Biópsia Líquida e Câncer de Pâncreas: Detecção de AXL(+) CTCs (CTC-AXL-PANC) (CTC-AXL-PANC)

Nos cancros sólidos, após a formação e crescimento do tumor primário, algumas células tumorais mais agressivas desprendem-se ativamente dele e depois percorrem o compartimento circulante para atingir órgãos distantes (medula óssea - fígado - pulmão - cérebro…) e constituem novos focos ou micro-metástases. Essas células tumorais circulantes (CTCs) que se tornaram células tumorais disseminadas (DTCs) florescem em seus novos ambientes e podem permanecer dormentes por muitos anos após a ressecção completa do tumor primário. Devido a eventos não totalmente elucidados, os CDTs podem se desenvolver no local dando origem a metástases macroscópicas, mas também se juntar novamente ao compartimento circulante na forma de CTCs, enxamear, colonizar outros órgãos e causar metástases secundárias.

A detecção de CTCs no sangue é muito relevante para avaliar a progressão do tumor, mas também promissora em termos de prognóstico da doença oncológica e acompanhamento terapêutico. Esta nova abordagem, publicada pela primeira vez em 2010 sob o termo biopsia líquida, é assim definida como uma análise ao sangue não invasiva, extremamente sensível, realizável em tempo real e que permite a análise de CTCs.

Atualmente, a escolha de terapias direcionadas para um determinado paciente é feita após a análise do tumor primário quanto à expressão e/ou estado genômico de alvos moleculares específicos.

Muitos estudos mostram que as células metastáticas têm características fenotípicas e genotípicas distintas da maioria dos tumores primários. Isso pode ser explicado porque as células metastáticas adquirem novas habilidades genômicas ao longo do tempo ou porque um subconjunto de subclones metastáticos pré-existe no tumor primário, mas escapou da detecção por técnicas padrão de biópsia de tecido.

Uma análise direta das CTCs pode fornecer informações adicionais importantes para prevenir os pacientes de tratamentos inapropriados e caros e efeitos colaterais prejudiciais.

Por vários anos, a proteína AXL, um receptor de tirosina quinase, surgiu como um novo alvo estratégico em oncologia. A superexpressão de AXL tem sido frequentemente identificada em pacientes com adenocarcinoma pancreático. AXL é um membro da família Tyro3-Axl-Mer, assim como sua proteína ligante Gas-6 (específica para parada do crescimento). Uma ativação da via de sinalização Gas6/AXL resulta na ativação de várias vias efetoras como RAS/RAF/MEK/ERK ou PI3K/AKT e está associada, entre outras coisas, ao crescimento e sobrevivência de células tumorais, formação e disseminação metastática, Transição epitelial para mesenquimal (EMT) ou resistência a drogas. Foi demonstrado clinicamente que a proteína AXL é um fator de mau prognóstico e resistência aos tratamentos de referência (radioterapia, quimioterapia ou terapia direcionada). Assim, muitas estratégias terapêuticas foram propostas e desenvolvidas para inibir a via AXL, variando de moléculas químicas, bloqueando sua atividade quinase e, portanto, as vias de sinalização subjacentes, a aptâmeros de nucleotídeos, proteínas de fusão AXL e anticorpos monoclonais.

O adenocarcinoma pancreático, o quarto principal de mortes relacionadas ao câncer, permanece entre os cânceres de prognóstico muito ruim e, portanto, representa um grande desafio terapêutico. A sobrevida global média é de 11,1 meses após o tratamento ideal (FOLFIRINOX). A relevância clínica e o potencial oncogênico do AXL na progressão de diferentes tipos de tumores têm sido amplamente evidenciados. De fato, 50% a 75% das amostras de adenocarcinoma pancreático têm superexpressão de AXL e o nível de expressão de AXL está correlacionado com parâmetros clínicos que indicam agressividade do tumor e mau prognóstico, como frequência de metástases à distância ou sobrevida.

Nesse contexto, o laboratório LCCRH, especializado na detecção e análise de CTCs há 20 anos, desenvolveu um teste de detecção de CTC-AXL utilizando o sistema CellSearch®. O sistema CellSearch® é o único método aprovado pela Food and Drug Administration (FDA) para a detecção de CTC em câncer colorretal, de mama e de próstata metastático. Além disso, o LCCRH detém a patente de outra tecnologia para detecção e caracterização de CTCs vivas e funcionais, denominada EPIDROP. A implementação da pesquisa AXL já é feita para rotulagem AXL em CTCs no EPIDROP, bem como a visualização da clivagem AXL por CTC ao vivo.

Graças a este teste funcional exclusivo de CTCs, é fácil imaginar a oferta de um 'oncograma' oncológico, testando em tempo real a eficácia de medicamentos em CTCs e medicamentos personalizados para pacientes.

Essa proposta de biópsia líquida em tempo real em CTCs funcionais é bastante inovadora em Oncologia.

Até o momento, não há estudos sobre o estudo das CTCs funcionais relacionadas ao AXL.

Objetivo primário:

- Avaliar a concordância da medição CTC-AXL (inclusive) pela técnica inovadora EPIDROP e a técnica CellSearch®

Objetivos secundários:

• Avalie a precisão da medição CTC-AXL (inclusive) entre EPIDROP e CellSearch®
• Avalie o grau de concordância entre a medição CTC-AXL (inclusive) por EPIDROP e CellSearch®
• Avaliar a sobrevida global de pacientes com câncer pancreático metastático com base no número de células tumorais circulantes portadoras do marcador AXL medido por EPIDROP ou CellSearch® na inclusão
• Avaliar a sobrevida livre de progressão de pacientes com câncer pancreático metastático com base no número de células tumorais circulantes que carregam o marcador AXL medido por EPIDROP ou CellSearch® na inclusão
• Cultura CTCs da amostra de sangue (EDTA 10mL)

• Criação de um único biobanco de biópsia líquida para câncer de pâncreas envolvendo apenas armazenamento de plasma

  • Estudar a expressão de PD-L1 (na inclusão) e detectar o subgrupo CTC expressando PD-L1 usando as técnicas EPIDROP e CellSearch®;
  • Estudar o sistema imunológico circulante nesta coorte de pacientes com câncer pancreático metastático, realizando análise imunológica em células mononucleares do sangue;
  • Determinar se existe uma correlação significativa entre a detecção de CTC e CTC-PD-L1 e o sistema imunológico circulante (células T, células NK, células B, macrófagos, pontos de controle imunológico, plaquetas);
  • Avaliar a correlação entre CTC, CTC-PD-L1 e células imunes e os resultados clínicos (sobrevida livre de progressão, sobrevida global) desses pacientes com câncer pancreático metastático.