Влияние альфа-липоевой кислоты на регрессию низкодифференцированных плоскоклеточных интраэпителиальных поражений (LSIL)

Цервикальная интраэпителиальная неоплазия (CIN) представляет собой предраковое изменение шейки матки, которое может привести к злокачественным изменениям, то есть к раку шейки матки. Сегодня этот термин был заменен более поздним термином плоскоклеточное интраэпителиальное поражение (SIL). С введением в обиход термина SIL (по предложению системы Bethesda) для классификации предраковых изменений шейки матки используются две степени: SIL низкой степени (LSIL), включающая кондиломы и легкую дисплазию (CIN I), и высоко- плоскоклеточное интраэпителиальное поражение (HSIL), которое включает изменения в терминах дисплазии средней и высокой степени (CIN II и CIN III). Основным этиологическим фактором, приводящим к формированию неоплазии шейки матки, является вирус папилломы человека (ВПЧ). Другие этиологические факторы, такие как курение, пероральные противозачаточные средства, сексуальные привычки, химические вещества, иммуносупрессивная терапия, иммунодефицитные заболевания, социально-экономические условия жизни и пищевой статус пациентов, также играют роль в прогрессировании заболевания. Помимо вышеперечисленного, важными этиологическими факторами в развитии SIL являются воспаление и окислительный стресс. А именно, злокачественные изменения на шейке матки не появляются на полностью здоровой шейке матки, а всегда связаны с хроническим цервицитом.

Альфа-липоевая кислота (АЛК) представляет собой заменимую жирную кислоту с многочисленными метаболическими ролями, и ее терапевтический потенциал исследуется при многих патофизиологических состояниях. Помимо действия в качестве кофактора многочисленных сигнальных путей в клетке, ALA также имеет стандартный окислительно-восстановительный потенциал -0,32 В, что дает ей способность регенерировать наиболее важные физиологические антиоксиданты in vivo (например, витамин С и Е) и делает его одним из самых мощных природных антиоксидантов. Учитывая, что он участвует в качестве модулятора различных воспалительных сигнальных путей, его противовоспалительные свойства изучались в большом количестве клинических исследований. Этот впечатляющий набор клеточных и молекулярных функций вызвал значительный интерес к исследованиям и использованию АЛК в качестве пищевой добавки. Было доказано, что АЛК улучшает резистентность к инсулину, облегчает симптомы диабетической невропатии, сочетается с фототерапией при лечении витилиго, улучшает заживление ран и повышает эффективность диет. Его использование в качестве пищевой добавки в настоящее время изучается при деменции, синдроме жжения во рту, синдроме запястья, глаукоме, катаракте, гипертонии и заболеваниях периферических артерий. В лечебных целях АЛК вводят перорально в дозах 300-1800 мг/сут, а по некоторым показаниям исследовано ее местное и парентеральное введение. Безопасность перорального приема в указанных дозах изучалась во многих клинических исследованиях продолжительностью от 4 мес до 4 лет. Эффективность АЛК при предраковых изменениях шейки матки до настоящего времени не исследована. Принимая во внимание доказанную эффективность перорального приема других антиоксидантов (таких как полифенолы зеленого чая или Se) у пациентов с LSIL, цель этого исследования — впервые изучить эффективность ALA в регрессии LSIL.

Исследование было разработано как двойное слепое рандомизированное плацебо-контролируемое исследование, в котором участников просили самостоятельно принимать либо 600 мг АЛК в виде 2 капсул, содержащих 300 мг АЛК (предоставлено Zada ​​Pharmaceuticals, Лукавац, Босния и Герцеговина). или плацебо (в виде идентичных пероральных капсул, содержащих рисовый крахмал, также предоставленных Zada ​​Pharmaceuticals) per os ежедневно в течение 3 месяцев. Протокол исследования для этого исследования был одобрен Комитетом по этике Загребского университета, факультета фармации и биохимии и Комитетом по этике Университетского клинического центра Тузла. Испытание проводилось в соответствии с международными, национальными и институциональными рекомендациями, касающимися клинических исследований и прав на биоразнообразие, и соответствовало рекомендациям CONSORT.

При первом посещении подходящие пациенты были ознакомлены с планом исследования. Они были проинформированы о протоколе исследования: цель и цель исследования, общая методология, ожидаемые роли участников, потенциальные риски участия в исследовании, потенциальные преимущества участия в исследовании, вопросы конфиденциальности данных и контактные данные следователи, которые в случае необходимости предоставляли любую дополнительную необходимую информацию. В случае согласия пациента на участие в исследовании он подписывает форму информированного согласия. Всем участникам было предложено дать письменное информированное согласие на включение в исследование. После включения в исследование пациенты заполняли базовую анкету и предоставляли информацию об основных антропометрических характеристиках, репродуктивном анамнезе, принимаемых лекарствах и основных характеристиках образа жизни (курение, уровень физической активности). Изучение пищевых привычек и образа жизни пациентов проводилось с помощью стандартизированного и утвержденного полуколичественного вопросника частоты приема пищи (FFQ) с помощью обученного персонала. Пациентам было рекомендовано не менять диету во время исследования.

Участники были рандомизированы в соотношении 1:1 для АЛК:плацебо. Пациентам случайным образом был присвоен номер пациента, который определял их распределение в виде добавок. Они получили два флакона с капсулами, предварительно помеченными номером исследования, содержащими либо капсулы АЛК, достаточные для приема добавок в течение 3 месяцев, либо идентичные капсулы плацебо (рисовый крахмал), которых достаточно для приема добавок в течение 3 месяцев. Пациентов просили вернуть оставшиеся капсулы через 3 месяца для оценки приверженности лечению. В течение периода приема добавок член исследовательской группы дважды связывался с участниками по телефону, чтобы проверить возможные побочные эффекты и улучшить соблюдение режима лечения. Приверженность после регистрации измеряли как процент таблеток, принятых между визитами. Субъекты, принявшие менее 75% таблеток после рандомизации, считались несоответствующими и исключались из исследования. Через 3 месяца после записи участники были приглашены на повторный прием.

Как на первичном, так и на контрольном приеме проводили цитологический скрининг, кольпоскопию и прицельную биопсию, гистологическое подтверждение цитокольпоскопического диагноза, брали и анализировали образцы крови (оценка первичных и вторичных исходов исследования). Образцы были собраны в Клинике гинекологии и акушерства Университетского клинического центра Тузлы в течение 18 месяцев. Анализы образцов были проведены в Университетском клиническом центре Тузлы и Загребском университете на факультете фармации и биохимии. Статистическую обработку, анализ и интерпретацию результатов исследования проводили в течение 6 месяцев с момента окончания анализа биологических образцов.

Персональные данные пациентов, данные об их образе жизни и пищевых привычках (полученные из FFQ), а также измерения первичных и вторичных результатов исследования хранились и обрабатывались в электронной форме регистра пациентов. Был разработан словарь данных, содержащий подробные описания каждой переменной, используемой реестром, включая источник переменной. Реестр работал в соответствии со стандартными операционными процедурами Университетского клинического центра Тузлы. Руководитель проекта и его помощники были обязаны полностью соблюдать установленные процедуры защиты персональных данных. Данные пациентов вводились в базы данных проекта по инициалам имени и фамилии пациентов и с использованием специального кода. Их медицинские документы были проверены только руководителем проекта и его помощниками, и имена пациентов никогда не разглашались третьим лицам. Документация пациентов была доступна представителям Комитета по этике в учреждении, в котором проводилось клиническое исследование (Университетский клинический центр Тузла), и представителям Комитета по этике экспериментальной работы факультета фармации и биохимии Загребского университета, который несет ответственность за утверждение и надзор за проведением этого исследования.

Блочная рандомизация пациентов проводилась для обеспечения баланса с использованием собственной компьютерной программы. Для определения размера выборки использовалась формула размера выборки рандомизированного клинического исследования, где ошибка первого типа (α) была установлена ​​​​на уровне 5%, а мощность исследования была установлена ​​​​на уровне 90%. Соотношение случаев и контроля составило 1, а ожидаемое отсев составило 2%. LSIL был основным результатом исследования; ожидаемая доля LSIL в контрольной группе составила 50%, а в обработанной группе 40%. Предполагая отсев 2%, целевой размер выборки был определен как 96 (48 субъектов в группе). Результаты исследования (квалификацию поражения плоского эпителия шейки матки, параметры воспаления, параметры оксидативного стресса) подвергали статистической обработке с использованием пакета программ MedCalc. Основные характеристики переменных были проверены с помощью описательного анализа. Нормальность распределения данных проверялась с помощью критерия Колмогорова-Смирнова, а для дальнейшего анализа результатов использовались параметрические или непараметрические статистические тесты.