Alfa-lipoiinihapon vaikutus matala-asteisten levyepiteelin sisäisten leesioiden (LSIL) regressioon

Kohdunkaulan intraepiteliaalinen neoplasia (CIN) on kohdunkaulan pahanlaatuinen muutos, joka voi johtaa pahanlaatuisiin muutoksiin, eli kohdunkaulan syöpään. Nykyään tämä termi on korvattu uudemmalla termillä squamous intraepithelial leesion (SIL). Kun termi SIL otettiin käyttöön (Bethesda-järjestelmän ehdotuksen mukaisesti), kohdunkaulan pahanlaatuisten muutosten luokittelussa käytetään kahta luokkaa: SIL of low grade (LSIL), joka sisältää kondyloomat ja lievän dysplasian (CIN I) ja korkean asteen squamous intraepiteliaalinen leesio (HSIL), joka sisältää muutoksia keski- ja korkea-asteen dysplasiassa (CIN II ja CIN III). Pääasiallinen etiologinen tekijä, joka johtaa kohdunkaulan neoplasian muodostumiseen, on ihmisen papilloomavirus (HPV). Myös muut etiologiset tekijät, kuten tupakointi, oraaliset ehkäisyvalmisteet, seksuaaliset tottumukset, kemikaalit, immuunivastetta heikentävä hoito, immuunipuutostaudit, sosioekonomiset elinolosuhteet ja potilaiden ravitsemustila, vaikuttavat taudin etenemiseen. Edellä mainittujen lisäksi myös tulehdus ja oksidatiivinen stressi ovat tärkeitä etiologisia tekijöitä SIL:n kehittymisessä. Nimittäin pahanlaatuiset muutokset kohdunkaulassa eivät esiinny täysin terveessä kohdunkaulassa, vaan liittyvät aina krooniseen kohdunkaulan tulehdukseen.

Alfa-lipoiinihappo (ALA) on ei-välttämätön rasvahappo, jolla on lukuisia metabolisia rooleja, ja sen terapeuttista potentiaalia tutkitaan monissa patofysiologisissa olosuhteissa. Sen lisäksi, että ALA toimii solussa useiden signalointireittien kofaktorina, ALA:lla on myös standardi redox-potentiaali -0,32 V, mikä antaa sille kyvyn regeneroida tärkeimmät fysiologiset antioksidantit in vivo (esim. C- ja E-vitamiini) ja tekee siitä yhden tehokkaimmista luonnollisista antioksidanteista. Koska se on osallisena useiden tulehduksellisten signaalireittien modulaattorina, sen anti-inflammatorisia ominaisuuksia on tutkittu useissa kliinisissä tutkimuksissa. T Tämä vaikuttava joukko solu- ja molekyylitoimintoja on johtanut merkittävään kiinnostukseen ALA:n tutkimukseen ja käyttöön ravintolisänä. ALA:n on todistettu parantavan insuliiniresistenssiä, lievittävän diabeettisen neuropatian oireita, yhdistettävän valohoitoon vitiligon hoidossa, parantavan haavojen paranemista ja lisäävän vähentävän ruokavalion tehokkuutta. Sen käyttöä ravintolisänä tutkitaan parhaillaan dementiassa, polttava suuoireyhtymässä, ranneoireyhtymässä, glaukoomassa, kaihissa, verenpainetaudissa ja ääreisvaltimotaudissa. Terapeuttisiin tarkoituksiin ALA:ta annetaan suun kautta annoksina 300-1800 mg/vrk, ja joidenkin indikaatioiden osalta sen paikallista ja parenteraalista antoa on tutkittu. Suun kautta antamisen turvallisuutta mainituilla annoksilla on tutkittu monissa kliinisissä tutkimuksissa, jotka kestivät 4 kuukaudesta 4 vuoteen. ALA:n tehokkuutta kohdunkaulan pahanlaatuisissa muutoksissa ei ole toistaiseksi tutkittu. Ottaen huomioon muiden antioksidanttien (kuten vihreän teen polyfenolien tai seleenin) oraalisen lisäyksen todistetun tehokkuuden LSIL-potilailla, tämän tutkimuksen tavoitteena on tutkia ensimmäistä kertaa ALA:n tehokkuutta LSIL:n regressiossa.

Tutkimus suunniteltiin kaksoissokkoutetuksi, satunnaistetuksi, lumekontrolloiduksi tutkimukseksi, jossa osallistujia pyydettiin antamaan itse joko 600 mg ALA:ta kahdessa kapselissa, jotka sisälsivät 300 mg ALA:ta (lahjoittaja Zada ​​Pharmaceuticals, Lukavac, Bosnia ja Hertsegovina). tai lumelääkettä (toimitetaan identtisinä riisitärkkelystä sisältävinä oraalikapseleina, myös Zada ​​Pharmaceuticalsin lahjoittama) per os päivittäin 3 kuukauden ajan. Tämän tutkimuksen tutkimusprotokollan ovat hyväksyneet Zagrebin yliopiston farmasian ja biokemian tiedekunnan eettinen komitea ja Tuzlan yliopistollisen kliinisen keskuksen eettinen komitea. Tutkimus suoritettiin kliinisiä tutkimuksia ja biologiseen monimuotoisuuteen liittyvien oikeuksien kansainvälisten, kansallisten ja institutionaalisten ohjeiden mukaisesti ja se noudatti CONSORT-ohjeistusta.

Ensimmäisessä tapaamisessa kelvolliset potilaat esiteltiin tutkimuksen suunnitteluun. Heille kerrottiin tutkimusprotokollasta: tutkimuksen päämäärä ja tarkoitus, yleinen metodologia, osallistujien odotetut roolit, mahdolliset tutkimukseen osallistumisen riskit, tutkimukseen osallistumisen mahdolliset edut, tietojen luottamuksellisuuskysymykset ja tutkijoita, jotka tarvittaessa antoivat kaikenlaista lisätietoa. Jos potilas suostui osallistumaan tutkimukseen, hän allekirjoitti tietoisen suostumuslomakkeen. Kaikkia osallistujia pyydettiin antamaan kirjallinen tietoinen suostumuksensa tutkimukseen osallistumiselle. Tutkimukseen osallistumisen jälkeen potilaat täyttivät peruskyselylomakkeen ja antoivat tietoja antropometrisista perusominaisuuksista, lisääntymishistoriasta, nykyisestä lääkityksestä ja tärkeimmistä elämäntapaominaisuuksista (tupakointi, fyysinen aktiivisuus). Potilaiden ruokailu- ja elintottumusten tarkastelu suoritettiin standardoidulla ja validoidulla puolikvantitatiivisella ruokatiheyskyselyllä (FFQ) koulutetun henkilökunnan avustuksella. Potilaita kehotettiin olemaan muuttamatta ruokavaliotaan tutkimuksen aikana.

Osallistujat satunnaistettiin suhteessa 1:1 ALA:lle: lumelääke. Potilaille jaettiin satunnaisesti potilasnumero, joka määritti heidän lisäravintonsa. He saivat kaksi pulloa kapseleita, joihin oli esimerkitty tutkimusnumero, jotka sisälsivät joko ALA-kapseleita, jotka riittävät 3 kuukauden lisäravinnoksi, tai identtisiä lumelääkekapseleita (riisitärkkelystä), jotka olivat riittävät 3 kuukauden lisäravinnoksi. Potilaita pyydettiin palauttamaan jäljellä olevat kapselit 3 kuukauden jakson jälkeen arvioidakseen hoitoon sitoutumista. Täydennysjakson aikana tutkimusryhmän jäsen otti osallistujiin kahdesti yhteyttä puhelimitse mahdollisten haittavaikutusten tarkistamiseksi ja hoitoon sitoutumisen parantamiseksi. Rekisteröitymisen jälkeinen vaatimustenmukaisuus mitattiin käyntien välillä otettujen pillereiden prosenttiosuutena. Koehenkilöt, jotka ottivat vähemmän kuin 75 % pillereistä satunnaistamisen jälkeen, katsottiin ei-yhteensopiviksi, ja heidät poistettiin tutkimuksesta. 3 kuukautta ilmoittautumisen jälkeen osallistujat kutsuttiin seurantatapaamiseen.

Sekä alku- että seurantakäynnillä suoritettiin sytologinen seulonta, kolposkopia ja kohdennettu biopsia ja sytologinen-kolposkopiadiagnoosin histologinen vahvistus ja verinäytteitä otettiin ja analysoitiin (tutkimuksen primaaristen ja toissijaisten tulosten arviointi). Näytteet kerättiin Tuzlan yliopistollisen kliinisen keskuksen gynekologian ja synnytysklinikalla 18 kuukauden aikana. Näyteanalyysit suoritettiin Tuzlan yliopiston kliinisessä keskuksessa ja Zagrebin yliopiston farmasian ja biokemian tiedekunnassa. Tutkimustulosten tilastollinen käsittely, analysointi ja tulkinta saatiin päätökseen 6 kuukauden kuluessa biologisten näytteiden analyysin päättymisestä.

Potilaiden henkilötiedot, tiedot elämäntavoista ja ruokailutottumuksista (saatu FFQ:sta) sekä mittaukset tutkimuksen primaari- ja toissijaisista tuloksista tallennettiin ja käsiteltiin sähköisessä muodossa potilasrekisteriin. Tietosanakirja, joka sisältää yksityiskohtaiset kuvaukset jokaisesta rekisterin käyttämästä muuttujasta, mukaan lukien muuttujan lähde, kehitettiin. Rekisteriä pidettiin Tuzlan yliopistollisen kliinisen keskuksen tavanomaisten toimintatapojen mukaisesti. Projektipäällikkö ja hänen työtoverinsa velvoitettiin noudattamaan täysimääräisesti henkilötietojen suojaa koskevia määräyksiä. Potilastiedot syötettiin projektitietokantoihin potilaiden etu- ja sukunimen alkukirjaimilla ja erityisellä koodilla. Vain projektipäällikkö ja hänen työtoverinsa tarkastivat heidän lääketieteelliset asiakirjansa, eikä potilaiden nimeä koskaan paljastettu kolmansille osapuolille. Potilaiden asiakirjat olivat saatavilla kliinistä tutkimusta suorittavan laitoksen eettisen komitean edustajille (Tuzlan yliopiston kliininen keskus) ja Zagrebin yliopiston farmasian ja biokemian tiedekunnan kokeellisen työn eettisen komitean edustajille. on vastuussa tämän tutkimuksen hyväksymisestä ja valvonnasta.

Potilaiden lohkosatunnaistaminen suoritettiin tasapainon varmistamiseksi käyttämällä talon sisäistä tietokoneohjelmaa. Otoskoon määrittämiseen käytettiin satunnaistetun kliinisen tutkimuksen otoskokokaavaa, jossa tyypin yksi (α) virhe asetettiin 5 %:ksi ja tutkimustehoksi 90 %. Tapausten suhde kontrolliin oli 1 ja odotettu keskeyttäminen oli 2 %. LSIL oli tutkimuksen päätulos; LSIL:n odotettu osuus kontrolliryhmässä oli 50 % ja hoidetussa ryhmässä 40 %. Olettaen, että keskeyttäminen on 2 %, tavoiteotoksen kooksi on määritetty 96 (48 henkilöä ryhmää kohden). Tutkimustulokset (kohdunkaulan levyepiteelin vaurioiden luokittelu, tulehdusparametrit, oksidatiivisen stressin parametrit) käsiteltiin tilastollisesti MedCalc-ohjelmistopaketilla. Muuttujien perusominaisuudet testattiin kuvailevalla analyysillä. Tietojen jakautumisen normaalia testattiin Kolmogorov-Smirnov-testillä ja tulosten jatkoanalyysiin käytettiin parametrisia tai ei-parametrisia tilastollisia testejä.