Wirkung von Alpha-Liponsäure auf die Regression von niedriggradigen squamösen intraepithelialen Läsionen (LSIL)

Die zervikale intraepitheliale Neoplasie (CIN) ist eine prämaligne Veränderung am Gebärmutterhals, die zu bösartigen Veränderungen, d. h. Gebärmutterhalskrebs, führen kann. Heute wurde dieser Begriff durch den neueren Begriff squamöse intraepitheliale Läsion (SIL) ersetzt. Mit der Einführung des Begriffs SIL in Gebrauch (wie vom Bethesda-System vorgeschlagen) werden zwei Grade verwendet, um prämaligne Veränderungen des Gebärmutterhalses zu klassifizieren: SIL von niedrigem Grad (LSIL), der Kondylome und leichte Dysplasie (CIN I) umfasst, und hoch- grade squamous intraepithelial läsion (HSIL), die Veränderungen in Form von mittel- und hochgradiger Dysplasie (CIN II und CIN III) umfasst. Der wichtigste ätiologische Faktor, der zur Bildung von zervikalen Neoplasien führt, ist das humane Papillomavirus (HPV). Andere ätiologische Faktoren wie Rauchen, orale Kontrazeptiva, Sexualgewohnheiten, Chemikalien, immunsuppressive Therapie, Immunschwächekrankheiten, sozioökonomische Lebensbedingungen und Ernährungszustand der Patienten spielen ebenfalls eine Rolle beim Fortschreiten der Krankheit. Darüber hinaus sind Entzündungen und oxidativer Stress ebenfalls wichtige ätiologische Faktoren bei der Entwicklung von SIL. Bösartige Veränderungen am Gebärmutterhals treten nämlich nicht an einem völlig gesunden Gebärmutterhals auf, sondern sind immer mit einer chronischen Zervizitis verbunden.

Alpha-Liponsäure (ALA) ist eine nicht-essentielle Fettsäure mit zahlreichen metabolischen Funktionen und ihr therapeutisches Potenzial wird bei vielen pathophysiologischen Erkrankungen untersucht. Neben der Funktion als Cofaktor zahlreicher Signalwege in der Zelle hat ALA auch ein Standard-Redoxpotential von -0,32 V, wodurch es die Fähigkeit besitzt, die wichtigsten physiologischen Antioxidantien in vivo zu regenerieren (z. Vitamin C und E) und macht es zu einem der stärksten natürlichen Antioxidantien. Da es als Modulator verschiedener Entzündungssignalwege involviert ist, wurden seine entzündungshemmenden Eigenschaften in einer Vielzahl von klinischen Studien untersucht. T Diese beeindruckende Reihe von zellulären und molekularen Funktionen hat zu einem erheblichen Interesse an der Erforschung und Verwendung von ALA als Nahrungsergänzungsmittel geführt. ALA verbessert nachweislich die Insulinresistenz, lindert Symptome der diabetischen Neuropathie, kombiniert mit Phototherapie bei der Behandlung von Vitiligo, verbessert die Wundheilung und erhöht die Wirksamkeit von Reduktionsdiäten. Seine Verwendung als Nahrungsergänzungsmittel wird derzeit bei Demenz, Burning-Mouth-Syndrom, Karpalsyndrom, Glaukom, grauem Star, Bluthochdruck und peripherer arterieller Verschlusskrankheit untersucht. Für therapeutische Zwecke wird ALA oral in Dosen von 300–1800 mg/Tag verabreicht, und für einige Indikationen wurde seine topische und parenterale Verabreichung untersucht. Die Sicherheit der oralen Verabreichung in den genannten Dosen wurde in vielen klinischen Studien untersucht, die 4 Monate bis 4 Jahre dauerten. Die Wirksamkeit von ALA bei prämalignen Veränderungen des Gebärmutterhalses wurde bisher nicht untersucht. In Anbetracht der nachgewiesenen Wirksamkeit einer oralen Supplementierung mit anderen Antioxidantien (wie Grüntee-Polyphenolen oder Se) bei Patienten mit LSIL ist es das Ziel dieser Forschung, zum ersten Mal die Wirksamkeit von ALA bei der Regression von LSIL zu untersuchen.

Die Studie war als doppelblinde, randomisierte, placebokontrollierte Studie konzipiert, bei der die Teilnehmer gebeten wurden, sich entweder 600 mg ALA in Form von 2 Kapseln mit 300 mg ALA (gespendet von Zada ​​Pharmaceuticals, Lukavac, Bosnien und Herzegowina) selbst zu verabreichen. oder ein Placebo (bereitgestellt als identische orale Kapseln mit Reisstärke, ebenfalls gespendet von Zada ​​Pharmaceuticals) per os täglich für 3 Monate. Das Forschungsprotokoll für diese Studie wurde von der Ethikkommission der Universität Zagreb, Fakultät für Pharmazie und Biochemie und der Ethikkommission des Universitätsklinikums Tuzla genehmigt. Die Studie wurde in Übereinstimmung mit den internationalen, nationalen und institutionellen Richtlinien zu klinischen Studien und Rechten an biologischer Vielfalt durchgeführt und entsprach den CONSORT-Richtlinien.

Beim ersten Termin wurden geeignete Patienten in das Studiendesign eingeführt. Sie wurden über das Studienprotokoll informiert: Ziel und Zweck der Studie, allgemeine Methodik, erwartete Rollen der Teilnehmer, potenzielle Risiken der Teilnahme an der Studie, potenzielle Vorteile der Teilnahme an der Studie, Fragen der Vertraulichkeit von Daten und Kontaktdaten von Ermittler, die bei Bedarf jede Art von zusätzlich benötigten Informationen zur Verfügung stellten. Falls der Patient der Teilnahme an der Studie zustimmte, unterzeichnete er eine Einverständniserklärung. Alle Teilnehmer wurden gebeten, ihr schriftliches Einverständnis für die Aufnahme in die Studie zu geben. Nach der Aufnahme in die Studie füllten die Patienten einen Baseline-Fragebogen aus und gaben Informationen zu grundlegenden anthropometrischen Merkmalen, der Fortpflanzungsgeschichte, der aktuellen Medikation und den wichtigsten Merkmalen des Lebensstils (Rauchen, Grad der körperlichen Aktivität) an. Die Untersuchung der Ess- und Lebensgewohnheiten der Patienten erfolgte mit Hilfe eines standardisierten und validierten semiquantitativen Food Frequency Questionnaire (FFQ) mit Hilfe von geschultem Personal. Den Patienten wurde geraten, ihre Ernährung während der Studie nicht zu ändern.

Die Teilnehmer wurden im Verhältnis 1:1 für ALA: Placebo randomisiert. Den Patienten wurde nach dem Zufallsprinzip eine Patientennummer zugewiesen, die ihre Ergänzungszuteilung festlegte. Sie erhielten zwei Flaschen mit Kapseln, die mit ihrer Studiennummer voretikettiert waren und entweder ALA-Kapseln enthielten, die für eine 3-monatige Supplementierung ausreichten, oder identische Kapseln mit Placebo (Reisstärke), die für eine 3-monatige Supplementierung ausreichten. Die Patienten wurden gebeten, die verbleibenden Kapseln nach Ablauf der 3 Monate zurückzugeben, um die Adhärenz zu beurteilen. Während des Supplementierungszeitraums wurden die Teilnehmer zweimal telefonisch von einem Mitglied des Forschungsteams kontaktiert, um mögliche Nebenwirkungen zu überprüfen und die Therapietreue zu verbessern. Die Compliance nach der Registrierung wurde als Prozentsatz der Pillen gemessen, die zwischen den Besuchen eingenommen wurden. Probanden, die nach der Randomisierung weniger als 75 % der Pillen einnahmen, wurden als nicht konform angesehen und aus der Studie genommen. 3 Monate nach dem Eintrag wurden die Teilnehmer zu einem Folgetermin eingeladen.

Sowohl beim Erst- als auch beim Folgetermin wurde ein zytologisches Screening, eine Kolposkopie und eine gezielte Biopsie sowie eine histologische Bestätigung der zytologisch-kolposkopischen Diagnose durchgeführt und Blutproben entnommen und analysiert (Beurteilung der primären und sekundären Ergebnisse der Studie). Die Proben wurden in der Klinik für Gynäkologie und Geburtshilfe des Universitätsklinikums Tuzla über einen Zeitraum von 18 Monaten gesammelt. Probenanalysen wurden am Universitätsklinikum Tuzla und der Universität Zagreb, Fakultät für Pharmazie und Biochemie, durchgeführt. Die statistische Verarbeitung, Analyse und Interpretation der Studienergebnisse wurde innerhalb von 6 Monaten nach Ende der Analyse der biologischen Proben abgeschlossen.

Die personenbezogenen Daten der Patienten, Daten zu ihrem Lebensstil und Essverhalten (erhalten aus dem FFQ) und Messungen der primären und sekundären Ergebnisse der Studie wurden in elektronischer Form des Patientenregisters gespeichert und verarbeitet. Es wurde ein Datenwörterbuch entwickelt, das detaillierte Beschreibungen aller vom Register verwendeten Variablen enthält, einschließlich der Quelle der Variablen. Das Register wurde nach operativen Standardverfahren des Universitätsklinikums Tuzla betrieben. Der Projektleiter und seine Mitarbeiter waren verpflichtet, die vorgeschriebenen Verfahren zum Schutz personenbezogener Daten vollständig einzuhalten. Die Patientendaten wurden nach den Initialen des Vor- und Nachnamens der Patienten und unter Verwendung eines speziellen Codes in Projektdatenbanken eingegeben. Ihre medizinische Dokumentation wurde nur vom Projektmanager und seinen Mitarbeitern überprüft, und die Namen der Patienten wurden niemals an Dritte weitergegeben. Die Patientendokumentation war Vertretern der Ethikkommission der Institution zugänglich, an der die klinische Studie durchgeführt wurde (Universitätsklinikum Tuzla) und Vertretern der Kommission für die Ethik der experimentellen Arbeit der Fakultät für Pharmazie und Biochemie der Universität Zagreb, die ist verantwortlich für die Genehmigung und Überwachung der Durchführung dieser Forschung.

Es wurde eine Block-Randomisierung der Patienten durchgeführt, um ein Gleichgewicht unter Verwendung eines internen Computerprogramms sicherzustellen. Um die Stichprobengröße zu bestimmen, wurde eine Stichprobengrößenformel für randomisierte klinische Studien verwendet, wobei der Fehler vom Typ 1 (α) auf 5 % und die Studienstärke auf 90 % festgelegt wurde. Das Verhältnis von Fall zu Kontrolle war 1, und der erwartete Dropout war 2 %. LSIL war das Hauptergebnis der Studie; der erwartete LSIL-Anteil in der Kontrollgruppe betrug 50 % und in der behandelten Gruppe 40 %. Unter der Annahme eines Dropouts von 2 % wurde die angestrebte Stichprobengröße auf 96 (48 Probanden pro Gruppe) festgelegt. Die Forschungsergebnisse (Qualifikation zervikaler Plattenepithelläsionen, Entzündungsparameter, oxidativer Stressparameter) wurden mit dem Softwarepaket MedCalc statistisch aufbereitet. Die grundlegenden Merkmale der Variablen wurden mithilfe der deskriptiven Analyse getestet. Die Normalität der Datenverteilung wurde mit dem Kolmogorov-Smirnov-Test getestet, und zur weiteren Analyse der Ergebnisse wurden parametrische oder nichtparametrische statistische Tests verwendet.