Studiendesign des Diacereins bei Patienten mit Covid-19

Studiendesign Dies ist eine randomisierte, placebokontrollierte, doppelblinde Pilotstudie zur Überprüfung, ob Diacerein die systemische Entzündungsreaktion bei Krankenhauspatienten mit COVID-19 dämpft. Diese Studie wurde von der Ethikkommission der State University of Campinas (CAAE: 50440921.6.0000.5404) überprüft und genehmigt.

Studienpopulation Vierzig Patienten mit einer bestätigten COVID-19-Diagnose werden in die Studie aufgenommen. Die Patienten werden als diejenigen identifiziert, die entweder im Hospital Estadual Sumaré (Sumaré, Brasilien) oder im Unicamp Clinical Hospital (Campinas, Brasilien) aufgenommen wurden. Nach der Aufnahme werden die Patienten (n=20 pro Gruppe) im Verhältnis 1:1 randomisiert und erhalten 10 Tage lang alle 12 Stunden entweder 50 mg Diacerein oder ein Placebo.

Rekrutierung Alle mit COVID-19 aufgenommenen Patienten, die die Einschluss- und Ausschlusskriterien erfüllen, werden zur Teilnahme an der Studie eingeladen. Nach dem Lesen und Unterschreiben der Einwilligungserklärung wird der Patient nach dem Zufallsprinzip zwei Behandlungsarmen zugeteilt.

Randomisierung und Verblindung Nach der Aufnahme werden die Patienten 1:1 randomisiert (n = 20 pro Gruppe) und erhalten 10 Tage lang alle 12 Stunden entweder 50 mg Diacerein oder Placebo. Als Randomisierungssystem kommt die Research Electronic Data Capture (REDCap) Plattform zum Einsatz. Patienten, Forscher und anderes Hilfspersonal werden gegenüber der experimentellen Therapie verblindet. Das Studienmedikament, Diacerein (Artrodar®-Kapseln 50 mg) und Placebo-Kapseln (Laktose und Magnesiumstearat), werden in Größe und Aussehen ähnlich sein, um die Verblindung aufrechtzuerhalten. Alle Laboranalysen werden behandlungsblind durchgeführt. Die Identifizierung des Studienmedikaments erfolgt erst nach dem Sperren des Datensatzes.

Studienintervention Nach der Randomisierung erhalten Patienten, die der aktiven Behandlung zugeteilt wurden, 1 Kapsel Diacerein (Artrodar®, 50 mg) oral alle 12 Stunden für 10 Tage. Patienten, die randomisiert der Placebogruppe zugeteilt wurden, erhalten 10 Tage lang alle 12 Stunden 1 Kapsel (Laktose und Magnesiumstearat) oral. Es wird eine Dosisanpassung der Studienmedikation (Diacerein oder Placebo) auf 1 Kapsel alle 24 Stunden (reduziertes Diacerein auf 50 mg alle 24 Stunden statt alle 12 Stunden) bei Teilnehmern geben, die eine akute Nierenschädigung mit einer Rate der geschätzten glomerulären Filtrationsrate erleiden < 30 ml/min oder eine Nierenersatztherapie erforderlich ist. Wenn eine Nierenersatztherapie erforderlich ist, wird das Studienmedikament unmittelbar nach der Dialyse verabreicht.

Wenn der Patient intubiert wird, werden die Diacerein- oder Placebo-Kapseln geöffnet und ihr Inhalt in zuvor gereinigte und ordnungsgemäß gekennzeichnete Nylonbeutel gegeben. Der Beutelinhalt wird zum Zeitpunkt der Verabreichung durch die Pflegekraft in Anwesenheit eines Forschers in 10 bis 20 ml destilliertem Wasser in einer 20-ml-Spritze aufgelöst. Die Studienintervention wird das klinische Management des Patienten gemäß den Richtlinien des lokalen Zentrums nicht verzögern oder beeinträchtigen.

Laboranalysen Bei der Aufnahme wird die erste Blutprobe vor der ersten Dosis des Studienmedikaments (Tag 0) und dann drei und zehn Stunden nach der Medikamentenverabreichung entnommen. Blutproben werden auch am zweiten (Tag 2), fünften (Tag 5) und zehnten (Tag 10) Behandlungstag entnommen. Mit Ausnahme von Proben, die bei der Aufnahme entnommen werden, werden Blutproben nach einer 12-stündigen Fastenzeit entnommen. Unmittelbar nach der Entnahme werden alle Proben bei 3.500 U/min zentrifugiert und in flüssigem Stickstoff für die Einzelchargenverarbeitung eingefroren. Entzündungszytokine (c-reaktives Protein, IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12p70, IFN-α2, IFN-β, IFN-γ, TNF-α, IP-10 GM-CSF ) werden durch Multiplex-Immunoassay (Bio-Plex 200®, Bio-Rad) sowie andere Marker wie Troponin-T- und D-Dimer-Messungen gemessen.

Studienendpunkte Die Endpunkte sind die Veränderung der Serumspiegel von Zytokinen, Troponin-T und D-Dimer von Tag 0 bis Tag 5 des Krankenhausaufenthalts und von Tag 0 bis Tag 10 sowie die Fläche unter der Kurve unter Berücksichtigung aller Messungen aus Tag 0 bis Tag 10.

Zu den sekundären Endpunkten gehören (i) Zeit bis zur klinischen Verschlechterung, definiert als Zeit von der Randomisierung bis zur Mortalität oder Verschlechterung der klinischen Progressionsskala der Weltgesundheitsorganisation (WHO), bewertet durch die Erhöhung um zwei Punkte auf dieser Skala; (ii) kumulative Inzidenz unerwünschter Ereignisse; (iii) kumulative Inzidenz schwerer unerwünschter Ereignisse.

Diacerein-Bioverfügbarkeit Die Bioverfügbarkeit von Diacerein und seinem aktiven Metaboliten Rhein wird im Serum von Patienten bewertet, die randomisiert einer Diacerein-Behandlung unterzogen werden, um die Bioverfügbarkeit bei COVID-19-Patienten sicherzustellen. Es werden Proben von Tag 0 und Zeitpunkten verwendet: kurz vor, drei und zehn Stunden nach der Verabreichung des Studienarzneimittels. Allen Patienten werden diese Proben entnommen, um die Studienverblindung aufrechtzuerhalten. Die Serumkonzentrationen von Diacerein und Rhein werden am Ende der Studie durch Flüssigchromatographie-Tandem-Massenspektrometrie bestimmt.

Berechnung der Stichprobengröße Da keine Daten zur Wirkung von Diacerein auf die Entzündungsreaktion bei Patienten mit COVID-19 verfügbar sind, wurde die Stichprobengröße empirisch auf 40 Probanden in einer konservativen Erwartung einer kleinen standardisierten Effektgröße (0,2) festgelegt. Daher haben wir uns entschieden, eine Pilotstichprobe mit 40 Patienten (n=20 pro Studienarm) mit Ergebnissen zu systemischer Entzündungsreaktion und Sicherheit durchzuführen.

Die Population der Sicherheitsanalyse gilt für alle randomisierten Patienten, die mindestens eine Dosis Diacerein erhalten haben. Die Sicherheitsbewertung basiert auf der kumulativen Inzidenz von Sicherheitsergebnissen, unerwünschten Ereignissen, körperlichen Untersuchungen, Vitalfunktionen und Sicherheitslabortests. Der primäre Sicherheitsendpunkt ist die Zeit zwischen der Randomisierung und dem ersten Auftreten.

Statistische Analyse Kontinuierliche Variablen werden durch den Median und den zugehörigen Interquartilbereich dargestellt. Kategoriale Variablen werden als absolute Häufigkeit (n) und relative Häufigkeit (%) dargestellt. Zusammenfassende statistische Daten (Mittelwert, Standardabweichung, Median, Minimum und Maximum) werden von der Behandlungsgruppe für demografische und Grundlinienmerkmale unter Verwendung eines Chi-Quadrat-Tests (z. B. kategoriale Variablen) und eines Einweg-Varianzanalysemodells (ANOVA) bereitgestellt mit Behandlung als Faktor (z. B. kontinuierliche Variablen). Darüber hinaus werden die demografischen Daten und Baseline-Merkmale zwischen den Behandlungsgruppen für die Intention-to-treat (ITT)-Population verglichen. Die Signifikanz dieses Tests wird als erste Einschätzung für die Zufriedenheit mit der Randomisierung verwendet.

Die Konzentrationen von entzündungsfördernden Zytokinen im Plasma werden als Wirksamkeitsendpunkte betrachtet. Die Gruppen werden anhand der Änderungen bei der Zulassung (Tag 0) gegenüber den Bewertungstagen (Tag 2, Tag 5 und Tag 10) verglichen. Auch Vergleich zwischen den Bereichen unter der Kurve für jeden der Parameter von Tag 0 bis Tag 10. Kontinuierliche Variablen mit normaler und nichtparametrischer Verteilung werden durch Analyse der Kovarianz (ANCOVA) oder durch Analyse des Varianzrangs (RANKOVA) verglichen, die durch Basiswerte angepasst wird, um die Regression zum Mittelwert abzuschwächen.