Studiedesign av Diacerein hos patienter med Covid-19

Studiedesign Detta är en randomiserad, placebokontrollerad, dubbelblind försökspilotstudie utformad för att verifiera om diacerein dämpar systemiskt inflammatoriskt svar hos inlagda patienter med covid-19. Denna studie har granskats och godkänts av etikkommittén vid State University of Campinas (CAAE: 50440921.6.0000.5404).

Studiepopulation Fyrtio patienter med en bekräftad diagnos av covid-19 kommer att inkluderas i studien. Patienterna kommer att identifieras som de som tas in på antingen Hospital Estadual Sumaré (Sumaré, Brasilien) och Unicamp Clinical Hospital (Campinas, Brasilien). Efter inskrivningen kommer patienter att randomiseras (n=20 per grupp) i ett 1:1-sätt för att få antingen diacerein 50 mg eller placebobehandling var 12:e timme i 10 dagar.

Rekrytering Alla patienter som tas in med covid-19 och som uppfyller kriterierna för inkludering och uteslutning kommer att bjudas in att delta i studien. Efter att ha läst och undertecknat formuläret för informerat samtycke kommer patienten att slumpmässigt fördelas i två behandlingsarmar.

Randomisering och blindning Efter inskrivning kommer patienter att randomiseras (n=20 per grupp) 1:1 för att få antingen diacerein 50 mg eller placebobehandling var 12:e timme i 10 dagar. Forskningsplattformen för elektronisk datainsamling (REDCap) kommer att användas som ett randomiseringssystem. Patienter, utredare och annan stödpersonal kommer att bli blinda för den experimentella behandlingen. Studieläkemedlet, diacerein (Artrodar®-kapslar 50 mg) och placebokapslar (laktos och magnesiumstearat), kommer att ha samma storlek och utseende för att bibehålla bländningen. Alla laboratorieanalyser kommer att utföras blinda för behandlingen. Identifiering av studieläkemedlet kommer endast att ske efter låsning av datamängden.

Försöksintervention Efter randomisering kommer patienter som tilldelats den aktiva behandlingen att få 1 kapsel diacerein (Artrodar®, 50 mg) oralt var 12:e timme i 10 dagar. Patienter som randomiserats till placebogruppen kommer att få 1 kapsel (laktos och magnesiumstearat) oralt var 12:e timme i 10 dagar. Det kommer att göras en dosjustering av studieläkemedlet (diacerein eller placebo) till 1 kapsel var 24:e timme (minskad diacerein till 50 mg var 24:e timme istället för var 12:e timme) hos deltagare som upplever akut njurskada med en uppskattad glomerulär filtrationshastighet <30 ml/min eller kräver njurersättningsterapi. Om njurersättningsterapi krävs, kommer studieläkemedlet att administreras omedelbart efter dialys.

Om patienten intuberas kommer diacerein- eller placebokapslarna att öppnas och deras innehåll placeras i tidigare rengjorda och korrekt identifierade nylonpåsar. Påsens innehåll kommer att lösas i 10 till 20 ml destillerat vatten i en 20 ml spruta vid tidpunkten för administrering av omvårdnad i närvaro av en forskare. Försöksinterventionen kommer inte att försena eller påverka patientens kliniska hantering i enlighet med lokala centrumpolicyer.

Laboratorieanalyser Vid intagningen tas det första blodprovet före den första dosen av studieläkemedlet (dag 0), och sedan tre och tio timmar efter läkemedelsadministreringen. Blodprover kommer också att tas på den andra (dag 2), femte (dag 5) och tionde (dag 10) behandlingsdagen. Med undantag för prover som erhållits vid intagningen kommer blodprov att tas efter 12 timmars fasta. Omedelbart efter insamling kommer alla prover att centrifugeras vid 3 500 rpm och frysas i flytande kväve för enstaka satsbearbetning. Inflammatoriska cytokiner (c-reaktivt protein, IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12p70, IFN-α2, IFN-β, IFN-γ, TNF-α, IP-10 GM-CSF ) kommer att mätas med multiplex immunoassay (Bio-Plex 200®, Bio-Rad) samt andra markörer såsom troponin-T och D-dimer mätningar.

Studiens ändpunkter Ändpunkterna är förändringen i serumnivåerna av cytokiner, troponin-T och D-dimer från dag 0 till dag 5 av sjukhusvistelsen, och från dag 0 till dag 10, samt området under kurvan med hänsyn till alla mätningar från Dag 0 till dag 10.

Sekundära effektmått inkluderar (i) tid till klinisk försämring definierad som tiden från randomisering till dödlighet eller försämring av Världshälsoorganisationens (WHO) Clinical Progression Scale, bedömd genom ökningen med två poäng i denna skala; (ii) kumulativ förekomst av biverkningar; (iii) kumulativ incidens av allvarliga biverkningar.

Diacereins biotillgänglighet Biotillgängligheten av diacerein och dess aktiva metabolit, rhein, kommer att utvärderas i serum från patienter som randomiserats till diacereinbehandling för att säkerställa biotillgängligheten hos patienter med covid-19. Det kommer att användas prover från dag 0 och tidpunkter: strax före, tre och tio timmar efter administreringen av studieläkemedlet. Alla patienter kommer att få dessa prover samlade för att bibehålla studieblindningen. Serumdiacerein- och rheinkoncentrationer kommer att bestämmas med vätskekromatografi-tandem masspektrometri i slutet av studien.

Beräkning av provstorlek Eftersom det inte finns några tillgängliga data om effekten av diacerein på det inflammatoriska svaret hos patienter med COVID-19 fastställdes provstorleken empiriskt för 40 försökspersoner i en konservativ förväntan om liten standardiserad effektstorlek (0,2). Därför beslutade vi att genomföra ett pilotprov med 40 patienter (n=20 per arm av studien) med resultat från systemisk inflammatorisk respons och säkerhet.

Säkerhetsanalyspopulationen tillämpas på alla randomiserade patienter som fick minst en dos diacerein. Säkerhetsbedömningen kommer att baseras på den kumulativa förekomsten av säkerhetsresultat, negativa händelser, fysiska undersökningar, vitala tecken och säkerhetslaboratorietester. Den primära säkerhetsändpunkten kommer att vara tiden mellan randomisering och den första händelsen.

Statistisk analys Kontinuerliga variabler kommer att representeras av medianen och det tillhörande interkvartilintervallet. Kategoriska variabler kommer att presenteras som absolut frekvens (n) och relativ frekvens (%). Sammanfattande statistiska data (medelvärde, standardavvikelse, median, minimum och maximum) kommer att tillhandahållas av behandlingsgruppen för demografiska egenskaper och baslinjeegenskaper med hjälp av ett chi-kvadrattest (t.ex. kategoriska variabler) och en envägsvariansanalys (ANOVA) modell med behandling som faktor (t.ex. kontinuerliga variabler). Dessutom kommer demografi och baslinjeegenskaper att jämföras mellan behandlingsgrupper för intention to treat-populationen (ITT). Betydelsen av detta test kommer att användas som en första bedömning för tillfredsställelse av randomisering.

Koncentrationer av plasmapro-inflammatoriska cytokiner kommer att betraktas som effektmått. Grupperna kommer att jämföras med förändringarna i antagning (dag 0) mot bedömningsdagar (dag 2, dag 5 och dag 10). Jämför också mellan områdena under kurvan för var och en av parametrarna från dag 0 till dag 10. Kontinuerliga variabler med normal och icke-parametrisk fördelning kommer att jämföras genom analys av kovarians (ANCOVA) eller genom analys av variansrang (RANKOVA) justerad med baslinjevärden för att mildra regressionen mot medelvärdet.