Nestebiopsia ja haimasyöpä: AXL(+) CTC:iden havaitseminen (CTC-AXL-PANC) (CTC-AXL-PANC)

Kiinteissä syövissä primaarisen kasvaimen muodostumisen ja kasvun jälkeen jotkut aggressiivisemmat kasvainsolut irtautuvat siitä aktiivisesti ja kulkevat sitten verenkierron läpi päästäkseen kaukaisiin elimiin (luuydin - maksa - keuhkot - aivot…) ja muodostavat uusia pesäkkeitä tai mikrometastaasseja. Nämä kiertävät kasvainsolut (CTC:t), joista on tullut disseminoituneita kasvainsoluja (DTC), kukoistavat uusissa ympäristöissään ja voivat pysyä lepotilassa useita vuosia primaarisen kasvaimen täydellisen resektion jälkeen. Johtuen tapahtumista, joita ei ole täysin selvitetty, DTC:t voivat kehittyä paikan päällä aiheuttaen makroskooppisia etäpesäkkeitä, mutta myös liittyä jälleen kiertävään osastoon CTC:iden muodossa, parvella, kolonisoida muita elimiä ja aiheuttaa sekundaarisia etäpesäkkeitä.

CTC:iden havaitseminen verestä on erittäin tärkeää kasvaimen etenemisen arvioinnissa, mutta myös lupaavaa syöpäsairauden ennusteen ja terapeuttisen seurannan kannalta. Tämä uusi lähestymistapa, joka julkaistiin ensimmäisen kerran vuonna 2010 nimellä nestebiopsia, määritellään ei-invasiiviseksi verikokeeksi, joka on erittäin herkkä, saavutettavissa reaaliajassa ja joka mahdollistaa CTC-analyysin.

Tällä hetkellä kohdennettujen hoitojen valinta tietylle potilaalle tehdään sen jälkeen, kun primaarinen kasvain on analysoitu spesifisten molekyylikohteiden ilmentymisen ja/tai genomisen tilan suhteen.

Monet tutkimukset osoittavat, että metastaattisilla soluilla on fenotyyppiset ja genotyyppiset ominaisuudet, jotka eroavat useimpien primaaristen kasvainten ominaisuuksista. Tämä voidaan selittää joko sillä, että metastaattiset solut hankkivat uusia genomisia taitoja ajan myötä, tai sillä, että primaarisessa kasvaimessa on jo olemassa metastaattisten subkloonien alajoukko, mutta se on välttynyt havaitsemiselta tavallisilla kudosbiopsiatekniikoilla.

Suora CTC-analyysi voisi tarjota tärkeää lisätietoa potilaiden estämiseksi sopimattomilta, kalliilta hoidoilta ja haitallisilta sivuvaikutuksilta.

Useiden vuosien ajan AXL-proteiini, tyrosiinikinaasireseptori, on noussut uudeksi strategiseksi kohteeksi onkologiassa. AXL:n yli-ilmentymistä on usein havaittu potilailla, joilla on haiman adenokarsinooma. AXL kuuluu Tyro3-Axl-Mer-perheeseen, kuten sen ligandiproteiini Gas-6 (kasvupysähdysspesifinen). Gas6/AXL-signalointireitin aktivaatio johtaa useiden efektorireittien, kuten RAS/RAF/MEK/ERK tai PI3K/AKT, aktivoitumiseen ja liittyy muun muassa kasvainsolujen kasvuun ja eloonjäämiseen, metastaattisten muodostumiseen ja leviämiseen, Epiteeli-mesenkymaalinen siirtymä (EMT) tai lääkeresistenssi. Kliinisesti on osoitettu, että AXL-proteiini on huonon ennusteen tekijä ja vastustuskyky vertailuhoidoille (sädehoito, kemoterapia tai kohdennettu hoito). Siten on ehdotettu ja kehitetty monia terapeuttisia strategioita AXL-reitin inhiboimiseksi kemiallisista molekyyleistä, jotka estävät sen kinaasiaktiivisuuden ja siten taustalla olevat signalointireitit, nukleotidiaptameereihin, AXL-fuusioproteiineihin ja monoklonaalisiin vasta-aineisiin.

Haiman adenokarsinooma, neljänneksi yleisin syöpäkuolemien määrä, on edelleen erittäin huonon ennusteen omaavien syöpien joukossa ja on siten suuri terapeuttinen haaste. Kokonaiseloonjäämisajan mediaani on 11,1 kuukautta optimaalisen hoidon (FOLFIRINOX) jälkeen. AXL:n kliininen merkitys ja onkogeeninen potentiaali erityyppisten kasvainten etenemisessä on suurelta osin todistettu. Itse asiassa 50-75 %:lla haiman adenokarsinoomanäytteistä on AXL:n yli-ilmentymistä, ja AXL:n ilmentymistaso korreloi kasvaimen aggressiivisuutta ja huonoa ennustetta osoittavien kliinisten parametrien kanssa, kuten kaukaisten etäpesäkkeiden esiintymistiheys tai eloonjääminen.

Tässä yhteydessä LCCRH-laboratorio, joka on erikoistunut CTC:iden havaitsemiseen ja analysointiin 20 vuoden ajan, on kehittänyt CTC-AXL-tunnistustestin käyttämällä CellSearch®-järjestelmää. CellSearch®-järjestelmä on ainoa Food and Drug Administrationin (FDA) hyväksymä menetelmä CTC:n havaitsemiseen paksusuolen-, rinta- ja metastaattisissa eturauhassyövissä. Lisäksi LCCRH:lla on patentti toiselle elävien ja toimivien CTC:iden havaitsemiseen ja karakterisointiin tarkoitetulle teknologialle, nimeltään EPIDROP. AXL-tutkimuksen toteutus on jo tehty AXL-leimaukselle CTC:issä EPIDROPissa sekä AXL-katkaisun visualisoinnissa elävällä CTC:llä.

Tämän ainutlaatuisen CTC:n toiminnallisen testin ansiosta on helppo kuvitella tarjoavansa onkologista "onkogrammia" testaamalla reaaliajassa lääkkeiden tehokkuutta CTC:issä ja potilaille räätälöityä lääkettä.

Tämä reaaliaikainen nestebiopsiaehdotus toiminnallisista CTC:istä on melko innovatiivinen onkologiassa.

Toistaiseksi ei ole tehty tutkimuksia AXL:ään liittyvien toiminnallisten CTC:iden tutkimuksesta.

Ensisijainen tavoite:

- Arvioi CTC-AXL-mittauksen (mukaan lukien) yhteensopivuus innovatiivisella EPIDROP-tekniikalla ja CellSearch-tekniikalla®

Toissijaiset tavoitteet:

• Arvioi CTC-AXL-mittauksen tarkkuus (mukaan lukien) EPIDROPin ja CellSearchin® välillä
• Arvioi EPIDROP:n ja CellSearchin® CTC-AXL-mittauksen (mukaan lukien) yhteensopivuusaste
• Arvioi metastaattista haimasyöpää sairastavien potilaiden kokonaiseloonjääminen AXL-markkerin sisältävien kiertävien kasvainsolujen lukumäärän perusteella mitattuna EPIDROP- tai CellSearch®-menetelmällä sisällyttämisen yhteydessä
• Arvioi metastaattista haimasyöpää sairastavien potilaiden etenemisvapaa eloonjääminen AXL-markkerin sisältävien verenkierrossa olevien kasvainsolujen lukumäärän perusteella mitattuna EPIDROP- tai CellSearch®-menetelmällä sisällyttämishetkellä
• Viljely CTC:t verinäytteestä (EDTA 10 ml)

• Yhden nestemäisen biopsiabiopankin luominen haimasyövälle, joka sisältää vain plasman varastoinnin

  • Tutki PD-L1:n ilmentymistä (inkluusiossa) ja havaitse PD-L1:tä ilmentävä CTC-alaryhmä käyttämällä EPIDROP- ja CellSearch®-tekniikoita;
  • Tutki kiertävää immuunijärjestelmää tässä metastaattista haimasyöpää sairastavien potilaiden ryhmässä suorittamalla immunologinen analyysi veren mononukleaarisista soluista;
  • Selvitä, onko merkittävää korrelaatiota CTC:n ja CTC-PD-L1:n havaitsemisen ja kiertävän immuunijärjestelmän (T-solut, NK-solut, B-solut, makrofagit, immuunitarkastuspisteet, verihiutaleet) välillä;
  • Arvioida CTC:n, CTC-PD-L1:n ja immuunisolujen välistä korrelaatiota ja näiden metastaattista haimasyöpää sairastavien potilaiden kliinisiä tuloksia (etenemisvapaa eloonjääminen, kokonaiseloonjääminen).