Flydende biopsi og bugspytkirtelkræft: Påvisning af AXL(+) CTC'er (CTC-AXL-PANC) (CTC-AXL-PANC)

I faste kræftformer, efter dannelsen og væksten af ​​den primære tumor, løsner nogle mere aggressive tumorceller sig aktivt fra den og rejser derefter gennem det cirkulerende rum for at nå fjerne organer (knoglemarv - lever - lunge - hjerne...) og udgør nye foci eller mikro-metastaser. Disse cirkulerende tumorceller (CTC'er), der er blevet til disseminerede tumorceller (DTC'er), blomstrer i deres nye miljøer og kan forblive i dvale i mange år efter fuldstændig resektion af den primære tumor. På grund af begivenheder, der ikke er fuldt belyst, kan DTC'er udvikle sig på stedet, hvilket giver anledning til makroskopiske metastaser, men også slutte sig til det cirkulerende rum i form af CTC'er, sværme, kolonisere andre organer og forårsage sekundære metastaser.

Påvisning af CTC'er i blodet er meget relevant for vurdering af tumorprogression, men også lovende med hensyn til kræftsygdomsprognose og terapeutisk opfølgning. Denne nye tilgang, der blev offentliggjort for første gang i 2010 under betegnelsen flydende biopsi, er derfor defineret som en ikke-invasiv blodprøve, ekstremt følsom, opnåelig i realtid, og som tillader analyse af CTC'er.

I øjeblikket foretages valget af målrettede terapier for en given patient efter at have analyseret den primære tumor for ekspression og/eller genomisk status af specifikke molekylære mål.

Mange undersøgelser viser, at metastatiske celler har fænotypiske og genotypiske karakteristika, der adskiller sig fra dem fra det meste af den primære tumor. Dette kan forklares enten fordi metastatiske celler erhverver nye genomiske færdigheder over tid, eller fordi en undergruppe af metastatisk sub-klon allerede eksisterer i den primære tumor, men er undsluppet påvisning med standard vævsbiopsiteknikker.

En direkte analyse af CTC'er kunne give vigtig yderligere information for at forhindre patienter i uhensigtsmæssige, dyre behandlinger og skadelige bivirkninger.

I flere år har AXL-proteinet, en tyrosinkinase-receptor, dukket op som et nyt strategisk mål inden for onkologi. Overekspression af AXL er hyppigt blevet identificeret hos patienter med pancreas adenocarcinom. AXL er medlem af Tyro3-Axl-Mer-familien, ligesom dets ligandprotein Gas-6 (specifik for vækststop). En aktivering af Gas6/AXL signalvejen resulterer i aktivering af flere effektorveje såsom RAS/RAF/MEK/ERK eller PI3K/AKT og er blandt andet forbundet med tumorcellevækst og overlevelse, metastatisk dannelse og disseminering, Epitel-til-mesenkymal overgang (EMT) eller lægemiddelresistens. Det er klinisk vist, at AXL-proteinet er en faktor for dårlig prognose og resistens over for referencebehandlinger (strålebehandling, kemoterapi eller målrettet terapi). Mange terapeutiske strategier er således blevet foreslået og udviklet til at hæmme AXL-vejen, lige fra kemiske molekyler, blokering af dens kinaseaktivitet og derfor de underliggende signalveje, til nukleotidaptamerer, AXL-fusionsproteiner og monoklonale antistoffer.

Adenocarcinom i bugspytkirtlen, den fjerde førende blandt kræftrelaterede dødsfald, forbliver blandt kræftformer med meget dårlig prognose og repræsenterer således en stor terapeutisk udfordring. Den gennemsnitlige samlede overlevelse er 11,1 måneder efter optimal behandling (FOLFIRINOX). Den kliniske relevans og onkogene potentiale af AXL i udviklingen af ​​forskellige typer tumorer er i vid udstrækning blevet påvist. Faktisk har 50% til 75% af pancreas-adenokarcinomprøver overekspression af AXL, og niveauet af ekspression af AXL er korreleret med kliniske parametre, der indikerer tumoraggressivitet og dårlig prognose, såsom hyppigheden af ​​fjernmetastaser eller overlevelse.

I denne sammenhæng har LCCRH-laboratoriet, som har specialiseret sig i påvisning og analyse af CTC'er i 20 år, udviklet en CTC-AXL-detektionstest ved hjælp af CellSearch®-systemet. CellSearch®-systemet er den eneste metode, der er godkendt af Food and Drug Administration (FDA) til påvisning af CTC i kolorektal-, bryst- og metastaserende prostatacancer. Derudover har LCCRH patent på en anden teknologi til påvisning og karakterisering af levende og funktionelle CTC'er, kaldet EPIDROP. Implementeringen af ​​AXL-forskningen er allerede udført for AXL-mærkning på CTC'er i EPIDROP samt visualisering af AXL-spaltning af levende CTC.

Takket være denne unikke funktionelle test af CTC'er er det let at forestille sig at tilbyde et onkologisk 'onkogram' ved i realtid at teste effektiviteten af ​​lægemidler på CTC'er og personlig medicin til patienter.

Dette forslag til flydende biopsi i realtid om funktionelle CTC'er er ret innovativt inden for onkologi.

Til dato er der ingen undersøgelser af undersøgelsen af ​​funktionelle CTC'er relateret til AXL.

Primært mål:

- Evaluer overensstemmelsen af ​​CTC-AXL-målingen (inklusive) ved den innovative EPIDROP-teknik og CellSearch-teknikken®

Sekundære mål:

• Evaluer nøjagtigheden af ​​CTC-AXL-målingen (inklusive) mellem EPIDROP og CellSearch®
• Vurder graden af ​​overensstemmelse mellem CTC-AXL-måling (inklusive) af EPIDROP og CellSearch®
• Evaluer den samlede overlevelse af patienter med metastatisk bugspytkirtelcancer baseret på antallet af cirkulerende tumorceller, der bærer AXL-markøren målt med EPIDROP eller CellSearch® ved inklusion
• Evaluer den progressionsfrie overlevelse af patienter med metastatisk bugspytkirtelkræft baseret på antallet af cirkulerende tumorceller, der bærer AXL-markøren målt med EPIDROP eller CellSearch® ved inklusion
• Dyrk CTC'er fra blodprøven (EDTA 10mL)

• Oprettelse af en enkelt flydende biopsibiobank for bugspytkirtelkræft, der kun involverer plasmalagring

  • Undersøg ekspressionen af ​​PD-L1 (ved inklusion) og påvis CTC-undergruppen, der udtrykker PD-L1 ved hjælp af EPIDROP- og CellSearch®-teknikker;
  • Undersøg det cirkulerende immunsystem i denne kohorte af patienter med metastatisk bugspytkirtelkræft ved at udføre immunologisk analyse på mononukleære blodceller;
  • Bestem, om der er en signifikant sammenhæng mellem påvisningen af ​​CTC og CTC-PD-L1 og det cirkulerende immunsystem (T-celler, NK-celler, B-celler, makrofager, immunkontrolpunkter, blodplader);
  • At vurdere sammenhængen mellem CTC, CTC-PD-L1 og immunceller og de kliniske resultater (progressionsfri overlevelse, samlet overlevelse) for disse patienter med metastatisk bugspytkirtelcancer.