Keuhkoputken epiteelin mallintaminen vaikeassa astmassa ihmisen aiheuttamilla pluripotenteilla kantasoluilla (iPSC) (MOSAIC)
Astma on vakava, kun sitä ei voida hallita suurimman annoksen inhaloitavilla hoidoilla, samalla kun rinnakkaisten sairauksien ja muiden aiheuttavien tai pahentavien tekijöiden hoito on optimoitu. Allerginen bronkopulmonaalinen aspergilloosi (ABPA) on monimutkainen bronkopulmonaalinen sairaus, joka johtuu Aspergillus Fumigatusta vastaan tulevista immunologisista reaktioista.
Kroonista keuhkosairautta sairastavien potilaiden keuhkoputken epiteelin mallin kehittäminen mahdollistaa keuhkoputken kudoksen mallintamisen näiden limatulppien muodostumisen ymmärtämiseksi. Tämän tutkimuksen tarkoituksena on vahvistaa tämä malli
Tutkijat ehdottavat seuraavien kokeiden perusteella kahden epiteelin hankkimisen ja vertaamisen mahdollistavuutta kahdessa populaatiossa:
Indusoidun pluripotentin kantasolukloonin (iPSC) erottaminen, joka on peräisin tyypin 2 tulehduksen (T2) vaikean astman ja allergisen bronkopulmonaarisen aspergilloosin (ABPA) verinäytteistä (perifeeriset veren mononukleaariset solut), jotta saadaan erilaistunut keuhkoputkien epiteeli in vitro.
Tutkimuksen yleiskatsaus
Tila
Interventio / Hoito
Yksityiskohtainen kuvaus
Astma on vakava, kun sitä ei voida hallita suurimman annoksen inhaloitavilla hoidoilla, samalla kun rinnakkaisten sairauksien ja muiden aiheuttavien tai pahentavien tekijöiden hoito on optimoitu. Allerginen bronkopulmonaalinen aspergilloosi (ABPA) on monimutkainen bronkopulmonaalinen sairaus, joka johtuu Aspergillus Fumigatusta vastaan tulevista immunologisista reaktioista.
Solu- ja molekyylitasolla vaikea astma ja ABPA ovat kroonisia keuhkoputkien sairauksia, joille on tunnusomaista tyypin 2 (T2) hengitysteiden tulehdus, keuhkoputkien sileän lihaksen liikakasvu, limasolujen metaplasian aiheuttama liiallinen limantuotanto ja epiteelin uusiutuminen. Tyypin 2 tulehdus astmassa on vallitseva ja sille on ominaista immuunisolujen, kuten eosinofiilien, syöttösolujen, T-auttaja 2 (Th2) -solujen, synnynnäisten tyypin 2 lymfoidisolujen (ILC2:t) ja dendriittisolujen, kerääntyminen.
Jatkuva hengitysteiden tukkeuma maksimaalisesta hoidosta huolimatta katsotaan tällä hetkellä suurimmaksi tyydyttämättömäksi lääketieteelliseksi tarpeeksi astman hoidossa. Fahy ja kollegat julkaisivat keskeisen asiakirjan vuonna 2018, joka saattaa selittää hengitysteiden tukkeutumisen. Rintakehän CT-skannauksilla he osoittivat limatulppien läsnäolon, jotka tukkivat kokonaan vakavien astmaatikoiden hengitysteiden segmentit. Nämä limatulpat liittyvät suureen määrään veressä kiertäviä eosinofiilejä.
Ei ole olemassa laajaa mallia vaikean astman ja ABPA:n mallintamiseksi. Tutkijat ehdottavat, että kehitetään keuhkoputken epiteeli, jossa on pluripotentteja kantasoluja (iPSC) ilma-neste-rajapinnassa nimeltä iALI, joka on generoitu näistä potilaista. Tarkoituksena on mallintaa vaikeaa astmaa ja ABPA:ta ja erityisesti epiteeliä.
Toissijaiset tavoitteet, joihin pyritään vastaamaan, ovat:
- iPSC-peräisen hengitysteiden epiteelin vertailu samasta potilaasta eristettyihin nenän epiteelisoluihin (nenäharja).
- Karakterioida iPSC-peräisen hengitysteiden epiteelin fenotyyppi ABPA- ja T2-vaikeasta astmapotilaalta verrattuna terveeseen kontrolliin.
- iPSC:n eriyttäminen kypsiksi eosinofiileiksi
- Epiteelin yhteisviljely iPSC-peräisten eosinofiilien kanssa
- IPSC-peräisen hengitysteiden epiteelin viljely Charcot-Leyden-kiteellä
- Osoita, että iPSC:n saaminen perifeerisestä verinäytteestä on mahdollista.
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Todellinen)
Vaihe
- Ei sovellettavissa
Yhteystiedot ja paikat
Opiskelupaikat
-
-
-
Montpellier, Ranska, 34295
- University hospital of Montpellier
-
-
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
- Tupakointi < 10 BP ja vieroitettu > 1 vuosi.
Diagnostiset kriteerit vaikealle astmalle ryhmä T2:
- Lääkärin diagnosoima vaikea astma (GINA-kriteerien mukaan)
- Potilas, joka on saanut suuria annoksia inhaloitavaa kortikosteroidia (ICS 1000 µg beklometasoniekvivalenttia) ja beeta-agonisteja vähintään 6 kuukauden ajan ennen sisällyttämistä
- Veren eosinofilia historiassa (edelliset vuodet) > 300/mm3
Diagnostiset kriteerit allergisen bronkopulmonaarisen aspergilloosin (ABPA) ryhmälle
- ABPA:n diagnoosi määritellään seuraavilla kolmella pakollisella kriteerillä:
- Lääkärin tekemä astmadiagnoosi vähintään 12 kuukauden ajan Global Initiative for Asthma (GINA) -ryhmän vuoden 2019 suositusten perusteella
- Todisteet yliherkkyydestä Aspergillus Fumigatukselle ihotestillä (seulonnassa tai aikaisemmalla dokumentoidulla positiivisella ihotestillä viimeisen 12 kuukauden aikana) tai seerumin immunoglobuliini E (IgE) -spesifisillä vasta-aineilla A. Fumigatukselle (≥ 0,35 kUnit/l) seulonnassa.
- Kohonnut seerumin kokonais-IgE (> 1000 IU/ml). Jos ABPA:n diagnoosin kolme lisäkriteeriä (alla) täyttyvät, IgE-taso ≤ 1 000 IU/ml on hyväksyttävä. Jos potilas saa suun kautta otettavia kortikosteroideja (OC) seulonnassa, aiempi dokumentoitu IgE-taso >1000 IU/ml viimeisen 12 kuukauden ajalta on hyväksyttävä.
Ja vähintään 2 seuraavista lisäkriteereistä:
- Veren eosinofiilien määrä >500 solua/μl seulonnassa potilailla, jotka eivät saa OC:ta seulonnassa. Potilailla, jotka ovat saaneet OC:ta seulonnassa, veren eosinofiilien määrä > 500 solua/μl seulonnassa tai dokumentoitu aikaisempi eosinofiilien määrä > 500 solua/μl viimeisen 12 kuukauden aikana.
- Saostuvien vasta-aineiden tai seerumin immunoglobuliini G:n (IgG) läsnäolo A. Fumigatusta vastaan seulonnassa.
- Dokumentoidut ABPA:n mukaiset radiologiset poikkeavuudet (kuten ohimenevä limakalvotukos, hypertiheä lima [limatulppien suuri vaimennus], sentro-lobulaaristen kyhmyjen sameudet limatulppien heikkeneminen], sentro-lobulaaristen kyhmyjen opasiteetti, telektaasi, keuhkoputkentulehdus jne. rintakehän röntgenkuvaus tai korkearesoluutioinen tietokonetomografia (HR-CT) viimeisen 18 kuukauden aikana tai seulonnassa.
Poissulkemiskriteerit:
- Muut siihen liittyvät hengityselinten sairaudet (esim. krooninen obstruktiivinen keuhkosairaus (COPD), kystinen fibroosi)
- Potilas toisen protokollan määräämässä poissulkemisjaksossa
- Ranskan kansanterveyslain mukaan suojeltuja väestöryhmiä: synnyttävät, imettävät tai raskaana olevat naiset; oikeudellisen tai hallinnollisen päätöksen johdosta vapautetuista kohteista; Major suojattu lailla (kaikenlaisen holhouksen alla).
- Tietoisen suostumuksen puute
- Ei kansallisen sairausvakuutusjärjestelmän edunsaaja
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
- Ensisijainen käyttötarkoitus: Muut
- Jako: Ei käytössä
- Inventiomalli: Yksittäinen ryhmätehtävä
- Naamiointi: Ei mitään (avoin tarra)
Aseet ja interventiot
Osallistujaryhmä / Arm |
Interventio / Hoito |
|---|---|
|
Kokeellinen: Tukikelpoiset potilaat
|
Jokaiselle osallistujalle verinäyte ja nenäharja. Nenän harjaus mahdollistaa epiteelisolujen eristämisen, mikä toimii vertailuna verestä peräisin olevasta iPS:stä tuotetulle keuhkoputken kudokselle. Noin 14 ml:n verinäyte otetaan veren mononukleaarisolujen eristämiseksi ja jäädyttämiseksi, mikä mahdollistaa iPS:n muodostumisen.
Muut nimet:
|
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Toiminnallisen keuhkoputken epiteelin saanti iPSC:stä: kyllä/ei
Aikaikkuna: Päivä 0 + kulttuuri (poikkileikkaustutkimus)
|
Saatiinko toimiva keuhkoputken epiteeli potilaan indusoimista pluripotenteista kantasoluista verestä? (kyllä/ei) Vaikean T2-astmapotilaan ja ABPA-potilaan iPSC:n toiminnallisen keuhkoputkien epiteelin (iALI) saavuttaminen arvioidaan kvantifioimalla erilaistumismarkkerit immunofluoresenssilla, keuhkoputken epiteelin eheys mittaamalla trans-epiteeliresistenssi ( TEER), eritystoiminto mittaamalla musiinipitoisuudet (CCSP, MUC5AC ja MUC5B) ja analysoimalla ciliaarin syke
|
Päivä 0 + kulttuuri (poikkileikkaustutkimus)
|
Toissijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
IALI:n ja hengitysteiden epiteelisolujen transkriptomisen profiilin vertailu
Aikaikkuna: Päivä 0 + kulttuuri (poikkileikkaustutkimus)
|
vaikean T2 astmapotilaan ja ABPA-potilaan iPSC:n iALI:n transkriptomista profiilia verrataan samojen potilaiden nenäharjauksen hengitysteiden epiteelisolujen profiiliin.
|
Päivä 0 + kulttuuri (poikkileikkaustutkimus)
|
|
Vaikeista astmapotilaista ja terveistä koehenkilöistä saadun keuhkoputken epiteelin transkriptomisen profiilin vertailu
Aikaikkuna: Päivä 0 + kulttuuri (poikkileikkaustutkimus)
|
Vaikean T2-astmapotilaan ja ABPA-potilaan iPSC:n iALI:n transkriptomista profiilia verrataan terveiden koehenkilöiden vastaaviin.
|
Päivä 0 + kulttuuri (poikkileikkaustutkimus)
|
|
IPSC:n eriyttäminen kypsiksi eosinofiileiksi: kyllä/ei
Aikaikkuna: Päivä 0 + kulttuuri (poikkileikkaustutkimus)
|
Vaikean T2-astmapotilaan ja ABPA-potilaan iPSC:istä saatujen eosinofiilien karakterisointi spesifisten markkerien läsnäololla virtaussytometrian, immunohistokemian ja immunofluoresenssin avulla
|
Päivä 0 + kulttuuri (poikkileikkaustutkimus)
|
|
Immuunisolujen/keuhkoputken epiteelin dialogin arviointi
Aikaikkuna: Päivä 0 + kulttuuri (poikkileikkaustutkimus)
|
Epiteelin yhteisviljely iPSC-peräisten eosinofiilien kanssa ja immuunisolujen ja keuhkoputkien epiteelin vuoropuhelu eosinofiilien yhteisviljelyssä iALI:n kanssa arvioidaan aktivoimalla eosinofiilit kosketuksissa epiteelin kanssa sekä karakterisoimalla ja tutkimalla sen fenotyyppiä. paljastunut epiteeli
|
Päivä 0 + kulttuuri (poikkileikkaustutkimus)
|
|
IPSC:n saaminen ääreisveren näytteenotosta: kyllä/ei
Aikaikkuna: Päivä 0 + kulttuuri (poikkileikkaustutkimus)
|
Verestä peräisin olevien iPSC-linjojen määrittely morfologian, viljelykäyttäytymisen, karyotyypin ja spesifisten markkerien ilmentymisen perusteella
|
Päivä 0 + kulttuuri (poikkileikkaustutkimus)
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Sponsori
Tutkijat
- Päätutkija: Anne Sophie GAMEZ, MD, University Hospital, Montpellier
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus (Todellinen)
Ensisijainen valmistuminen (Todellinen)
Opintojen valmistuminen (Todellinen)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (Todellinen)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Arvioitu)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Avainsanat
Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja
- Immuunijärjestelmän sairaudet
- Hengitysteiden infektiot
- Infektiot
- Hengityselinten sairaudet
- Keuhkosairaudet
- Keuhkoputken sairaudet
- Keuhkosairaudet, obstruktiiviset
- Hengitysteiden yliherkkyys
- Yliherkkyys, välitön
- Yliherkkyys
- Bakteeri-infektiot ja mykoosit
- Keuhkosairaudet, sieni
- Mykoosit
- Keuhkojen aspergilloosi
- Aspergilloosi
- Astma
- Aspergilloosi, allerginen bronkopulmonaalinen
- Tutkintatekniikat
- Näytteenkäsittely
- Kliiniset laboratoriotekniikat
- Diagnostiikkatekniikat ja menettelyt
- Diagnoosi
- Puhkaisut
- Kirurgiset toimenpiteet, operatiivinen
- Verinäytteen kokoelma
Muut tutkimustunnusnumerot
- RECHMPL22_0384
- 2022-A02059-34 (Rekisterin tunniste: ID-RCB)
Yksittäisten osallistujien tietojen suunnitelma (IPD)
Aiotko jakaa yksittäisten osallistujien tietoja (IPD)?
IPD-suunnitelman kuvaus
Yleisenä tavoitteena on saattaa tutkimusaineisto kiinnostuneiden tutkijoiden saataville sekä todisteita tutkimuksen läpinäkyvyydestä. Tiedot luovutetaan henkilöille, jotka esittävät kohtuullisen pyynnön tutkimuksen johtajalle.
Yksittäisten osallistujien tiedoista (ja mukana tulevasta datasanakirjasta) tunnistetaan ja niitä mahdollisesti puhdistetaan tai yhdistetään edelleen, jos tutkijat pitävät tarpeellisena osallistujien anonymiteetin suojaamiseksi.
IPD-jaon aikakehys
IPD-jaon käyttöoikeuskriteerit
Ehdot, joilla yleisölle myönnetään pääsy tietokokonaisuuksiin, ovat:
- Tietoja käytetään/tutkitaan voittoa tavoittelemattomalla tavalla;
- Tietoja ei käytetä osallistujan tai osallistujaryhmän tunnistamiseen;
- Käyttäjä ei työskentele yksityisessä vakuutusyhtiössä;
- Tietoja ei käytetä minkäänlaisen yksityisen vakuutuksen tai terveysrangaistusten tukemiseen;
- Tietoja käytetään/tutkitaan tieteen/opetuksen edistämiseen osallistujien/potilaiden yksityisyyttä ja oikeuksia kunnioittaen;
- Käyttäjä ilmoittaa, miksi hän haluaa käyttää tietoja.
IPD-jakamista tukeva tietotyyppi
- STUDY_PROTOCOL
Lääke- ja laitetiedot, tutkimusasiakirjat
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää lääkevalmistetta
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää laitetuotetta
Yhdysvalloissa valmistettu ja sieltä viety tuote
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .