Modélisation de l'épithélium bronchique dans l'asthme sévère avec des cellules souches pluripotentes induites par l'homme (iPSC) (MOSAIC)
L'asthme est sévère lorsqu'il ne peut être contrôlé par des thérapies inhalées à dose maximale alors que la prise en charge des comorbidités et autres facteurs déclenchants ou aggravants a été optimisée. L'aspergillose broncho-pulmonaire allergique (ABPA) est une maladie broncho-pulmonaire complexe résultant de réactions immunologiques contre Aspergillus Fumigatus.
Le développement d'un modèle d'épithélium bronchique généré à partir de patients atteints d'une maladie pulmonaire chronique permettra la modélisation du tissu bronchique pour comprendre la formation de ces bouchons muqueux. Cette étude vise à valider ce modèle
Les chercheurs proposent de vérifier la faisabilité de l'obtention et de la comparaison de deux épithéliums dans deux populations à partir des expériences suivantes :
Différenciation d'un clone de cellules souches pluripotentes induites (iPSC) dérivé d'un échantillon de sang (cellules mononucléaires du sang périphérique) d'asthme sévère inflammatoire de type 2 (T2) et d'aspergillose bronchopulmonaire allergique (ABPA) afin d'obtenir des épithéliums bronchiques différenciés in vitro.
Aperçu de l'étude
Statut
Les conditions
Intervention / Traitement
Description détaillée
L'asthme est sévère lorsqu'il ne peut être contrôlé par des thérapies inhalées à dose maximale alors que la prise en charge des comorbidités et autres facteurs déclenchants ou aggravants a été optimisée. L'aspergillose broncho-pulmonaire allergique (ABPA) est une maladie broncho-pulmonaire complexe résultant de réactions immunologiques contre Aspergillus Fumigatus.
Au niveau cellulaire et moléculaire, l'asthme sévère et l'ABPA sont des maladies bronchiques chroniques caractérisées par une inflammation des voies respiratoires de type 2 (T2), une hyperplasie des muscles lisses bronchiques, une production excessive de mucus par métaplasie des cellules muqueuses et un remodelage épithélial. L'inflammation de type 2 dans l'asthme est prédominante et se caractérise par l'accumulation de cellules immunitaires, telles que les éosinophiles, les mastocytes, les cellules T-helper 2 (Th2), les cellules lymphoïdes innées de type 2 (ILC2) et les cellules dendritiques.
L'obstruction persistante des voies respiratoires malgré un traitement maximal est actuellement considérée comme le plus grand besoin médical non satisfait dans le traitement de l'asthme. Fahy et ses collègues ont publié un article clé en 2018 qui pourrait expliquer l'obstruction des voies respiratoires. À l'aide de tomodensitogrammes thoraciques, ils ont démontré la présence de bouchons muqueux qui obstruent complètement des segments des voies respiratoires des asthmatiques sévères. Ces bouchons muqueux sont associés à un nombre élevé d'éosinophiles circulants dans le sang.
Il n'existe pas de modèle à grande échelle pour modéliser l'asthme sévère et l'ABPA. Les chercheurs proposent de développer un épithélium bronchique avec des cellules souches pluripotentes (iPSC) à l'interface air-liquide appelé iALI généré à partir de ces patients dans le but de modéliser l'asthme sévère et l'ABPA et en particulier l'épithélium.
Les objectifs secondaires auxquels vise à répondre sont :
- Comparaison de l'épithélium des voies respiratoires dérivé de l'iPSC avec des cellules épithéliales nasales isolées du même patient (brosse nasale).
- Caractériser le phénotype de l'épithélium des voies respiratoires dérivé de l'iPSC d'un patient souffrant d'asthme sévère ABPA et T2, par rapport à un témoin sain.
- Différenciation des iPSC en éosinophiles matures
- Co culture de l'épithélium avec des éosinophiles dérivés d'iPSC
- Culture d'épithélium des voies respiratoires dérivé d'iPSC avec du cristal de Charcot-Leyden
- Démontrer la faisabilité d'obtenir des iPSC à partir d'un prélèvement de sang périphérique.
Type d'étude
Inscription (Réel)
Phase
- N'est pas applicable
Contacts et emplacements
Lieux d'étude
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Montpellier, France, 34295
- University hospital of Montpellier
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Critères de participation
Critère d'éligibilité
Âges éligibles pour étudier
Accepte les volontaires sains
La description
Critère d'intégration:
- Fumeur < 10 BP et sevré > 1 an.
Critères diagnostiques de l'asthme sévère groupe T2 :
- Antécédents d'asthme sévère diagnostiqué par un médecin (selon les critères GINA)
- Sujet sous corticoïde inhalé à forte dose (ICS 1000 µg équivalent béclométasone) et bêta-agonistes depuis au moins 6 mois avant l'inclusion
- Éosinophilie sanguine dans l'histoire (années précédentes) > 300/mm3
Critères diagnostiques du groupe Aspergillose broncho-pulmonaire allergique (ABPA)
- Diagnostic d'ABPA défini par les 3 critères obligatoires suivants :
- Diagnostic d'asthme par le médecin depuis au moins 12 mois sur la base des recommandations 2019 du groupe Global Initiative for Asthma (GINA)
- Preuve d'hypersensibilité à Aspergillus Fumigatus par test cutané (lors du dépistage ou test cutané positif documenté antérieur au cours des 12 derniers mois), ou anticorps sériques spécifiques de l'immunoglobuline E (IgE) contre A. Fumigatus (≥ 0,35 kunité/l) lors du dépistage.
- IgE sériques totales élevées (> 1000 UI/ml). Si les 3 critères auxiliaires pour le diagnostic d'ABPA (ci-dessous) sont remplis, un taux d'IgE ≤ 1 000 UI/ml est acceptable. Si le patient reçoit des corticostéroïdes oraux (CO) lors du dépistage, un taux d'IgE documenté antérieur > 1000 UI/ml au cours des 12 derniers mois est acceptable.
Et au moins 2 des critères annexes suivants :
- Nombre d'éosinophiles sanguins > 500 cellules/μl lors du dépistage pour les patients ne recevant pas de CO lors du dépistage. Pour les patients recevant des CO au moment du dépistage, nombre d'éosinophiles sanguins > 500 cellules/μl au moment du dépistage ou nombre d'éosinophiles antérieur documenté > 500 cellules/μl au cours des 12 derniers mois.
- Présence d'anticorps précipitants ou d'immunoglobulines G (IgG) sériques contre A. Fumigatus lors du dépistage.
- Anomalies radiologiques documentées compatibles avec l'ABPA (telles qu'impaction mucoïde transitoire, mucus hyperdense [forte atténuation des bouchons muqueux], opacités des nodules centro-lobulaires, atténuation des bouchons muqueux], opacités des nodules centro-lobulaires, télectasies, bronchectasies, etc.) par radiographie pulmonaire ou tomodensitométrie haute résolution (HR-CT) au cours des 18 derniers mois ou lors du dépistage.
Critère d'exclusion:
- Autres maladies respiratoires associées (par ex. maladie pulmonaire obstructive chronique (MPOC), fibrose kystique)
- Patient en période d'exclusion déterminée par un autre protocole
- Populations protégées selon le code de la santé publique : Femmes parturientes, allaitantes ou enceintes ; les sujets privés de liberté par décision judiciaire ou administrative ; Majeur protégé par la loi (sous toute forme de tutelle).
- Absence de consentement éclairé
- Non-bénéficiaire du système national d'assurance maladie
Plan d'étude
Comment l'étude est-elle conçue ?
Détails de conception
- Objectif principal: Autre
- Répartition: N / A
- Modèle interventionnel: Affectation à un seul groupe
- Masquage: Aucun (étiquette ouverte)
Armes et Interventions
Groupe de participants / Bras |
Intervention / Traitement |
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Expérimental: Patients éligibles
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Un échantillon de sang et une brosse nasale pour chaque participant. Le brossage nasal permettra l'isolement de cellules épithéliales qui serviront de comparaison pour le tissu bronchique produit à partir d'iPS dérivés du sang. Un échantillon de sang d'environ 14 ml sera prélevé pour l'isolement et la congélation des cellules mononucléaires sanguines permettant la génération d'iPS.
Autres noms:
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Que mesure l'étude ?
Principaux critères de jugement
Mesure des résultats |
Description de la mesure |
Délai |
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Obtention d'épithélium bronchique fonctionnel à partir d'iPSC : oui/non
Délai: Jour 0 + culture (étude transversale)
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Un épithélium bronchique fonctionnel a-t-il été obtenu à partir des cellules souches pluripotentes induites du sang du patient ? (oui/non) L'atteinte de l'épithélium bronchique fonctionnel (iALI) à partir des CSPi d'un patient asthmatique sévère T2 et d'un patient ABPA sera évaluée par la quantification des marqueurs de différenciation par immunofluorescence, l'intégrité de l'épithélium bronchique par la mesure de la résistance trans-épithéliale ( TEER), fonction sécrétoire par mesure des concentrations de mucine (CCSP, MUC5AC et MUC5B) et analyse du battement ciliaire
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Jour 0 + culture (étude transversale)
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Mesures de résultats secondaires
Mesure des résultats |
Description de la mesure |
Délai |
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Comparaison du profil transcriptomique entre iALI et les cellules épithéliales des voies respiratoires
Délai: Jour 0 + culture (étude transversale)
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le profil transcriptomique d'iALI à partir des iPSC d'un patient asthmatique sévère T2 et d'un patient ABPA sera comparé à celui des cellules épithéliales des voies respiratoires issues du brossage nasal des mêmes patients
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Jour 0 + culture (étude transversale)
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Comparaison du profil transcriptomique entre les épithéliums bronchiques issus de patients asthmatiques sévères et de sujets sains
Délai: Jour 0 + culture (étude transversale)
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Le profil transcriptomique d'iALI à partir des CSPi d'un patient asthmatique sévère T2 et d'un patient ABPA sera comparé à ceux de sujets sains
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Jour 0 + culture (étude transversale)
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Différenciation des iPSC en éosinophiles matures : oui/non
Délai: Jour 0 + culture (étude transversale)
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Caractérisation des éosinophiles obtenus à partir des CSPi d'un patient asthmatique sévère T2 et d'un patient ABPA par la présence de marqueurs spécifiques par cytométrie en flux, immunohistochimie et immunofluorescence
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Jour 0 + culture (étude transversale)
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Évaluation du dialogue cellules immunitaires/épithélium bronchique
Délai: Jour 0 + culture (étude transversale)
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La co-culture des épithéliums avec des éosinophiles dérivés d'iPSC et le dialogue cellule immunitaire/épithélium bronchique dans la co-culture d'éosinophiles avec iALI seront évalués par l'activation des éosinophiles au contact de l'épithélium et par la caractérisation et l'étude du phénotype des épithélium exposé
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Jour 0 + culture (étude transversale)
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Obtention d'iPSC à partir d'un prélèvement de sang périphérique : oui/non
Délai: Jour 0 + culture (étude transversale)
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Qualification des lignées iPSC dérivées du sang par morphologie, comportement de culture, caryotype et expression de marqueurs spécifiques
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Jour 0 + culture (étude transversale)
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Collaborateurs et enquêteurs
Parrainer
Les enquêteurs
- Chercheur principal: Anne Sophie GAMEZ, MD, University Hospital, Montpellier
Dates d'enregistrement des études
Dates principales de l'étude
Début de l'étude (Réel)
Achèvement primaire (Réel)
Achèvement de l'étude (Réel)
Dates d'inscription aux études
Première soumission
Première soumission répondant aux critères de contrôle qualité
Première publication (Réel)
Mises à jour des dossiers d'étude
Dernière mise à jour publiée (Estimé)
Dernière mise à jour soumise répondant aux critères de contrôle qualité
Dernière vérification
Plus d'information
Termes liés à cette étude
Mots clés
Termes MeSH pertinents supplémentaires
- Maladies du système immunitaire
- Infections des voies respiratoires
- Infections
- Maladies des voies respiratoires
- Maladies pulmonaires
- Maladies bronchiques
- Maladies pulmonaires obstructives
- Hypersensibilité respiratoire
- Hypersensibilité immédiate
- Hypersensibilité
- Infections bactériennes et mycoses
- Maladies pulmonaires, fongiques
- Mycoses
- Aspergillose pulmonaire
- Aspergillose
- Asthme
- Aspergillose allergique broncho-pulmonaire
- Techniques d'investigation
- Manipulation des échantillons
- Techniques de laboratoire clinique
- Techniques et procédures de diagnostic
- Diagnostic
- Perforation
- Procédures chirurgicales, opératoires
- Collection d'échantillons de sang
Autres numéros d'identification d'étude
- RECHMPL22_0384
- 2022-A02059-34 (Identificateur de registre: ID-RCB)
Plan pour les données individuelles des participants (IPD)
Prévoyez-vous de partager les données individuelles des participants (DPI) ?
Description du régime IPD
L'objectif général est de mettre les données de l'étude à la disposition des chercheurs intéressés ainsi que d'apporter la preuve de la transparence de l'étude. Les données seront mises à la disposition des personnes qui adressent une demande raisonnable au directeur de l'étude.
Les données individuelles des participants (et un dictionnaire de données qui l'accompagne) seront anonymisées et éventuellement nettoyées ou agrégées davantage si les enquêteurs le jugent nécessaire pour protéger l'anonymat des participants.
Délai de partage IPD
Critères d'accès au partage IPD
Les conditions dans lesquelles les membres du public auront accès aux ensembles de données sont :
- Les données seront utilisées/examinées de manière non lucrative ;
- Les données ne seront pas utilisées pour tenter d'identifier un participant ou un groupe de participants ;
- L'utilisateur ne travaille pas pour une compagnie d'assurance privée ;
- Les données ne seront pas utilisées à l'appui de tout type de police d'assurance privée ou de sanctions sanitaires ;
- Les données seront utilisées/examinées pour l'avancement de la science/de l'enseignement tout en respectant la vie privée et les droits des participants/patients ;
- L'utilisateur indiquera pourquoi il souhaite accéder aux données.
Type d'informations de prise en charge du partage d'IPD
- PROTOCOLE D'ÉTUDE
Informations sur les médicaments et les dispositifs, documents d'étude
Étudie un produit pharmaceutique réglementé par la FDA américaine
Étudie un produit d'appareil réglementé par la FDA américaine
produit fabriqué et exporté des États-Unis.
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