Studieontwerp van diacereïne bij patiënten met Covid-19

Studieopzet Dit is een gerandomiseerde, placebogecontroleerde, dubbelblinde pilotstudie die is opgezet om te verifiëren of diacereïne de systemische ontstekingsreactie verzwakt bij gehospitaliseerde patiënten met COVID-19. Deze studie is beoordeeld en goedgekeurd door de Ethische Commissie van de Staatsuniversiteit van Campinas (CAAE: 50440921.6.0000.5404).

Onderzoekspopulatie Veertig patiënten met een bevestigde diagnose van COVID-19 zullen deelnemen aan het onderzoek. De patiënten zullen worden geïdentificeerd als degenen die zijn opgenomen in Hospital Estadual Sumaré (Sumaré, Brazilië) en Unicamp Clinical Hospital (Campinas, Brazilië). Na inschrijving worden de patiënten gerandomiseerd (n=20 per groep) in een verhouding van 1:1 om gedurende 10 dagen om de 12 uur een behandeling met diacereïne 50 mg of een placebo te krijgen.

Werving Alle patiënten die zijn opgenomen met COVID-19 en die voldoen aan de in- en exclusiecriteria, worden uitgenodigd om deel te nemen aan het onderzoek. Na het lezen en ondertekenen van het toestemmingsformulier wordt de patiënt willekeurig toegewezen aan twee behandelingsarmen.

Randomisatie en blindering Na inschrijving worden patiënten gerandomiseerd (n=20 per groep) 1:1 om gedurende 10 dagen om de 12 uur 50 mg diacereïne of een placebobehandeling te krijgen. Het research electronic data capture (REDCap) platform zal worden gebruikt als een randomisatiesysteem. Patiënten, onderzoekers en ander ondersteunend personeel zullen blind zijn voor de experimentele therapie. Het onderzoeksgeneesmiddel, diacereïne (Arrodar®-capsules 50 mg) en placebo-capsules (lactose en magnesiumstearaat), zullen qua grootte en uiterlijk vergelijkbaar zijn om verblinding te behouden. Alle laboratoriumanalyses worden blind voor de behandeling uitgevoerd. Identificatie van het onderzoeksgeneesmiddel vindt pas plaats na het vergrendelen van de dataset.

Proefinterventie Na randomisatie krijgen patiënten die zijn toegewezen aan de actieve behandeling 1 capsule diacereïne (Arrodar®, 50 mg) oraal om de 12 uur gedurende 10 dagen. Patiënten gerandomiseerd naar de placebogroep krijgen 1 capsule (lactose en magnesiumstearaat) oraal om de 12 uur gedurende 10 dagen. Er zal een dosisaanpassing van de studiemedicatie (diacereïne of placebo) plaatsvinden naar 1 capsule om de 24 uur (diacereïne verlaagd naar 50 mg om de 24 uur in plaats van om de 12 uur) bij deelnemers die acuut nierletsel ervaren met een geschatte glomerulaire filtratiesnelheid <30 ml/min of waarvoor nierfunctievervangende therapie nodig is. Als nierfunctievervangende therapie nodig is, wordt het onderzoeksgeneesmiddel onmiddellijk na de dialyse toegediend.

Als de patiënt is geïntubeerd, worden de diacereïne- of placebocapsules geopend en wordt de inhoud in vooraf gereinigde en correct geïdentificeerde nylon sachets geplaatst. De inhoud van het sachet wordt opgelost in 10 tot 20 ml gedestilleerd water in een spuit van 20 ml op het moment van toediening door de verpleegkundige in aanwezigheid van een onderzoeker. De proefinterventie zal de klinische behandeling van de patiënt niet vertragen of beïnvloeden in overeenstemming met het lokale centrumbeleid.

Laboratoriumanalyses Bij opname wordt het eerste bloedmonster afgenomen vóór de eerste dosis van het onderzoeksgeneesmiddel (dag 0), en daarna drie en tien uur na de toediening van het geneesmiddel. Er zullen ook bloedmonsters worden afgenomen op de tweede (dag 2), vijfde (dag 5) en tiende (dag 10) dag van de behandeling. Met uitzondering van monsters verkregen bij opname, worden bloedmonsters afgenomen na 12 uur vasten. Onmiddellijk na verzameling worden alle monsters gecentrifugeerd bij 3.500 tpm en ingevroren in vloeibare stikstof voor verwerking in één batch. Ontstekingscytokines (c-reactief proteïne, IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12p70, IFN-α2, IFN-β, IFN-γ, TNF-α, IP-10 GM-CSF ) zal worden gemeten door multiplex immunoassay (Bio-Plex 200®, Bio-Rad) evenals andere merkers zoals troponine-T en D-dimeer metingen.

Onderzoekseindpunten De eindpunten zijn de verandering in de serumspiegels van cytokines, troponine-T en D-dimeer van dag 0 tot dag 5 van de ziekenhuisopname en van dag 0 tot dag 10, evenals het gebied onder de curve rekening houdend met alle metingen van Dag 0 tot Dag 10.

Secundaire eindpunten zijn onder meer (i) tijd tot klinische verslechtering, gedefinieerd als de tijd van randomisatie tot mortaliteit of verslechtering van de klinische progressieschaal van de Wereldgezondheidsorganisatie (WHO), beoordeeld door een toename van twee punten op deze schaal; (ii) cumulatieve incidentie van bijwerkingen; (iii) cumulatieve incidentie van ernstige bijwerkingen.

Biologische beschikbaarheid van diacereïne De biologische beschikbaarheid van diacereïne en zijn actieve metaboliet, rheïne, zal worden geëvalueerd in het serum van patiënten die gerandomiseerd zijn voor behandeling met diacereïne om de biologische beschikbaarheid bij COVID-19-patiënten te verzekeren. Er zullen monsters van dag 0 en tijdstippen worden gebruikt: kort voor, drie en tien uur na de toediening van het onderzoeksgeneesmiddel. Alle patiënten zullen deze monsters laten verzamelen om studieblindheid te behouden. Serumdiacereïne- en rheïneconcentraties zullen aan het einde van het onderzoek worden bepaald door middel van vloeistofchromatografie-tandem massaspectrometrie.

Berekening van de steekproefomvang Aangezien er geen gegevens beschikbaar zijn over het effect van diacereïne op de ontstekingsreactie bij patiënten met COVID-19, werd de steekproefomvang empirisch vastgesteld op 40 proefpersonen in een conservatieve verwachting van een kleine gestandaardiseerde effectgrootte (0,2). Daarom hebben we besloten om een ​​pilotsteekproef uit te voeren met 40 patiënten (n=20 per arm van de studie) met uitkomsten van systemische ontstekingsreactie en veiligheid.

De veiligheidsanalysepopulatie Toegepast op alle gerandomiseerde patiënten die ten minste één dosis diacereïne kregen. De veiligheidsbeoordeling zal gebaseerd zijn op de cumulatieve incidentie van veiligheidsresultaten, bijwerkingen, lichamelijk onderzoek, vitale functies en veiligheidslaboratoriumtests. Het primaire veiligheidseindpunt is de tijd tussen randomisatie en het eerste voorval.

Statistische analyse Continue variabelen worden weergegeven door de mediaan en de bijbehorende interkwartielafstand. Categorische variabelen worden gepresenteerd als absolute frequentie (n) en relatieve frequentie (%). Samenvattende statistische gegevens (gemiddelde, standaarddeviatie, mediaan, minimum en maximum) zullen worden verstrekt door de behandelingsgroep voor demografische en basislijnkenmerken met behulp van een chikwadraattoets (bijv. categorische variabelen) en een eenwegs variantieanalyse (ANOVA)-model met behandeling als factor (bijv. continue variabelen). Daarnaast zullen demografische gegevens en baselinekenmerken worden vergeleken tussen behandelingsgroepen voor de intention-to-treat (ITT)-populatie. De significantie van deze test zal worden gebruikt als een eerste beoordeling voor de tevredenheid van randomisatie.

Concentraties van pro-inflammatoire cytokines in het plasma zullen worden beschouwd als eindpunten voor de werkzaamheid. De groepen worden vergeleken op basis van de veranderingen in opname (dag 0) versus beoordelingsdagen (dag 2, dag 5 en dag 10). Vergelijk ook de gebieden onder de curve voor elk van de parameters van dag 0 tot dag 10. Continue variabelen met normale en niet-parametrische verdeling zullen worden vergeleken door analyse van covariantie (ANCOVA) of door analyse van variantierang (RANKOVA) aangepast door basiswaarden om de regressie naar het gemiddelde te verminderen.