Effekt av alfa-liponsyra på regression av låggradiga skvamösa intraepiteliala lesioner (LSIL)

Cervikal intraepitelial neoplasi (CIN) är premaligna förändringar på livmoderhalsen som kan leda till maligna förändringar, d.v.s. livmoderhalscancer. Idag har denna term ersatts av den nyare termen squamous intraepitelial lesion (SIL). Med introduktionen av termen SIL i bruk (som föreslagits av Bethesda-systemet) används två grader för att klassificera premaligna förändringar i livmoderhalsen: SIL av låg grad (LSIL) som inkluderar kondylom och mild dysplasi (CIN I), och hög- grad squamous intraepitelial lesion (HSIL) som inkluderar förändringar i termer av medel- och höggradig dysplasi (CIN II och CIN III). Den främsta etiologiska faktorn som leder till bildandet av cervikal neoplasi är humant papillomvirus (HPV). Andra etiologiska faktorer såsom rökning, p-piller för oral terapi, sexuella vanor, kemikalier, immunsuppressiv terapi, immunbristsjukdomar, socioekonomiska levnadsförhållanden och näringstillstånd hos patienter spelar också en roll i sjukdomens fortskridande. Utöver ovanstående är inflammation och oxidativ stress också viktiga etiologiska faktorer vid utvecklingen av SIL. Maligna förändringar på livmoderhalsen uppträder nämligen inte på en helt frisk livmoderhals utan är alltid förknippade med kronisk livmoderhalsinflammation.

Alfa-liponsyra (ALA) är en icke-essentiell fettsyra med många metaboliska roller och dess terapeutiska potential undersöks vid många patofysiologiska tillstånd. Förutom att fungera som en kofaktor för många signalvägar i cellen, har ALA också en standard redoxpotential på -0,32 V, vilket ger den förmågan att regenerera de viktigaste fysiologiska antioxidanterna in vivo (t. vitamin C och E) och gör det till en av de mest potenta naturliga antioxidanterna. Med tanke på att det är inblandat som en modulator av olika inflammatoriska signalvägar, har dess antiinflammatoriska egenskaper undersökts av ett stort antal kliniska studier. T Detta imponerande utbud av cellulära och molekylära funktioner har lett till ett stort intresse för forskning och användning av ALA som kosttillskott. ALA har visat sig förbättra insulinresistens, lindra symtom på diabetisk neuropati, kombinera med fototerapi vid behandling av vitiligo, förbättra sårläkning och öka effektiviteten av reduktionsdieter. Dess användning som kosttillskott undersöks för närvarande vid demens, brännande munsyndrom, karpalsyndrom, glaukom, grå starr, högt blodtryck och perifer artärsjukdom. För terapeutiska ändamål administreras ALA oralt i doser på 300-1800 mg/dag, och för vissa indikationer har dess topikala och parenterala administrering undersökts. Säkerheten vid oral administrering i de nämnda doserna har undersökts i många kliniska studier på från 4 månader till 4 år. Effektiviteten av ALA vid premaligna förändringar i livmoderhalsen har hittills inte undersökts. Med tanke på den bevisade effektiviteten av oralt tillskott med andra antioxidanter (såsom grönt te-polyfenoler eller Se) hos patienter med LSIL, är syftet med denna forskning att för första gången undersöka effektiviteten av ALA vid regression av LSIL.

Studien utformades som dubbelblind, randomiserad, placebokontrollerad studie där deltagarna ombads att själv administrera antingen 600 mg ALA i form av 2 kapslar innehållande 300 mg ALA (donerat av Zada ​​Pharmaceuticals, Lukavac, Bosnien och Hercegovina) eller en placebo (tillhandahålls som identiska orala kapslar innehållande risstärkelse, även donerad av Zada ​​Pharmaceuticals) per os dagligen i 3 månader. Forskningsprotokollet för denna studie har godkänts av etikkommittén vid universitetet i Zagreb, fakulteten för farmaci och biokemi och etikkommittén vid University Clinical Center Tuzla. Försöket utfördes i enlighet med internationella, nationella och institutionella riktlinjer för kliniska studier och rättigheter för biologisk mångfald och den överensstämde med CONSORT:s riktlinjer.

Vid det första mötet introducerades berättigade patienter till studiedesignen. De informerades om studieprotokollet: syfte och syfte med studien, allmän metodik, förväntade roller för deltagarna, potentiella risker med att delta i studien, potentiella fördelar med deltagandet i studien, frågor om datasekretess och kontaktuppgifter för utredare som vid behov lämnade någon form av ytterligare nödvändig information. Om patienten gick med på att delta i studien undertecknade de ett informerat samtycke. Alla deltagare ombads ge sitt skriftliga informerade samtycke för inkludering i studien. Efter inkludering i studien fyllde patienterna ett baslinjeformulär och gav information om grundläggande antropometriska egenskaper, reproduktionshistoria, aktuell medicinering och viktiga livsstilsegenskaper (rökning, fysisk aktivitetsnivå). Undersökning av patienters mat- och levnadsvanor gjordes med hjälp av ett standardiserat och validerat semikvantitativt frågeformulär för matfrekvens (FFQ) med hjälp av utbildad personal. Patienterna rekommenderades att inte ändra sin kost under studien.

Deltagarna randomiserades i förhållandet 1:1 för ALA: placebo. Patienterna tilldelades slumpmässigt ett patientnummer som avgjorde deras tilläggsallokering. De fick två flaskor med kapslar förmärkta med deras studienummer innehållande antingen kapslar av ALA tillräckliga för 3 månaders tillskott eller identiska kapslar med placebo (risstärkelse) tillräckliga för 3 månaders tillskott. Patienterna ombads att lämna tillbaka de återstående kapslarna efter 3-månadersperioden för att bedöma vidhäftningen. Under tilläggsperioden kontaktades deltagarna två gånger per telefon av en forskargruppsmedlem för att kontrollera eventuella negativa effekter och för att förbättra följsamheten. Efterlevnad efter inskrivning mättes som andelen piller som togs mellan besöken. Försökspersoner som tog mindre än 75 % av pillren efter randomisering ansågs vara icke-kompatibla och togs bort från studien. 3 månader efter anmälan bjöds deltagarna in till ett uppföljningsmöte.

Vid både inledande och uppföljande möte utfördes cytologisk screening, kolposkopi och riktad biopsi och histologisk bekräftelse av cytologisk-kolposkopisk diagnos och blodprover togs och analyserades (bedömning av primära och sekundära resultat av studien). Proverna samlades in på Gynecology and Obstetrics Clinic vid University Clinical Center Tuzla under en period av 18 månader. Provanalyser utfördes vid University Clinical Center Tuzla och University of Zagreb, Fakulteten för farmaci och biokemi. Statistisk bearbetning, analys och tolkning av studieresultaten slutfördes inom 6 månader från slutet av analysen av de biologiska proverna.

Patienternas personuppgifter, data om deras livsstil och matvanor (från FFQ) och mätningar av studiens primära och sekundära utfall lagrades och bearbetades i elektronisk form av patientregistret. Dataordbok som innehåller detaljerade beskrivningar av varje variabel som används av registret, inklusive källan till variabeln utvecklades. Registret drevs enligt standardoperativa procedurer från University Clinical Center Tuzla. Projektledaren och hans medarbetare var skyldiga att fullt ut följa de föreskrivna förfarandena för skydd av personuppgifter. Patientdata fördes in i projektdatabaser enligt initialerna på patienternas för- och efternamn och med hjälp av en speciell kod. Deras medicinska dokumentation granskades endast av projektledaren och hans medarbetare, och patienternas namn avslöjades aldrig för tredje part. Patientdokumentation var tillgänglig för representanter för etikkommittén vid institutionen där kliniska studier genomfördes (University Clinical Center Tuzla) och representanter för kommittén för etik av experimentellt arbete vid fakulteten för farmaci och biokemi vid universitetet i Zagreb, som ansvarar för att godkänna och övervaka genomförandet av denna forskning.

Blockrandomisering av patienter utfördes för att säkerställa balans med hjälp av ett internt datorprogram. För att bestämma urvalsstorleken användes en randomiserad provstorleksformel för kliniska prövningar, där typ ett (α) fel sattes till 5 % och studieeffekten sattes till 90 %. Förhållandet mellan fall och kontroll var 1 och det förväntade bortfallet var 2 %. LSIL var det huvudsakliga resultatet av studien; förväntad andel LSIL i kontrollgruppen var 50 % och i den behandlade gruppen 40 %. Om man antar ett bortfall på 2 % har målprovstorleken bestämts till 96 (48 försökspersoner per grupp). Forskningsresultaten (kvalificering av cervikala skivepitelskador, parametrar för inflammation, parametrar för oxidativ stress) bearbetades statistiskt med hjälp av MedCalc-programpaketet. Variablernas grundläggande egenskaper testades med hjälp av deskriptiv analys. Normaliteten i datafördelningen testades med Kolmogorov-Smirnov-testet, och parametriska eller icke-parametriska statistiska tester användes för ytterligare analys av resultaten.