Effekt av alfa-liponsyre på regresjon av lavgradige squamous intraepiteliale lesjoner (LSIL)

Cervical intraepitelial neoplasia (CIN) er premalign forandring på livmorhalsen som kan føre til ondartede forandringer, dvs. livmorhalskreft. I dag er dette begrepet erstattet av det nyere begrepet squamous intraepithelial lesion (SIL). Med introduksjonen av begrepet SIL i bruk (som foreslått av Bethesda-systemet), brukes to grader for å klassifisere premaligne endringer i livmorhalsen: SIL av lav grad (LSIL) som inkluderer kondylomer og mild dysplasi (CIN I), og høy- grad squamous intraepitelial lesjon (HSIL) som inkluderer endringer i form av middels og høy grad av dysplasi (CIN II og CIN III). Den viktigste etiologiske faktoren som fører til dannelsen av cervikal neoplasi er humant papillomavirus (HPV). Andre etiologiske faktorer som røyking, oral terapi prevensjonsmidler, seksuelle vaner, kjemikalier, immunsuppressiv terapi, immunsviktsykdommer, sosioøkonomiske levekår og ernæringsstatus hos pasienter spiller også en rolle i utviklingen av sykdommen. I tillegg til ovennevnte er også betennelse og oksidativt stress viktige etiologiske faktorer i utviklingen av SIL. Ondartede forandringer på livmorhalsen vises nemlig ikke på en helt frisk livmorhals, men er alltid forbundet med kronisk livmorhalsbetennelse.

Alfa-liponsyre (ALA) er en ikke-essensiell fettsyre med mange metabolske roller og dens terapeutiske potensiale blir undersøkt i mange patofysiologiske tilstander. I tillegg til å fungere som en kofaktor for en rekke signalveier i cellen, har ALA også et standard redokspotensial på -0,32 V, som gir den muligheten til å regenerere de viktigste fysiologiske antioksidantene in vivo (f. vitamin C og E) og gjør det til en av de mest potente naturlige antioksidantene. Gitt at det er implisert som en modulator av forskjellige inflammatoriske signalveier, har dens antiinflammatoriske egenskaper blitt undersøkt av et stort antall kliniske studier. T Dette imponerende utvalget av cellulære og molekylære funksjoner har ført til betydelig interesse for forskning og bruk av ALA som kosttilskudd. ALA har vist seg å forbedre insulinresistens, lindre symptomer på diabetisk nevropati, kombinere med fototerapi i behandling av vitiligo, forbedre sårheling og øke effektiviteten av reduksjonsdietter. Bruken som et kosttilskudd blir for tiden undersøkt ved demens, brennende munnsyndrom, karpalsyndrom, glaukom, grå stær, hypertensjon og perifer arteriell sykdom. For terapeutiske formål administreres ALA oralt i doser på 300-1800 mg/dag, og for noen indikasjoner er dens topiske og parenterale administrering undersøkt. Sikkerheten ved oral administrering i de nevnte dosene har blitt undersøkt i mange kliniske studier som varer fra 4 måneder til 4 år. Effektiviteten av ALA ved premaligne forandringer i livmorhalsen har ikke blitt undersøkt til dags dato. Tatt i betraktning den beviste effektiviteten av oral tilskudd med andre antioksidanter (som grønn te-polyfenoler eller Se) hos pasienter med LSIL, er målet med denne forskningen å undersøke, for første gang, effektiviteten av ALA i regresjon av LSIL.

Studien ble designet som dobbeltblind, randomisert, placebokontrollert studie der deltakerne ble bedt om å selv-administrere enten 600 mg ALA i form av 2 kapsler som inneholder 300 mg ALA (donert av Zada ​​Pharmaceuticals, Lukavac, Bosnia-Hercegovina) eller en placebo (gitt som identiske orale kapsler som inneholder risstivelse, også donert av Zada ​​Pharmaceuticals) per os daglig i 3 måneder. Forskningsprotokollen for denne studien er godkjent av den etiske komiteen ved Universitetet i Zagreb, Fakultet for farmasi og biokjemi og den etiske komiteen ved University Clinical Center Tuzla. Forsøket ble utført i samsvar med internasjonale, nasjonale og institusjonelle retningslinjer knyttet til kliniske studier og rettigheter til biologisk mangfold, og den fulgte CONSORT-retningslinjene.

Ved den første avtalen ble kvalifiserte pasienter introdusert for studiedesignet. De ble informert om studieprotokollen: mål og hensikt med studien, generell metodikk, forventede roller til deltakerne, potensielle risikoer ved å delta i studien, potensielle fordeler ved deltakelsen i studien, datakonfidensialitetsproblemer og kontaktinformasjon for etterforskere som, når det var nødvendig, ga enhver form for tilleggsinformasjon. I tilfelle pasienten gikk med på å delta i studien, signerte de skjemaet for informert samtykke. Alle deltakerne ble bedt om å gi sitt skriftlige informerte samtykke for inkludering i studien. Etter inkludering i studien fylte pasientene et baseline-spørreskjema og ga informasjon om grunnleggende antropometriske egenskaper, reproduksjonshistorie, nåværende medisinering og viktige livsstilskarakteristikker (røyking, fysisk aktivitetsnivå). Undersøkelse av pasienters spise- og levevaner ble utført ved hjelp av et standardisert og validert semikvantitativt spørreskjema for matfrekvens (FFQ) med hjelp av opplært personale. Pasientene ble anbefalt å ikke endre kostholdet i løpet av studien.

Deltakerne ble randomisert i forholdet 1:1 for ALA: placebo. Pasientene ble tilfeldig tildelt et pasientnummer som avgjorde deres tilleggstildeling. De fikk to flasker med kapsler forhåndsmerket med studienummeret som enten inneholdt kapsler med ALA tilstrekkelig for 3 måneders tilskudd, eller identiske kapsler med placebo (risstivelse) tilstrekkelig for 3 måneders tilskudd. Pasientene ble bedt om å returnere de gjenværende kapslene etter 3-månedersperioden for å vurdere etterlevelsen. I løpet av tilskuddsperioden ble deltakerne kontaktet to ganger per telefon av et medlem av forskerteamet for å sjekke mulige bivirkninger og for å forbedre etterlevelsen. Compliance etter registrering ble målt som prosentandelen av piller tatt mellom besøkene. Forsøkspersoner som tok mindre enn 75 % av pillene etter randomisering ble ansett som ikke-kompatible og ble tatt ut av studien. 3 måneder etter påmeldingen ble deltakerne invitert til en oppfølgingsavtale.

Ved både innledende og oppfølgingsavtale ble det utført cytologisk screening, kolposkopi og målrettet biopsi og histologisk bekreftelse av cytologisk-kolposkopisk diagnose og blodprøver ble tatt og analysert (vurdering av primære og sekundære utfall av studien). Prøvene ble samlet inn ved Gynecology and Obstetrics Clinic ved University Clinical Center Tuzla over en periode på 18 måneder. Prøveanalyser ble utført ved University Clinical Center Tuzla og University of Zagreb, Fakultet for farmasi og biokjemi. Statistisk bearbeiding, analyse og tolkning av studieresultatene ble fullført innen 6 måneder fra slutten av analysen av de biologiske prøvene.

Pasientenes personlige data, data om deres livsstil og spisevaner (hentet fra FFQ) og målinger av primære og sekundære utfall av studien ble lagret og behandlet i elektronisk form av pasientregisteret. Dataordbok som inneholder detaljerte beskrivelser av hver variabel som brukes av registeret, inkludert kilden til variabelen, ble utviklet. Registeret ble operert i henhold til standard operative prosedyrer fra University Clinical Center Tuzla. Prosjektleder og hans medarbeidere var forpliktet til fullt ut å overholde de foreskrevne prosedyrene for beskyttelse av personopplysninger. Pasientdata ble lagt inn i prosjektdatabaser i henhold til initialene til pasientens for- og etternavn og ved hjelp av en spesiell kode. Deres medisinske dokumentasjon ble kun gjennomgått av prosjektlederen og hans medarbeidere, og pasientens navn ble aldri avslørt til tredjeparter. Pasientdokumentasjonen var tilgjengelig for representanter for den etiske komiteen ved institusjonen der kliniske studier ble utført (University Clinical Center Tuzla) og representanter for komiteen for etikk av eksperimentelt arbeid ved Fakultetet for farmasi og biokjemi ved Universitetet i Zagreb, som er ansvarlig for å godkjenne og føre tilsyn med gjennomføringen av denne forskningen.

Blokkrandomisering av pasienter ble utført for å sikre balanse ved hjelp av et internt dataprogram. For å bestemme utvalgsstørrelsen ble det brukt en randomisert prøvestørrelsesformel for kliniske forsøk, der type én (α) feil ble satt til 5 % og studieeffekten ble satt til 90 %. Forholdet mellom tilfelle og kontroll var 1, og forventet frafall var 2 %. LSIL var hovedresultatet av studien; forventet andel av LSIL i kontrollgruppen var 50 %, og i den behandlede gruppen 40 %. Forutsatt et frafall på 2 % har målprøvestørrelsen blitt bestemt til å være 96 (48 forsøkspersoner per gruppe). Forskningsresultatene (kvalifisering av cervical plateepitel lesjoner, parametere for betennelse, parametere for oksidativt stress) ble statistisk behandlet ved hjelp av MedCalc programvarepakken. De grunnleggende egenskapene til variablene ble testet ved hjelp av beskrivende analyse. Normaliteten til datafordeling ble testet ved hjelp av Kolmogorov-Smirnov-testen, og parametriske eller ikke-parametriske statistiske tester ble brukt for videre analyse av resultatene.