Моделирование бронхиального эпителия при тяжелой астме с помощью индуцированных человеком плюрипотентных стволовых клеток (ИПСК) (MOSAIC)
Бронхиальная астма считается тяжелой, если ее нельзя контролировать с помощью максимальных доз ингаляционной терапии, в то время как лечение сопутствующих заболеваний и других провоцирующих или усугубляющих факторов было оптимизировано. Аллергический бронхолегочный аспергиллез (АБЛА) — сложное бронхолегочное заболевание, возникающее в результате иммунологических реакций против Aspergillus Fumigatus.
Разработка модели бронхиального эпителия, созданного у пациентов с хроническим заболеванием легких, позволит моделировать бронхиальную ткань, чтобы понять образование этих слизистых пробок. Это исследование направлено на проверку этой модели
Исследователи предлагают проверить возможность получения и сравнения двух эпителиев в двух популяциях на основе следующих экспериментов:
Дифференцировка клона индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (ИПСК), полученного из образца крови (мононуклеарные клетки периферической крови) воспаления 2 типа (Т2), тяжелой астмы и аллергического бронхолегочного аспергиллеза (АБЛА), с целью получения дифференцированного бронхиального эпителия in vitro.
Обзор исследования
Статус
Вмешательство/лечение
Подробное описание
Бронхиальная астма считается тяжелой, если ее нельзя контролировать с помощью максимальных доз ингаляционной терапии, в то время как лечение сопутствующих заболеваний и других провоцирующих или усугубляющих факторов было оптимизировано. Аллергический бронхолегочный аспергиллез (АБЛА) — сложное бронхолегочное заболевание, возникающее в результате иммунологических реакций против Aspergillus Fumigatus.
На клеточном и молекулярном уровне тяжелая астма и АБЛА представляют собой хронические заболевания бронхов, характеризующиеся воспалением дыхательных путей типа 2 (Т2), гиперплазией гладкой мускулатуры бронхов, избыточной продукцией слизи за счет метаплазии слизистых клеток и ремоделированием эпителия. Воспаление типа 2 при астме является преобладающим и характеризуется накоплением иммунных клеток, таких как эозинофилы, тучные клетки, Т-хелперы 2 (Th2) клетки, врожденные лимфоидные клетки типа 2 (ILC2) и дендритные клетки.
Стойкая обструкция дыхательных путей, несмотря на максимальную терапию, в настоящее время считается самой большой неудовлетворенной медицинской потребностью в лечении астмы. Fahy и его коллеги опубликовали ключевую статью в 2018 году, которая может объяснить обструкцию дыхательных путей. Используя компьютерную томографию грудной клетки, они продемонстрировали наличие слизистых пробок, которые полностью закупоривают сегменты дыхательных путей у тяжелых астматиков. Эти слизистые пробки связаны с большим количеством циркулирующих эозинофилов в крови.
Не существует крупномасштабной модели для моделирования тяжелой астмы и АБЛА. Исследователи предлагают разработать бронхиальный эпителий с плюрипотентными стволовыми клетками (iPSC) в воздушно-жидкостном интерфейсе, называемый iALI, полученный от этих пациентов, с целью моделирования тяжелой астмы и ABPA и, в частности, эпителия.
Второстепенные цели, на которые направлен ответ:
- Сравнение эпителия дыхательных путей, полученного из иПСК, с эпителиальными клетками носа, выделенными у того же пациента (назальная щеточка).
- Охарактеризовать фенотип эпителия дыхательных путей, полученного из иПСК, у пациента с тяжелой астмой ABPA и T2 по сравнению со здоровым контролем.
- Дифференцировка иПСК в зрелые эозинофилы
- Совместная культура эпителия с эозинофилами, полученными из ИПСК.
- Культура эпителия дыхательных путей, полученного из иПСК, с кристаллом Шарко-Лейдена
- Продемонстрировать возможность получения иПСК из образцов периферической крови.
Тип исследования
Регистрация (Действительный)
Фаза
- Непригодный
Контакты и местонахождение
Места учебы
-
-
-
Montpellier, Франция, 34295
- University hospital of Montpellier
-
-
Критерии участия
Критерии приемлемости
Возраст, подходящий для обучения
Принимает здоровых добровольцев
Описание
Критерии включения:
- Курение < 10 лет назад и отлучение от груди > 1 года.
Диагностические критерии тяжелой астмы группы Т2:
- Тяжелая астма в анамнезе, диагностированная врачом (согласно критериям GINA)
- Субъект, принимающий высокие дозы ингаляционных кортикостероидов (ИГКС 1000 мкг эквивалента беклометазона) и бета-агонистов в течение не менее 6 месяцев до включения
- Эозинофилия крови в анамнезе (предыдущие годы) > 300/мм3
Диагностические критерии группы аллергического бронхолегочного аспергиллеза (АБЛА)
- Диагноз АБЛА определяется следующими 3 обязательными критериями:
- Диагноз астмы врачом в течение не менее 12 месяцев на основании рекомендаций группы Глобальной инициативы по борьбе с астмой (GINA) от 2019 г.
- Доказательства гиперчувствительности к Aspergillus Fumigatus кожным тестом (при скрининге или ранее документально подтвержденным положительным кожным тестом в течение последних 12 месяцев) или специфическими антителами сывороточного иммуноглобулина Е (IgE) к A. Fumigatus (≥ 0,35 кЕд/л) при скрининге.
- Повышенный общий сывороточный IgE (> 1000 МЕ/мл). Если соблюдаются 3 дополнительных критерия для диагностики АБЛА (см. ниже), допустим уровень IgE ≤ 1000 МЕ/мл. Если пациент получает пероральные кортикостероиды (ОК) во время скрининга, ранее подтвержденный уровень IgE >1000 МЕ/мл в течение последних 12 месяцев является приемлемым.
И не менее 2 из следующих вспомогательных критериев:
- Количество эозинофилов в крови > 500 клеток/мкл при скрининге у пациентов, не получавших ОК во время скрининга. Для пациентов, получающих ОК при скрининге, количество эозинофилов в крови > 500 клеток/мкл при скрининге или задокументированное предшествующее количество эозинофилов > 500 клеток/мкл за последние 12 месяцев.
- Наличие преципитирующих антител или сывороточного иммуноглобулина G (IgG) к A. Fumigatus при скрининге.
- Документально подтвержденные рентгенологические аномалии, соответствующие АБЛА (такие как транзиторное мукоидное закупоривание, гиперплотная слизь [сильное ослабление слизистых пробок], помутнение центролобулярных узелков, ослабление слизистых пробок], затемнение центролобулярных узелков, телеэктазы, бронхоэктазы и т. д.) рентген грудной клетки или компьютерная томография высокого разрешения (HR-CT) в течение последних 18 месяцев или при скрининге.
Критерий исключения:
- Другие сопутствующие респираторные заболевания (например, хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ), кистозный фиброз)
- Пациент в период исключения, определенный другим протоколом
- Защищенные группы населения в соответствии с французским кодексом общественного здравоохранения: роженицы, кормящие или беременные женщины; субъекты, лишенные свободы по судебному или административному решению; Майор охраняется законом (под любой формой опеки).
- Отсутствие информированного согласия
- Небенефициар национальной системы медицинского страхования
Учебный план
Как устроено исследование?
Детали дизайна
- Основная цель: Другой
- Распределение: Н/Д
- Интервенционная модель: Одногрупповое задание
- Маскировка: Нет (открытая этикетка)
Оружие и интервенции
Группа участников / Армия |
Вмешательство/лечение |
|---|---|
|
Экспериментальный: Подходящие пациенты
|
Образец крови и носовая щетка для каждого участника. Чистка носа позволит выделить эпителиальные клетки, которые будут служить для сравнения с бронхиальной тканью, полученной из иПС крови. Образец крови объемом приблизительно 14 мл будет взят для выделения и замораживания мононуклеарных клеток крови, что позволит получить иПС.
Другие имена:
|
Что измеряет исследование?
Первичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Получение функционального бронхиального эпителия из ИПСК: да/нет
Временное ограничение: День 0 + посев (поперечное исследование)
|
Был ли получен функциональный бронхиальный эпителий из индуцированных пациентом плюрипотентных стволовых клеток из крови? (да/нет) Достижение функционального бронхиального эпителия (iALI) из иПСК пациента с тяжелой астмой T2 и пациента с ABPA будет оцениваться путем количественного определения маркеров дифференцировки с помощью иммунофлуоресценции, целостности бронхиального эпителия путем измерения трансэпителиальной резистентности ( TEER), секреторная функция путем измерения концентрации муцина (CCSP, MUC5AC и MUC5B) и анализа биения ресничек.
|
День 0 + посев (поперечное исследование)
|
Вторичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Сравнение транскриптомного профиля между iALI и эпителиальными клетками дыхательных путей
Временное ограничение: День 0 + посев (поперечное исследование)
|
транскриптомный профиль iALI из iPSCs пациента с тяжелой астмой T2 и пациента с ABPA будет сравниваться с профилем эпителиальных клеток дыхательных путей из носовой щетки от тех же пациентов
|
День 0 + посев (поперечное исследование)
|
|
Сравнение транскриптомного профиля бронхиального эпителия, полученного от пациентов с тяжелой астмой и от здоровых людей
Временное ограничение: День 0 + посев (поперечное исследование)
|
Транскриптомный профиль iALI из iPSCs пациента с тяжелой астмой T2 и пациента с ABPA будет сравниваться с таковым у здоровых субъектов.
|
День 0 + посев (поперечное исследование)
|
|
Дифференцировка иПСК в зрелые эозинофилы: да/нет
Временное ограничение: День 0 + посев (поперечное исследование)
|
Характеристика эозинофилов, полученных из ИПСК больного астмой Т2 и больного АБЛА, по наличию специфических маркеров с помощью проточной цитометрии, иммуногистохимии и иммунофлуоресценции
|
День 0 + посев (поперечное исследование)
|
|
Оценка диалога иммунных клеток/бронхиального эпителия
Временное ограничение: День 0 + посев (поперечное исследование)
|
Совместное культивирование эпителия с эозинофилами, полученными из ИПСК, и диалог иммунных клеток/бронхиального эпителия в совместном культивировании эозинофилов с иАЛИ будут оцениваться по активации эозинофилов в контакте с эпителием, а также по характеристике и изучению фенотипа обнаженный эпителий
|
День 0 + посев (поперечное исследование)
|
|
Получение ИПСК из забора периферической крови: да/нет
Временное ограничение: День 0 + посев (поперечное исследование)
|
Квалификация линий ИПСК крови по морфологии, культуральному поведению, кариотипу и экспрессии специфических маркеров
|
День 0 + посев (поперечное исследование)
|
Соавторы и исследователи
Спонсор
Следователи
- Главный следователь: Anne Sophie GAMEZ, MD, University Hospital, Montpellier
Даты записи исследования
Изучение основных дат
Начало исследования (Действительный)
Первичное завершение (Действительный)
Завершение исследования (Действительный)
Даты регистрации исследования
Первый отправленный
Впервые представлено, что соответствует критериям контроля качества
Первый опубликованный (Действительный)
Обновления учебных записей
Последнее опубликованное обновление (Оцененный)
Последнее отправленное обновление, отвечающее критериям контроля качества
Последняя проверка
Дополнительная информация
Термины, связанные с этим исследованием
Ключевые слова
Дополнительные соответствующие термины MeSH
- Заболевания иммунной системы
- Инфекции дыхательных путей
- Инфекции
- Заболевания дыхательных путей
- Легочные заболевания
- Бронхиальные заболевания
- Заболевания легких, обструктивные
- Респираторная гиперчувствительность
- Гиперчувствительность, немедленная
- Гиперчувствительность
- Бактериальные инфекции и микозы
- Заболевания легких, грибковые
- Микозы
- Легочный аспергиллез
- Аспергиллез
- Астма
- Аспергиллез, аллергический бронхолегочный
- Следственные методы
- Обработка образца
- Клинические лабораторные методы
- Диагностические методы и процедуры
- Диагноз
- Проколы
- Хирургические процедуры, оперативные
- Сбор образцов крови
Другие идентификационные номера исследования
- RECHMPL22_0384
- 2022-A02059-34 (Идентификатор реестра: ID-RCB)
Планирование данных отдельных участников (IPD)
Планируете делиться данными об отдельных участниках (IPD)?
Описание плана IPD
Общая цель состоит в том, чтобы сделать данные исследования доступными для заинтересованных исследователей, а также предоставить доказательства прозрачности исследования. Данные будут доступны лицам, обратившимся с разумным запросом к руководителю исследования.
Данные отдельных участников (и сопровождающий словарь данных) будут деидентифицированы и, возможно, подвергнуты дальнейшей очистке или агрегированию, если исследователи сочтут это необходимым для защиты анонимности участников.
Сроки обмена IPD
Критерии совместного доступа к IPD
Условия, при которых представителям общественности будет предоставлен доступ к наборам данных:
- Данные будут использоваться/проверяться в некоммерческих целях;
- Данные не будут использоваться для идентификации участника или группы участников;
- Пользователь не работает в частной страховой компании;
- Данные не будут использоваться для поддержки каких-либо частных страховых полисов или штрафов за здоровье;
- Данные будут использоваться/проверяться для развития науки/обучения с соблюдением конфиденциальности и прав участников/пациентов;
- Пользователь укажет, почему он хочет получить доступ к данным.
Совместное использование IPD Поддерживающий тип информации
- STUDY_PROTOCOL
Информация о лекарствах и устройствах, исследовательские документы
Изучает лекарственный продукт, регулируемый FDA США.
Изучает продукт устройства, регулируемый Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США.
продукт, произведенный в США и экспортированный из США.
Эта информация была получена непосредственно с веб-сайта clinicaltrials.gov без каких-либо изменений. Если у вас есть запросы на изменение, удаление или обновление сведений об исследовании, обращайтесь по адресу register@clinicaltrials.gov. Как только изменение будет реализовано на clinicaltrials.gov, оно будет автоматически обновлено и на нашем веб-сайте. .