Projekt badania diacereiny u pacjentów z Covid-19

Projekt badania Jest to randomizowane, kontrolowane placebo, podwójnie ślepe badanie pilotażowe mające na celu sprawdzenie, czy diacereina osłabia ogólnoustrojową odpowiedź zapalną u hospitalizowanych pacjentów z COVID-19. To badanie zostało sprawdzone i zatwierdzone przez Komisję Etyki Uniwersytetu Stanowego Campinas (CAAE: 50440921.6.0000.5404).

Populacja badana Czterdziestu pacjentów z potwierdzoną diagnozą COVID-19 zostanie włączonych do badania. Pacjenci zostaną zidentyfikowani jako pacjenci przyjęci do szpitala Estadual Sumaré (Sumaré, Brazylia) lub szpitala klinicznego Unicamp (Campinas, Brazylia). Po włączeniu pacjenci zostaną losowo przydzieleni (n=20 na grupę) w stosunku 1:1 do grupy otrzymującej diacereinę w dawce 50 mg lub placebo co 12 godzin przez 10 dni.

Rekrutacja Wszyscy pacjenci przyjmowani z COVID-19, którzy spełniają kryteria włączenia i wyłączenia, zostaną zaproszeni do udziału w badaniu. Po przeczytaniu i podpisaniu formularza świadomej zgody pacjent zostanie losowo przydzielony do dwóch ramion leczenia.

Randomizacja i zaślepienie Po włączeniu pacjenci zostaną losowo przydzieleni (n=20 na grupę) w stosunku 1:1 do grupy otrzymującej diacereinę w dawce 50 mg lub placebo co 12 godzin przez 10 dni. Platforma elektronicznego zbierania danych badawczych (REDCap) zostanie wykorzystana jako system randomizacji. Pacjenci, badacze i inny personel pomocniczy będą ślepi na terapię eksperymentalną. Badany lek, diacereina (kapsułki Artrodar® 50 mg) i kapsułki placebo (laktoza i stearynian magnezu), będą podobne pod względem wielkości i wyglądu, aby zachować zaślepienie. Wszystkie analizy laboratoryjne będą wykonywane z zaślepieniem na leczenie. Identyfikacja badanego leku nastąpi dopiero po zablokowaniu zbioru danych.

Interwencja próbna Po randomizacji pacjenci przydzieleni do aktywnego leczenia będą otrzymywać doustnie 1 kapsułkę diacereiny (Artrodar®, 50 mg) co 12 godzin przez 10 dni. Pacjenci przydzieleni losowo do grupy placebo będą otrzymywać doustnie 1 kapsułkę (laktoza i stearynian magnezu) co 12 godzin przez 10 dni. U uczestników, u których wystąpiła ostra niewydolność nerek, nastąpi dostosowanie dawki badanego leku (diacereiny lub placebo) do 1 kapsułki co 24 godziny (zmniejszenie dawki diacereiny do 50 mg co 24 godziny zamiast co 12 godzin) <30 ml/min lub wymagające leczenia nerkozastępczego. Jeśli wymagana jest terapia nerkozastępcza, badany lek zostanie podany natychmiast po dializie.

Jeśli pacjent jest zaintubowany, kapsułki z diacereiną lub placebo zostaną otwarte, a ich zawartość umieszczona w uprzednio oczyszczonych i odpowiednio oznakowanych nylonowych saszetkach. Zawartość saszetki zostanie rozpuszczona w 10 do 20 ml wody destylowanej w 20 ml strzykawce w momencie podania przez pielęgniarkę w obecności badacza. Próbna interwencja nie opóźni ani nie wpłynie na postępowanie kliniczne pacjenta zgodnie z polityką lokalnego ośrodka.

Analizy laboratoryjne Przy przyjęciu pierwsza próbka krwi zostanie pobrana przed podaniem pierwszej dawki badanego leku (dzień 0), a następnie trzy i dziesięć godzin po podaniu leku. Próbki krwi zostaną również pobrane drugiego (dzień 2), piątego (dzień 5) i dziesiątego (dzień 10) dnia leczenia. Z wyjątkiem próbek pobieranych przy przyjęciu, próbki krwi będą pobierane po 12-godzinnym poście. Natychmiast po pobraniu wszystkie próbki zostaną odwirowane z prędkością 3500 obr./min i zamrożone w ciekłym azocie w celu przetworzenia pojedynczej partii. Cytokiny zapalne (białko c-reaktywne, IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12p70, IFN-α2, IFN-β, IFN-γ, TNF-α, IP-10 GM-CSF ) będą mierzone za pomocą multipleksowego testu immunologicznego (Bio-Plex 200®, Bio-Rad), jak również innych markerów, takich jak pomiary troponiny-T i D-dimerów.

Punkty końcowe badania Punkty końcowe to zmiana stężeń cytokin, troponiny-T i D-dimeru w surowicy od dnia 0 do dnia 5 hospitalizacji oraz od dnia 0 do dnia 10, a także pole pod krzywą uwzględniające wszystkie pomiary od Od dnia 0 do dnia 10.

Drugorzędowe punkty końcowe obejmują (i) czas do pogorszenia stanu klinicznego zdefiniowany jako czas od randomizacji do zgonu lub pogorszenia według Skali Postępu Klinicznego Światowej Organizacji Zdrowia (WHO), oceniany jako wzrost o dwa punkty w tej skali; (ii) skumulowana częstość występowania zdarzeń niepożądanych; (iii) skumulowana częstość występowania poważnych zdarzeń niepożądanych.

Biodostępność diacereiny Biodostępność diacereiny i jej aktywnego metabolitu, reiny, zostanie oceniona w surowicy pacjentów zrandomizowanych do leczenia diacereiną, aby zapewnić biodostępność u pacjentów z COVID-19. Wykorzystane zostaną próbki z Dnia 0 i punktów czasowych: krótko przed, trzy i dziesięć godzin po podaniu badanego leku. Od wszystkich pacjentów zostaną pobrane te próbki, aby utrzymać zaślepienie badania. Stężenia diacereiny i reiny w surowicy zostaną określone za pomocą chromatografii cieczowej z tandemową spektrometrią mas na koniec badania.

Obliczanie wielkości próby Ponieważ nie ma dostępnych danych na temat wpływu diacereiny na odpowiedź zapalną u pacjentów z COVID-19, wielkość próby ustalono empirycznie na 40 osób przy konserwatywnym oczekiwaniu małej, wystandaryzowanej wielkości efektu (0,2). Dlatego zdecydowaliśmy się przeprowadzić pilotażową próbę z 40 pacjentami (n=20 na ramię badania) z wynikami ogólnoustrojowej odpowiedzi zapalnej i bezpieczeństwa.

Populacja objęta analizą bezpieczeństwa Dotyczy wszystkich randomizowanych pacjentów, którzy otrzymali co najmniej jedną dawkę diacereiny. Ocena bezpieczeństwa będzie oparta na skumulowanej częstości występowania skutków bezpieczeństwa, zdarzeń niepożądanych, badań fizykalnych, parametrów życiowych i laboratoryjnych testów bezpieczeństwa. Pierwszorzędowym punktem końcowym bezpieczeństwa będzie czas między randomizacją a pierwszym wystąpieniem.

Analiza statystyczna Zmienne ciągłe będą reprezentowane przez medianę i związany z nią rozstęp międzykwartylowy. Zmienne kategorialne zostaną przedstawione jako częstość bezwzględna (n) i częstość względna (%). Podsumowanie danych statystycznych (średnia, odchylenie standardowe, mediana, minimum i maksimum) zostanie dostarczone przez grupę badaną dla cech demograficznych i wyjściowych przy użyciu testu chi-kwadrat (np. zmienne kategoryczne) i modelu jednokierunkowej analizy wariancji (ANOVA) z leczeniem jako czynnikiem (np. zmienne ciągłe). Ponadto porównane zostaną dane demograficzne i charakterystyka wyjściowa między grupami leczenia dla populacji, która ma być leczona (ITT). Znaczenie tego testu zostanie wykorzystane jako wstępna ocena zadowolenia z randomizacji.

Stężenia cytokin prozapalnych w osoczu będą uważane za punkty końcowe skuteczności. Grupy zostaną porównane na podstawie zmian w przyjęciu (dzień 0) w porównaniu z dniami oceny (dzień 2, dzień 5 i dzień 10). Ponadto porównanie obszarów pod krzywą dla każdego z parametrów od dnia 0 do dnia 10. Zmienne ciągłe o rozkładzie normalnym i nieparametrycznym zostaną porównane za pomocą analizy kowariancji (ANCOVA) lub analizy rangi wariancji (RANKOVA) skorygowanej o wartości bazowe w celu złagodzenia regresji w kierunku średniej.