Efeito do ácido alfa-lipóico na regressão de lesões intraepiteliais escamosas de baixo grau (LSIL)

A neoplasia intraepitelial cervical (NIC) é uma alteração pré-maligna no colo do útero que pode levar a alterações malignas, ou seja, câncer cervical. Hoje, esse termo foi substituído pelo termo mais recente lesão intraepitelial escamosa (SIL). Com a introdução do termo SIL (como proposto pelo sistema Bethesda), dois graus são usados ​​para classificar as alterações pré-malignas do colo do útero: SIL de baixo grau (LSIL) que inclui condilomas e displasia leve (CIN I), e alto grau lesão intraepitelial escamosa de grau (HSIL) que inclui alterações em termos de displasia de médio e alto grau (NIC II e NIC III). O principal fator etiológico que leva à formação da neoplasia cervical é o vírus do papiloma humano (HPV). Outros fatores etiológicos como tabagismo, anticoncepcionais orais, hábitos sexuais, produtos químicos, terapia imunossupressora, doenças imunodeficientes, condições socioeconômicas de vida e estado nutricional dos pacientes também desempenham um papel na progressão da doença. Além do exposto, a inflamação e o estresse oxidativo também são fatores etiológicos importantes no desenvolvimento da SIL. Ou seja, alterações malignas no colo do útero não aparecem em um colo do útero completamente saudável, mas estão sempre associadas à cervicite crônica.

O ácido alfa-lipóico (ALA) é um ácido graxo não essencial com inúmeras funções metabólicas e seu potencial terapêutico está sendo investigado em muitas condições fisiopatológicas. Além de atuar como cofator de inúmeras vias de sinalização na célula, o ALA também possui um potencial redox padrão de -0,32 V, o que lhe confere a capacidade de regenerar os antioxidantes fisiológicos mais importantes in vivo (por exemplo, vitamina C e E) e o torna um dos antioxidantes naturais mais potentes. Dado que está implicado como um modulador de várias vias de sinalização inflamatória, suas propriedades anti-inflamatórias foram investigadas por um grande número de estudos clínicos. T Esta impressionante variedade de funções celulares e moleculares levou a um interesse significativo na pesquisa e uso do ALA como suplemento dietético. Foi comprovado que o ALA melhora a resistência à insulina, alivia os sintomas da neuropatia diabética, combina com a fototerapia no tratamento do vitiligo, melhora a cicatrização de feridas e aumenta a eficácia das dietas de redução. Seu uso como suplemento dietético está sendo investigado na demência, síndrome da boca ardente, síndrome do carpo, glaucoma, catarata, hipertensão e doença arterial periférica. Para fins terapêuticos, o ALA é administrado por via oral em doses de 300-1800 mg/dia, e para algumas indicações sua administração tópica e parenteral tem sido investigada. A segurança da administração oral nas doses mencionadas foi investigada em muitos estudos clínicos com duração de 4 meses a 4 anos. A eficácia do ALA em alterações pré-malignas do colo do útero não foi investigada até o momento. Considerando a eficácia comprovada da suplementação oral com outros antioxidantes (como polifenóis do chá verde ou Se) em pacientes com LSIL, o objetivo desta pesquisa é investigar, pela primeira vez, a eficácia do ALA na regressão da LSIL.

O estudo foi concebido como um ensaio duplo-cego, randomizado, controlado por placebo, onde os participantes foram solicitados a auto-administrar 600 mg de ALA na forma de 2 cápsulas contendo 300 mg de ALA (doados por Zada ​​Pharmaceuticals, Lukavac, Bósnia e Herzegovina) ou um placebo (fornecido como cápsulas orais idênticas contendo amido de arroz, também doado pela Zada ​​Pharmaceuticals) por via oral diariamente durante 3 meses. O protocolo de pesquisa para este estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética da Universidade de Zagreb, Faculdade de Farmácia e Bioquímica e pelo Comitê de Ética do University Clinical Center Tuzla. O ensaio foi realizado de acordo com as diretrizes internacionais, nacionais e institucionais referentes a estudos clínicos e direitos da biodiversidade e atendeu às diretrizes CONSORT.

Na consulta inicial, os pacientes elegíveis foram apresentados ao desenho do estudo. Eles foram informados sobre o protocolo do estudo: objetivo e propósito do estudo, metodologia geral, papéis esperados dos participantes, riscos potenciais de participar do estudo, benefícios potenciais da participação no estudo, questões de confidencialidade de dados e detalhes de contato de investigadores que, quando necessário, forneceram qualquer tipo de informação adicional necessária. Caso o paciente concordasse em participar do estudo, eles assinaram o termo de consentimento informado. Todos os participantes foram convidados a dar o seu consentimento informado por escrito para a inclusão no estudo. Após a inclusão no estudo, os pacientes preencheram um questionário inicial e forneceram informações sobre características antropométricas básicas, histórico reprodutivo, medicação atual e principais características do estilo de vida (tabagismo, nível de atividade física). O exame dos hábitos alimentares e de vida dos pacientes foi realizado por meio de um questionário semiquantitativo de freqüência alimentar (FFQ) padronizado e validado com a ajuda de uma equipe treinada. Os pacientes foram aconselhados a não mudar sua dieta durante o estudo.

Os participantes foram randomizados na proporção de 1:1 para ALA:placebo. Os pacientes receberam aleatoriamente um número de paciente que determinou a alocação do suplemento. Eles receberam dois frascos de cápsulas pré-etiquetadas com o número do estudo contendo cápsulas de ALA suficientes para 3 meses de suplementação ou cápsulas idênticas de placebo (amido de arroz) suficientes para 3 meses de suplementação. Os pacientes foram solicitados a devolver as cápsulas restantes após o período de 3 meses para avaliar a adesão. Durante o período de suplementação, os participantes foram contatados duas vezes por telefone por um membro da equipe de pesquisa para verificar possíveis efeitos adversos e melhorar a adesão. A adesão após a inscrição foi medida como a porcentagem de comprimidos tomados entre as visitas. Os indivíduos que tomaram menos de 75% das pílulas após a randomização foram considerados não aderentes e foram retirados do estudo. 3 meses após a entrada, os participantes foram convidados para uma consulta de acompanhamento.

Tanto na consulta inicial quanto na consulta de acompanhamento, triagem citológica, colposcopia e biópsia direcionada e confirmação histológica do diagnóstico citológico-colposcópico foram realizadas e amostras de sangue foram coletadas e analisadas (avaliação dos resultados primários e secundários do estudo). As amostras foram coletadas na Clínica de Ginecologia e Obstetrícia do University Clinical Center Tuzla durante um período de 18 meses. As análises das amostras foram realizadas no University Clinical Center Tuzla e na University of Zagreb, Faculdade de Farmácia e Bioquímica. O processamento estatístico, análise e interpretação dos resultados do estudo foram concluídos em 6 meses a partir do final da análise das amostras biológicas.

Os dados pessoais dos pacientes, dados sobre estilo de vida e hábitos alimentares (obtidos do QFA) e medidas dos desfechos primários e secundários do estudo foram armazenados e processados ​​em formato eletrônico do prontuário do paciente. Foi desenvolvido um dicionário de dados contendo descrições detalhadas de cada variável utilizada pelo registro, incluindo a origem da variável. O registro foi operado de acordo com os procedimentos operacionais padrão do University Clinical Center Tuzla. O gerente do projeto e seus associados foram obrigados a cumprir integralmente os procedimentos prescritos para a proteção de dados pessoais. Os dados dos pacientes foram inseridos nos bancos de dados do projeto de acordo com as iniciais e sobrenomes dos pacientes e usando um código especial. Sua documentação médica era revisada apenas pelo gerente do projeto e seus associados, e o nome dos pacientes nunca era revelado a terceiros. A documentação dos pacientes foi acessível aos representantes do Comitê de Ética da instituição onde o estudo clínico foi realizado (University Clinical Center Tuzla) e aos representantes do Comitê de Ética do Trabalho Experimental da Faculdade de Farmácia e Bioquímica da Universidade de Zagreb, que é responsável por aprovar e supervisionar a condução desta pesquisa.

A randomização em bloco dos pacientes foi realizada para garantir o equilíbrio usando um programa de computador interno. Para determinar o tamanho da amostra, uma fórmula de tamanho de amostra de ensaio clínico randomizado foi usada, onde o erro tipo um (α) foi estabelecido em 5% e o poder do estudo foi estabelecido em 90%. A proporção de caso para controle foi de 1 e o abandono esperado foi de 2%. LSIL foi o principal desfecho do estudo; a proporção esperada de LSIL no grupo de controle foi de 50% e no grupo tratado de 40%. Assumindo um abandono de 2%, o tamanho da amostra alvo foi determinado em 96 (48 indivíduos por grupo). Os resultados da pesquisa (qualificação das lesões do epitélio escamoso cervical, parâmetros de inflamação, parâmetros de estresse oxidativo) foram processados ​​estatisticamente usando o pacote de software MedCalc. As características básicas das variáveis ​​foram testadas por meio de análise descritiva. A normalidade da distribuição dos dados foi testada por meio do teste de Kolmogorov-Smirnov, e testes estatísticos paramétricos ou não paramétricos foram utilizados para posterior análise dos resultados.