Conception de l'étude de la diacéréine chez les patients atteints de Covid-19

Conception de l'étude Il s'agit d'une étude pilote randomisée, contrôlée par placebo et en double aveugle conçue pour vérifier si la diacéréine atténue la réponse inflammatoire systémique chez les patients hospitalisés atteints de COVID-19. Cette étude a été examinée et approuvée par le comité d'éthique de l'Université d'État de Campinas (CAAE : 50440921.6.0000.5404).

Population d'étude Quarante patients avec un diagnostic confirmé de COVID-19 seront inscrits à l'étude. Les patients seront identifiés comme étant ceux admis à l'hôpital Estadual Sumaré (Sumaré, Brésil) et à l'hôpital clinique Unicamp (Campinas, Brésil). Après l'inscription, les patients seront randomisés (n = 20 par groupe) de manière 1: 1 pour recevoir soit de la diacéréine 50 mg, soit un traitement placebo toutes les 12 heures pendant 10 jours.

Recrutement Tous les patients admis avec COVID-19 qui répondent aux critères d'inclusion et d'exclusion seront invités à participer à l'étude. Après avoir lu et signé le formulaire de consentement éclairé, le patient sera réparti au hasard dans deux bras de traitement.

Randomisation et mise en aveugle Après l'inscription, les patients seront randomisés (n = 20 par groupe) 1:1 pour recevoir soit de la diacéréine 50 mg, soit un traitement placebo toutes les 12 heures pendant 10 jours. La plate-forme de saisie électronique des données de recherche (REDCap) sera utilisée comme système de randomisation. Les patients, les chercheurs et les autres membres du personnel de soutien ne seront pas informés de la thérapie expérimentale. Le médicament à l'étude, la diacéréine (Artrodar®-capsules 50 mg) et les capsules placebo (lactose et stéarate de magnésium), seront similaires en taille et en apparence pour maintenir l'insu. Toutes les analyses de laboratoire seront effectuées en aveugle du traitement. L'identification du médicament à l'étude n'aura lieu qu'après le verrouillage de l'ensemble de données.

Intervention d'essai Après randomisation, les patients affectés au traitement actif recevront 1 capsule de diacéréine (Artrodar®, 50 mg) par voie orale toutes les 12 heures pendant 10 jours. Les patients randomisés dans le groupe placebo recevront 1 gélule (lactose et stéarate de magnésium) par voie orale toutes les 12 heures pendant 10 jours. Il y aura un ajustement de la dose du médicament à l'étude (diacereine ou placebo) à 1 capsule toutes les 24 heures (diacereine réduite à 50 mg toutes les 24 heures au lieu de toutes les 12 heures) chez les participants qui souffrent d'une lésion rénale aiguë avec un taux de filtration glomérulaire estimé <30 mL/min ou nécessitant une thérapie de remplacement rénal. Si une thérapie de remplacement rénal est nécessaire, le médicament à l'étude sera administré immédiatement après la dialyse.

Si le patient est intubé, les gélules de diacéréine ou de placebo seront ouvertes et leur contenu sera placé dans des sachets en nylon préalablement nettoyés et correctement identifiés. Le contenu du sachet sera dissous dans 10 à 20 ml d'eau distillée dans une seringue de 20 ml au moment de l'administration par l'infirmier en présence d'un chercheur. L'intervention d'essai ne retardera ni n'affectera la prise en charge clinique du patient conformément aux politiques du centre local.

Analyses de laboratoire À l'admission, le premier échantillon de sang sera prélevé avant la première dose du médicament à l'étude (jour 0), puis trois et dix heures après l'administration du médicament. Des échantillons de sang seront également prélevés le deuxième (jour 2), le cinquième (jour 5) et le dixième (jour 10) du traitement. À l'exception des échantillons obtenus à l'admission, les échantillons de sang seront prélevés après un jeûne de 12 heures. Immédiatement après le prélèvement, tous les échantillons seront centrifugés à 3 500 tr/min et congelés dans de l'azote liquide pour un traitement en un seul lot. Cytokines inflammatoires (protéine c-réactive, IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12p70, IFN-α2, IFN-β, IFN-γ, TNF-α, IP-10 GM-CSF ) seront mesurés par dosage immunologique multiplex (Bio-Plex 200®, Bio-Rad) ainsi que d'autres marqueurs tels que les dosages de la troponine-T et des D-dimères.

Critères d'évaluation de l'étude Les critères d'évaluation sont l'évolution des taux sériques de cytokines, de troponine-T et de D-dimères du jour 0 au jour 5 d'hospitalisation et du jour 0 au jour 10, ainsi que l'aire sous la courbe en tenant compte de toutes les mesures de Jour 0 à Jour 10.

Les critères d'évaluation secondaires comprennent (i) le temps jusqu'à la détérioration clinique défini comme le temps entre la randomisation et la mortalité ou l'aggravation de l'échelle de progression clinique de l'Organisation mondiale de la santé (OMS), évalué par l'augmentation de deux points sur cette échelle ; (ii) l'incidence cumulée des événements indésirables ; (iii) incidence cumulée des événements indésirables graves.

Biodisponibilité de la diacéréine La biodisponibilité de la diacéréine et de son métabolite actif, la rhéine, sera évaluée dans le sérum de patients randomisés pour un traitement par la diacéréine afin d'assurer la biodisponibilité chez les patients COVID-19. Il sera utilisé des échantillons du jour 0 et des moments : peu de temps avant, trois et dix heures après l'administration du médicament à l'étude. Tous les patients auront ces échantillons prélevés pour maintenir l'insu de l'étude. Les concentrations sériques de diacéréine et de rhéine seront déterminées par chromatographie liquide-spectrométrie de masse en tandem à la fin de l'étude.

Calcul de la taille de l'échantillon Comme il n'y a pas de données disponibles sur l'effet de la diacéréine sur la réponse inflammatoire chez les patients atteints de COVID-19, la taille de l'échantillon a été établie empiriquement à 40 sujets dans une attente prudente d'une petite taille d'effet standardisée (0,2). Par conséquent, nous avons décidé de réaliser un échantillon pilote avec 40 patients (n = 20 par bras de l'étude) avec des résultats de réponse inflammatoire systémique et de sécurité.

La population d'analyse de sécurité Appliquée à tous les patients randomisés ayant reçu au moins une dose de diacéréine. L'évaluation de la sécurité sera basée sur l'incidence cumulée des résultats de sécurité, des événements indésirables, des examens physiques, des signes vitaux et des tests de sécurité en laboratoire. Le critère principal d'innocuité sera le temps écoulé entre la randomisation et le premier événement.

Analyse statistique Les variables continues seront représentées par la médiane et l'intervalle interquartile associé. Les variables catégorielles seront présentées sous forme de fréquence absolue (n) et de fréquence relative (%). Des données statistiques récapitulatives (moyenne, écart-type, médiane, minimum et maximum) seront fournies par le groupe de traitement pour les caractéristiques démographiques et de base à l'aide d'un test du chi carré (par exemple, des variables catégorielles) et d'une analyse de variance à un facteur (ANOVA) modèle avec traitement comme facteur (par exemple, variables continues). De plus, les données démographiques et les caractéristiques de base seront comparées entre les groupes de traitement pour la population en intention de traiter (ITT). La significativité de ce test servira d'évaluation initiale de la satisfaction de la randomisation.

Les concentrations plasmatiques de cytokines pro-inflammatoires seront considérées comme des paramètres d'efficacité. Les groupes seront comparés en fonction des changements d'admission (jour 0) par rapport aux jours d'évaluation (jour 2, jour 5 et jour 10). Aussi, comparaison entre les aires sous la courbe pour chacun des paramètres du jour 0 au jour 10. Les variables continues à distribution normale et non paramétrique seront comparées par analyse de covariance (ANCOVA) ou par analyse de rang de variance (RANKOVA) ajustée par les valeurs de base pour atténuer la régression vers la moyenne.