Biopsia liquida e cancro al pancreas: rilevamento di CTC AXL(+) (CTC-AXL-PANC) (CTC-AXL-PANC)

Nei tumori solidi, dopo la formazione e la crescita del tumore primario, alcune cellule tumorali più aggressive si staccano attivamente da esso e poi viaggiano attraverso il compartimento circolante per raggiungere organi distanti (midollo osseo - fegato - polmone - cervello...) e costituire nuovi focolai o micro-metastasi. Queste cellule tumorali circolanti (CTC) che sono diventate cellule tumorali disseminate (DTC) fioriscono nei loro nuovi ambienti e possono rimanere dormienti per molti anni dopo la completa resezione del tumore primario. A causa di eventi non completamente chiariti, i DTC possono svilupparsi in loco dando origine a metastasi macroscopiche ma anche ricongiungersi al compartimento circolante sotto forma di CTC, sciamare, colonizzare altri organi e causare metastasi secondarie.

Il rilevamento delle CTC nel sangue è molto importante per valutare la progressione del tumore, ma è anche promettente in termini di prognosi della malattia tumorale e follow-up terapeutico. Questo nuovo approccio, pubblicato per la prima volta nel 2010 con il termine biopsia liquida, viene quindi definito come un esame del sangue non invasivo, estremamente sensibile, realizzabile in tempo reale e che consente l'analisi delle CTC.

Attualmente, la scelta delle terapie mirate per un dato paziente viene effettuata dopo aver analizzato il tumore primario per l'espressione e/o lo stato genomico di specifici bersagli molecolari.

Molti studi dimostrano che le cellule metastatiche hanno caratteristiche fenotipiche e genotipiche distinte da quelle della maggior parte del tumore primitivo. Ciò può essere spiegato sia perché le cellule metastatiche acquisiscono nuove capacità genomiche nel tempo, sia perché un sottogruppo di sub-clone metastatico preesiste all'interno del tumore primario ma è sfuggito al rilevamento mediante tecniche di biopsia tissutale standard.

Un'analisi diretta delle CTC potrebbe fornire importanti informazioni aggiuntive per prevenire trattamenti inappropriati e costosi ed effetti collaterali dannosi per i pazienti.

Da diversi anni la proteina AXL, un recettore tirosin-chinasico, è emersa come un nuovo obiettivo strategico in oncologia. La sovraespressione di AXL è stata frequentemente identificata in pazienti con adenocarcinoma pancreatico. AXL è un membro della famiglia Tyro3-Axl-Mer, come la sua proteina ligando Gas-6 (specifica per l'arresto della crescita). Un'attivazione della via di segnalazione Gas6/AXL provoca l'attivazione di diverse vie effettrici come RAS/RAF/MEK/ERK o PI3K/AKT ed è associata, tra le altre cose, alla crescita e alla sopravvivenza delle cellule tumorali, alla formazione metastatica e alla disseminazione, Transizione epiteliale-mesenchimale (EMT) o resistenza ai farmaci. È stato dimostrato clinicamente che la proteina AXL è un fattore di prognosi sfavorevole e di resistenza ai trattamenti di riferimento (radioterapia, chemioterapia o terapia mirata). Pertanto, sono state proposte e sviluppate molte strategie terapeutiche per inibire la via AXL, che vanno dalle molecole chimiche, bloccando la sua attività chinasica e quindi le vie di segnalazione sottostanti, agli aptameri nucleotidici, alle proteine ​​di fusione AXL e agli anticorpi monoclonali.

L'adenocarcinoma pancreatico, il 4° principale dei decessi correlati al cancro, rimane tra i tumori a prognosi molto sfavorevole e rappresenta quindi una grande sfida terapeutica. La sopravvivenza globale mediana è di 11,1 mesi dopo il trattamento ottimale (FOLFIRINOX). La rilevanza clinica e il potenziale oncogenico dell'AXL nella progressione di diversi tipi di tumori sono stati ampiamente evidenziati. Infatti, dal 50% al 75% dei campioni di adenocarcinoma pancreatico presenta sovraespressione di AXL e il livello di espressione di AXL è correlato con parametri clinici che indicano aggressività del tumore e prognosi infausta come la frequenza di metastasi a distanza o la sopravvivenza.

In questo contesto, il laboratorio LCCRH, specializzato da 20 anni nel rilevamento e nell'analisi delle CTC, ha sviluppato un test di rilevamento CTC-AXL utilizzando il sistema CellSearch®. Il sistema CellSearch® è l'unico metodo approvato dalla Food and Drug Administration (FDA) per il rilevamento di CTC nei tumori del colon-retto, della mammella e della prostata metastatica. Inoltre, il LCCRH detiene un brevetto per un'altra tecnologia per il rilevamento e la caratterizzazione di CTC vivi e funzionali, denominata EPIDROP. L'implementazione della ricerca AXL è già stata effettuata per l'etichettatura AXL sui CTC in EPIDROP, nonché la visualizzazione della scissione AXL mediante CTC live.

Grazie a questo test funzionale unico delle CTC, è facile immaginare di offrire un 'oncogramma' oncologico testando in tempo reale l'efficacia dei farmaci sulle CTC e la medicina personalizzata ai pazienti.

Questa proposta di biopsia liquida in tempo reale su CTC funzionali è piuttosto innovativa in Oncologia.

Ad oggi, non ci sono studi sullo studio delle CTC funzionali correlate all'AXL.

Obiettivo primario:

- Valutare la concordanza della misurazione CTC-AXL (inclusa) mediante l'innovativa tecnica EPIDROP e la tecnica CellSearch®

Obiettivi secondari:

• Valutare l'accuratezza della misurazione CTC-AXL (inclusa) tra EPIDROP e CellSearch®
• Valutare il grado di concordanza tra la misurazione CTC-AXL (inclusa) di EPIDROP e CellSearch®
• Valutare la sopravvivenza globale dei pazienti con carcinoma pancreatico metastatico in base al numero di cellule tumorali circolanti che trasportano il marcatore AXL misurato da EPIDROP o CellSearch® all'inclusione
• Valutare la sopravvivenza libera da progressione dei pazienti con carcinoma pancreatico metastatico in base al numero di cellule tumorali circolanti che trasportano il marcatore AXL misurato da EPIDROP o CellSearch® all'inclusione
• Coltura CTC dal campione di sangue (EDTA 10 ml)

• Creazione di un'unica biobanca di biopsia liquida per il cancro del pancreas che prevede solo la conservazione del plasma

  • Studiare l'espressione di PD-L1 (all'inclusione) e rilevare il sottogruppo CTC che esprime PD-L1 utilizzando le tecniche EPIDROP e CellSearch®;
  • Studiare il sistema immunitario circolante in questa coorte di pazienti con carcinoma pancreatico metastatico eseguendo analisi immunologiche sulle cellule mononucleate del sangue;
  • Determinare se esiste una correlazione significativa tra il rilevamento di CTC e CTC-PD-L1 e il sistema immunitario circolante (cellule T, cellule NK, cellule B, macrofagi, checkpoint immunitari, piastrine);
  • Per valutare la correlazione tra CTC, CTC-PD-L1 e cellule immunitarie e gli esiti clinici (sopravvivenza libera da progressione, sopravvivenza globale) di questi pazienti con carcinoma pancreatico metastatico.