CSF ）マルチプレックスイムノアッセイ（Bio-Plex 200®、Bio-Rad）、およびトロポニン-TおよびD-ダイマー測定などの他のマーカーによって測定されます。

研究のエンドポイント エンドポイントは、入院 0 日目から 5 日目まで、および 0 日目から 10 日目までのサイトカイン、トロポニン-T および D-ダイマーの血清レベルの変化、ならびに入院からのすべての測定値を考慮した曲線下面積です。 0日目から10日目。

副次評価項目には、(i) 無作為化から死亡までの時間または世界保健機関 (WHO) 臨床進行スケールの悪化までの時間として定義される臨床的悪化までの時間、このスケールの 2 ポイントの増加によって評価されます。 （ii）有害事象の累積発生率。 (iii) 重篤な有害事象の累積発生率。

ジアセレインのバイオアベイラビリティ ジアセレインとその活性代謝物であるレインのバイオアベイラビリティは、COVID-19 患者のバイオアベイラビリティを保証するために、ジアセレイン治療に無作為に割り付けられた患者の血清で評価されます。 Day 0 のサンプルと、治験薬投与の直前、3 時間後、および 10 時間後の時点のサンプルを使用します。 すべての患者は、研究の盲検化を維持するためにこれらのサンプルを収集します。 血清ジアセレインおよびレイン濃度は、研究の最後に液体クロマトグラフィー-タンデム質量分析法によって決定されます。

サンプルサイズの計算 COVID-19 患者の炎症反応に対するジアセレインの効果に関する利用可能なデータがないため、標準化された小さな効果サイズ (0.2) の控えめな予想で、サンプルサイズは経験的に 40 人の被験者で確立されました。したがって、全身性炎症反応と安全性の結果から、40 人の患者 (研究のアームあたり n=20) でパイロット サンプルを実施することにしました。

安全性分析母集団は、ジアセレインを少なくとも 1 回投与された無作為化されたすべての患者に適用されます。 安全性評価は、安全性結果、有害事象、身体検査、バイタルサイン、および安全性実験室試験の累積発生率に基づいて行われます。 一次安全性エンドポイントは、無作為化から最初の発生までの時間です。

統計分析 連続変数は、中央値および関連する四分位範囲によって表されます。 カテゴリ変数は、絶対頻度 (n) と相対頻度 (%) として表示されます。 要約統計データ (平均、標準偏差、中央値、最小値、最大値) は、カイ 2 乗検定 (カテゴリ変数など) および一元配置分散分析 (ANOVA) モデルを使用して、人口統計学的特性およびベースライン特性について治療グループによって提供されます。要因としての治療法（例：連続変数）。 さらに、人口統計とベースラインの特徴は、治療意図（ITT）集団の治療グループ全体で比較されます。 このテストの重要性は、無作為化の満足度の初期評価として使用されます。

血漿中の炎症誘発性サイトカインの濃度は、有効性のエンドポイントと見なされます。 グループは、入学 (0 日目) と評価日 (2 日目、5 日目、10 日目) の変化によって比較されます。 また、0日目から10日目までの各パラメータの曲線下面積の比較。 正規分布およびノンパラメトリック分布の連続変数は、共分散分析 (ANCOVA) またはベースライン値で調整された分散ランク分析 (RANKOVA) によって比較され、平均への回帰が緩和されます。