Effetto dell'acido alfa-lipoico sulla regressione delle lesioni intraepiteliali squamose di basso grado (LSIL)

La neoplasia intraepiteliale cervicale (CIN) è un cambiamento premaligno sulla cervice che può portare a cambiamenti maligni, cioè cancro cervicale. Oggi, questo termine è stato sostituito dal più recente termine lesione intraepiteliale squamosa (SIL). Con l'introduzione del termine SIL in uso (come proposto dal sistema Bethesda), vengono utilizzati due gradi per classificare i cambiamenti precancerosi della cervice: SIL di basso grado (LSIL) che include condilomi e displasia lieve (CIN I) e alto- lesione intraepiteliale squamosa di grado (HSIL) che include cambiamenti in termini di displasia di grado medio e alto (CIN II e CIN III). Il principale fattore eziologico che porta alla formazione della neoplasia cervicale è il virus del papilloma umano (HPV). Anche altri fattori eziologici come il fumo, i contraccettivi per la terapia orale, le abitudini sessuali, i prodotti chimici, la terapia immunosoppressiva, le malattie da immunodeficienza, le condizioni di vita socioeconomiche e lo stato nutrizionale dei pazienti giocano un ruolo nella progressione della malattia. Oltre a quanto sopra, anche l'infiammazione e lo stress ossidativo sono importanti fattori eziologici nello sviluppo del SIL. Vale a dire, i cambiamenti maligni sulla cervice non compaiono su una cervice completamente sana ma sono sempre associati a cervicite cronica.

L'acido alfa-lipoico (ALA) è un acido grasso non essenziale con numerosi ruoli metabolici e il suo potenziale terapeutico è oggetto di studio in molte condizioni fisiopatologiche. Oltre ad agire come cofattore di numerose vie di segnalazione nella cellula, l'ALA ha anche un potenziale redox standard di -0,32 V, che gli conferisce la capacità di rigenerare i più importanti antiossidanti fisiologici in vivo (ad es. vitamina C ed E) e lo rende uno dei più potenti antiossidanti naturali. Dato che è implicato come modulatore di varie vie di segnalazione infiammatoria, le sue proprietà antinfiammatorie sono state studiate da un gran numero di studi clinici. T Questa impressionante gamma di funzioni cellulari e molecolari ha suscitato un notevole interesse nella ricerca e nell'uso dell'ALA come integratore alimentare. È stato dimostrato che l'ALA migliora la resistenza all'insulina, allevia i sintomi della neuropatia diabetica, si combina con la fototerapia nel trattamento della vitiligine, migliora la guarigione delle ferite e aumenta l'efficacia delle diete di riduzione. Il suo uso come integratore alimentare è attualmente oggetto di studio nella demenza, nella sindrome della bocca urente, nella sindrome carpale, nel glaucoma, nella cataratta, nell'ipertensione e nell'arteriopatia periferica. A scopo terapeutico, l'ALA viene somministrato per via orale in dosi di 300-1800 mg/die e per alcune indicazioni è stata studiata la sua somministrazione topica e parenterale. La sicurezza della somministrazione orale nelle dosi menzionate è stata studiata in numerosi studi clinici della durata da 4 mesi a 4 anni. L'efficacia dell'ALA nei cambiamenti precancerosi della cervice non è stata studiata fino ad oggi. Considerando la comprovata efficacia dell'integrazione orale con altri antiossidanti (come i polifenoli del tè verde o Se) nei pazienti con LSIL, lo scopo di questa ricerca è quello di indagare, per la prima volta, l'efficacia dell'ALA nella regressione di LSIL.

Lo studio è stato progettato come studio in doppio cieco, randomizzato, controllato con placebo in cui ai partecipanti è stato chiesto di auto-somministrarsi 600 mg di ALA sotto forma di 2 capsule contenenti 300 mg di ALA (donate da Zada ​​Pharmaceuticals, Lukavac, Bosnia ed Erzegovina) o un placebo (fornito sotto forma di capsule orali identiche contenenti amido di riso, anch'esso donato da Zada ​​Pharmaceuticals) per os al giorno per 3 mesi. Il protocollo di ricerca per questo studio è stato approvato dal Comitato Etico dell'Università di Zagabria, Facoltà di Farmacia e Biochimica e dal Comitato Etico del Centro Clinico Universitario di Tuzla. La sperimentazione è stata eseguita in conformità con le linee guida internazionali, nazionali e istituzionali relative agli studi clinici e ai diritti sulla biodiversità ed è conforme alle linee guida del CONSORT.

All'appuntamento iniziale i pazienti eleggibili sono stati introdotti al disegno dello studio. Sono stati informati sul protocollo dello studio: scopo e scopo dello studio, metodologia generale, ruoli attesi dei partecipanti, potenziali rischi della partecipazione allo studio, potenziali benefici della partecipazione allo studio, problemi di riservatezza dei dati e dettagli di contatto di investigatori che, ove necessario, hanno fornito ogni tipo di ulteriore informazione necessaria. Nel caso in cui il paziente abbia accettato di partecipare allo studio, ha firmato il modulo di consenso informato. A tutti i partecipanti è stato chiesto di dare il proprio consenso informato scritto per l'inclusione nello studio. Dopo l'inclusione nello studio, i pazienti hanno compilato un questionario di base e fornito informazioni sulle caratteristiche antropometriche di base, sulla storia riproduttiva, sui farmaci attuali e sulle principali caratteristiche dello stile di vita (fumo, livello di attività fisica). L'esame delle abitudini alimentari e di vita dei pazienti è stato condotto utilizzando un questionario semiquantitativo sulla frequenza alimentare (FFQ) standardizzato e convalidato con l'aiuto di personale qualificato. Ai pazienti è stato consigliato di non modificare la loro dieta durante lo studio.

I partecipanti sono stati randomizzati nel rapporto 1:1 per ALA: placebo. Ai pazienti è stato assegnato in modo casuale un numero di paziente che ha determinato la loro assegnazione di supplementi. Hanno ricevuto due flaconi di capsule preetichettate con il loro numero di studio contenenti capsule di ALA sufficienti per 3 mesi di integrazione o capsule identiche di placebo (amido di riso) sufficienti per 3 mesi di integrazione. Ai pazienti è stato chiesto di restituire le capsule rimanenti dopo il periodo di 3 mesi per valutare l'aderenza. Durante il periodo di integrazione i partecipanti sono stati contattati due volte telefonicamente da un membro del team di ricerca per verificare i possibili effetti avversi e per migliorare l'aderenza. La conformità dopo l'arruolamento è stata misurata come percentuale di pillole assunte tra le visite. I soggetti che hanno assunto meno del 75% delle pillole dopo la randomizzazione sono stati considerati non conformi e sono stati esclusi dallo studio. 3 mesi dopo l'ingresso i partecipanti sono stati invitati a un appuntamento di follow-up.

Sia all'appuntamento iniziale che a quello di follow-up è stato condotto lo screening citologico, la colposcopia e la biopsia mirata e la conferma istologica della diagnosi citologico-colposcopica e sono stati prelevati e analizzati campioni di sangue (valutazione degli esiti primari e secondari dello studio). I campioni sono stati raccolti presso la clinica di ginecologia e ostetricia del Centro clinico universitario di Tuzla per un periodo di 18 mesi. Le analisi dei campioni sono state condotte presso il Centro Clinico Universitario di Tuzla e l'Università di Zagabria, Facoltà di Farmacia e Biochimica. L'elaborazione statistica, l'analisi e l'interpretazione dei risultati dello studio è stata completata entro 6 mesi dalla fine dell'analisi dei campioni biologici.

I dati anagrafici dei pazienti, i dati sul loro stile di vita e le loro abitudini alimentari (ricavati dal FFQ) e le misurazioni degli esiti primari e secondari dello studio sono stati archiviati ed elaborati in forma elettronica del registro dei pazienti. È stato sviluppato un dizionario di dati contenente descrizioni dettagliate di ciascuna variabile utilizzata dal registro, inclusa la fonte della variabile. Il registro è stato gestito secondo le procedure operative standard del Centro clinico universitario di Tuzla. Il responsabile del progetto ei suoi collaboratori sono stati tenuti a rispettare pienamente le procedure prescritte per la protezione dei dati personali. I dati dei pazienti sono stati inseriti nei database del progetto in base alle iniziali del nome e del cognome dei pazienti e utilizzando un codice speciale. La loro documentazione medica è stata esaminata solo dal responsabile del progetto e dai suoi collaboratori, e il nome dei pazienti non è mai stato rivelato a terzi. La documentazione dei pazienti era accessibile ai rappresentanti del Comitato etico presso l'istituzione in cui è stato condotto lo studio clinico (Centro clinico universitario di Tuzla) e ai rappresentanti del Comitato per l'etica del lavoro sperimentale della Facoltà di farmacia e biochimica dell'Università di Zagabria, che è responsabile dell'approvazione e della supervisione dello svolgimento di questa ricerca.

La randomizzazione a blocchi dei pazienti è stata eseguita per garantire l'equilibrio utilizzando un programma informatico interno. Per determinare la dimensione del campione, è stata utilizzata una formula per la dimensione del campione di uno studio clinico randomizzato, in cui l'errore di tipo uno (α) è stato fissato al 5% e la potenza dello studio è stata fissata al 90%. Il rapporto tra caso e controllo era 1 e l'abbandono previsto era del 2%. LSIL è stato il risultato principale dello studio; la proporzione prevista di LSIL nel gruppo di controllo era del 50% e nel gruppo trattato del 40%. Supponendo un abbandono del 2%, la dimensione del campione target è stata determinata in 96 (48 soggetti per gruppo). I risultati della ricerca (qualificazione delle lesioni dell'epitelio squamoso cervicale, parametri dell'infiammazione, parametri dello stress ossidativo) sono stati elaborati statisticamente utilizzando il pacchetto software MedCalc. Le caratteristiche di base delle variabili sono state testate utilizzando l'analisi descrittiva. La normalità della distribuzione dei dati è stata testata utilizzando il test di Kolmogorov-Smirnov e sono stati utilizzati test statistici parametrici o non parametrici per un'ulteriore analisi dei risultati.