Дизайн исследования диацереина у пациентов с Covid-19

Дизайн исследования Это рандомизированное, плацебо-контролируемое, двойное слепое пилотное исследование, предназначенное для проверки того, ослабляет ли диацереин системную воспалительную реакцию у госпитализированных пациентов с COVID-19. Это исследование было рассмотрено и одобрено Комитетом по этике Государственного университета Кампинаса (CAAE: 50440921.6.0000.5404).

Исследуемая популяция В исследование будут включены 40 пациентов с подтвержденным диагнозом COVID-19. Пациенты будут идентифицированы как госпитализированные в больницу Estadual Sumaré (Сумаре, Бразилия) и в клиническую больницу Unicamp (Кампинас, Бразилия). После регистрации пациенты будут рандомизированы (n = 20 в группе) в соотношении 1:1 для получения диацереина в дозе 50 мг или плацебо каждые 12 часов в течение 10 дней.

Набор всех пациентов, госпитализированных с COVID-19, которые соответствуют критериям включения и исключения, будут приглашены для участия в исследовании. После прочтения и подписания формы информированного согласия пациент будет случайным образом распределен в две группы лечения.

Рандомизация и ослепление После регистрации пациенты будут рандомизированы (n=20 в группе) 1:1 для получения диацереина в дозе 50 мг или плацебо каждые 12 часов в течение 10 дней. В качестве системы рандомизации будет использоваться платформа электронного сбора данных исследований (REDCap). Пациенты, исследователи и другой вспомогательный персонал не будут знать об экспериментальной терапии. Исследуемый препарат, диацереин (Артродар®-капсулы 50 мг) и капсулы плацебо (лактоза и стеарат магния) будут одинаковыми по размеру и внешнему виду, чтобы поддерживать ослепление. Все лабораторные анализы будут проводиться без учета лечения. Идентификация исследуемого препарата произойдет только после блокировки набора данных.

Пробное вмешательство После рандомизации пациенты, назначенные для активного лечения, будут получать по 1 капсуле диацереина (Артродар®, 50 мг) перорально каждые 12 часов в течение 10 дней. Пациенты, рандомизированные в группу плацебо, будут получать по 1 капсуле (лактоза и стеарат магния) перорально каждые 12 часов в течение 10 дней. Будет проведена коррекция дозы исследуемого препарата (диацереина или плацебо) до 1 капсулы каждые 24 часа (снижение дозы диацереина до 50 мг каждые 24 часа вместо каждых 12 часов) у участников с острым повреждением почек со скоростью расчетной скорости клубочковой фильтрации. <30 мл/мин или требуется заместительная почечная терапия. Если требуется заместительная почечная терапия, исследуемый препарат будет вводиться сразу после диализа.

Если пациент интубирован, капсулы с диацереином или плацебо будут вскрыты, а их содержимое помещено в предварительно очищенные и должным образом идентифицированные нейлоновые пакетики. Содержимое пакетика растворяют в 10-20 мл дистиллированной воды в 20-мл шприце во время введения медсестрой в присутствии исследователя. Пробное вмешательство не задержит и не повлияет на клиническое ведение пациента в соответствии с политикой местного центра.

Лабораторные анализы. При поступлении первый образец крови будет взят до приема первой дозы исследуемого препарата (день 0), а затем через три и десять часов после введения препарата. Образцы крови также будут собираться на второй (2-й день), пятый (5-й день) и десятый (10-й день) день лечения. За исключением образцов, полученных при поступлении, образцы крови будут собираться после 12-часового голодания. Сразу после сбора все образцы будут центрифугированы при 3500 об/мин и заморожены в жидком азоте для однократной обработки. Воспалительные цитокины (с-реактивный белок, IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12p70, IFN-α2, IFN-β, IFN-γ, TNF-α, IP-10 GM-CSF ) будет измеряться мультиплексным иммуноанализом (Bio-Plex 200®, Bio-Rad), а также другими маркерами, такими как измерения тропонина-Т и D-димера.

Конечные точки исследования Конечными точками являются изменение сывороточных уровней цитокинов, тропонина-Т и D-димера с 0-го по 5-й день госпитализации и с 0-го по 10-й день, а также площадь под кривой с учетом всех измерений от День 0 - День 10.

Вторичные конечные точки включают (i) время до клинического ухудшения, определяемое как время от рандомизации до летального исхода или ухудшения по шкале клинического прогрессирования Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), оцениваемое по увеличению двух баллов по этой шкале; (ii) кумулятивная частота нежелательных явлений; (iii) кумулятивная частота тяжелых нежелательных явлений.

Биодоступность диацереина Биодоступность диацереина и его активного метаболита, реина, будет оцениваться в сыворотке пациентов, рандомизированных для лечения диацереином, чтобы гарантировать биодоступность у пациентов с COVID-19. Будут использованы образцы с 0-го дня и временные точки: незадолго до, через три и десять часов после введения исследуемого препарата. У всех пациентов будут собраны эти образцы для сохранения ослепления исследования. Концентрации диацереина и реина в сыворотке будут определяться с помощью жидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии в конце исследования.

Расчет размера выборки Поскольку данных о влиянии диацереина на воспалительную реакцию у пациентов с COVID-19 нет, размер выборки был эмпирически установлен на уровне 40 субъектов в консервативном ожидании небольшого стандартизированного размера эффекта (0,2). Поэтому мы решили провести пилотную выборку с 40 пациентами (n = 20 на группу исследования) с исходами системной воспалительной реакции и безопасностью.

Популяция для анализа безопасности Применительно ко всем рандомизированным пациентам, получившим хотя бы одну дозу диацереина. Оценка безопасности будет основываться на кумулятивной частоте последствий для безопасности, неблагоприятных событий, физических осмотров, основных показателей жизнедеятельности и лабораторных тестов безопасности. Первичной конечной точкой безопасности будет время между рандомизацией и первым появлением.

Статистический анализ. Непрерывные переменные будут представлены медианой и соответствующим межквартильным диапазоном. Категориальные переменные будут представлены как абсолютная частота (n) и относительная частота (%). Сводные статистические данные (среднее значение, стандартное отклонение, медиана, минимум и максимум) будут предоставлены лечебной группой для демографических и исходных характеристик с использованием критерия хи-квадрат (например, категориальные переменные) и модели однофакторного дисперсионного анализа (ANOVA). с лечением как фактором (например, непрерывные переменные). Кроме того, демографические и исходные характеристики будут сравниваться между группами лечения для популяции с намерением лечить (ITT). Значимость этого теста будет использоваться в качестве начальной оценки для удовлетворения рандомизации.

Концентрации провоспалительных цитокинов в плазме будут рассматриваться как конечные точки эффективности. Группы будут сравниваться по изменениям в госпитализации (день 0) по сравнению с днями оценки (день 2, день 5 и день 10). Также сравнение площадей под кривой для каждого из параметров с 0-го по 10-й день. Непрерывные переменные с нормальным и непараметрическим распределением будут сравниваться с помощью анализа ковариации (ANCOVA) или анализа ранга дисперсии (RANKOVA), скорректированного по базовым значениям, чтобы смягчить регрессию к среднему значению.