Biopsie liquide et cancer du pancréas : détection des CTC AXL(+) (CTC-AXL-PANC) (CTC-AXL-PANC)

Dans les cancers solides, après la formation et la croissance de la tumeur primitive, certaines cellules tumorales plus agressives s'en détachent activement puis traversent le compartiment circulant pour atteindre des organes distants (moelle osseuse - foie - poumon - cerveau…) et constituent de nouveaux foyers ou micro-métastases. Ces cellules tumorales circulantes (CTC) devenues des cellules tumorales disséminées (DTC) s'épanouissent dans leur nouvel environnement et peuvent rester dormantes de nombreuses années après la résection complète de la tumeur primitive. Du fait d'événements non totalement élucidés, les DTC peuvent se développer sur place en donnant lieu à des métastases macroscopiques mais aussi rejoindre le compartiment circulant sous forme de CTC, pulluler, coloniser d'autres organes et provoquer des métastases secondaires.

La détection des CTC dans le sang est très pertinente pour évaluer la progression tumorale mais également prometteuse en termes de pronostic des maladies cancéreuses et de suivi thérapeutique. Cette nouvelle approche, publiée pour la première fois en 2010 sous le terme de biopsie liquide, se définit donc comme un test sanguin non invasif, extrêmement sensible, réalisable en temps réel et qui permet l'analyse des CTC.

Actuellement, le choix des thérapies ciblées pour un patient donné se fait après analyse de la tumeur primaire pour l'expression et/ou le statut génomique de cibles moléculaires spécifiques.

De nombreuses études montrent que les cellules métastatiques ont des caractéristiques phénotypiques et génotypiques distinctes de celles de la plupart des tumeurs primitives. Cela peut s'expliquer soit parce que les cellules métastatiques acquièrent de nouvelles compétences génomiques au fil du temps, soit parce qu'un sous-ensemble de sous-clones métastatiques préexiste dans la tumeur primaire mais a échappé à la détection par les techniques de biopsie tissulaire standard.

Une analyse directe des CTC pourrait fournir des informations supplémentaires importantes pour éviter aux patients des traitements inappropriés, coûteux et des effets secondaires nocifs.

Depuis plusieurs années, la protéine AXL, récepteur de la tyrosine kinase, s'est imposée comme une nouvelle cible stratégique en oncologie. La surexpression d'AXL a été fréquemment identifiée chez les patients atteints d'adénocarcinome pancréatique. AXL fait partie de la famille Tyro3-Axl-Mer, comme sa protéine ligand Gas-6 (spécifique à l'arrêt de la croissance). Une activation de la voie de signalisation Gas6/AXL entraîne l'activation de plusieurs voies effectrices telles que RAS/RAF/MEK/ERK ou PI3K/AKT et est associée, entre autres, à la croissance et à la survie des cellules tumorales, à la formation et à la dissémination de métastases, Transition épithéliale-mésenchymateuse (EMT) ou résistances aux médicaments. Il a été démontré cliniquement que la protéine AXL est un facteur de mauvais pronostic et de résistance aux traitements de référence (radiothérapie, chimiothérapie ou thérapie ciblée). Ainsi, de nombreuses stratégies thérapeutiques ont été proposées et développées pour inhiber la voie AXL, allant des molécules chimiques, bloquant son activité kinase et donc les voies de signalisation sous-jacentes, aux aptamères nucléotidiques, aux protéines de fusion AXL, et aux anticorps monoclonaux.

L'adénocarcinome pancréatique, 4ème décès lié au cancer, reste parmi les cancers de très mauvais pronostic et représente ainsi un enjeu thérapeutique majeur. La médiane de survie globale est de 11,1 mois après traitement optimal (FOLFIRINOX). La pertinence clinique et le potentiel oncogène de l'AXL dans la progression de différents types de tumeurs ont été largement démontrés. En effet, 50 à 75 % des échantillons d'adénocarcinome pancréatique présentent une surexpression d'AXL et le niveau d'expression d'AXL est corrélé à des paramètres cliniques indiquant l'agressivité tumorale et un mauvais pronostic tels que la fréquence des métastases à distance ou la survie.

Dans ce cadre, le laboratoire LCCRH, spécialisé depuis 20 ans dans la détection et l'analyse des CTC, a développé un test de détection des CTC-AXL utilisant le système CellSearch®. Le système CellSearch® est la seule méthode approuvée par la Food and Drug Administration (FDA) pour la détection des CTC dans les cancers colorectaux, du sein et métastatiques de la prostate. Par ailleurs, le LCCRH détient un brevet pour une autre technologie de détection et de caractérisation des CTC vivants et fonctionnels, appelée EPIDROP. La mise en place de la recherche AXL est déjà faite pour le marquage AXL sur les CTC dans EPIDROP ainsi que la visualisation du clivage AXL par CTC live.

Grâce à ce test fonctionnel unique des CTC, il est facile d'imaginer proposer un « oncogramme » oncologique en testant en temps réel l'efficacité des médicaments sur les CTC et la médecine personnalisée aux patients.

Cette proposition de biopsie liquide en temps réel sur des CTC fonctionnels est assez innovante en oncologie.

A ce jour, il n'existe pas d'études portant sur l'étude des CTC fonctionnels liés à l'AXL.

Objectif principal:

- Evaluer la concordance de la mesure CTC-AXL (inclusive) par la technique innovante EPIDROP et la technique CellSearch®

Objectifs secondaires :

• Évaluer la précision de la mesure CTC-AXL (inclus) entre EPIDROP et CellSearch®
• Évaluer le degré de concordance entre la mesure CTC-AXL (inclusive) par EPIDROP et CellSearch®
• Évaluer la survie globale des patients atteints d'un cancer du pancréas métastatique en fonction du nombre de cellules tumorales circulantes portant le marqueur AXL mesuré par EPIDROP ou CellSearch® à l'inclusion
• Évaluer la survie sans progression des patients atteints d'un cancer du pancréas métastatique en fonction du nombre de cellules tumorales circulantes portant le marqueur AXL mesuré par EPIDROP ou CellSearch® à l'inclusion
• CTC de culture à partir de l'échantillon de sang (EDTA 10mL)

• Création d'une biobanque unique de biopsie liquide pour le cancer du pancréas impliquant uniquement le stockage de plasma

  • Étudier l'expression de PD-L1 (à l'inclusion) et détecter le sous-groupe CTC exprimant PD-L1 à l'aide des techniques EPIDROP et CellSearch® ;
  • Étudier le système immunitaire circulant dans cette cohorte de patients atteints d'un cancer du pancréas métastatique en effectuant des analyses immunologiques sur les cellules mononucléaires sanguines ;
  • Déterminer s'il existe une corrélation significative entre la détection de CTC et de CTC-PD-L1 et le système immunitaire circulant (cellules T, cellules NK, cellules B, macrophages, points de contrôle immunitaires, plaquettes) ;
  • Évaluer la corrélation entre CTC, CTC-PD-L1 et les cellules immunitaires et les résultats cliniques (survie sans progression, survie globale) de ces patients atteints d'un cancer du pancréas métastatique.