Modelowanie nabłonka oskrzeli w ciężkiej astmie za pomocą indukowanych przez człowieka pluripotencjalnych komórek macierzystych (iPSC) (MOSAIC)
Astma jest ciężka, gdy nie można jej kontrolować za pomocą terapii wziewnych z maksymalną dawką, podczas gdy leczenie chorób współistniejących i innych czynników wywołujących lub zaostrzających zostało zoptymalizowane. Alergiczna aspergiloza oskrzelowo-płucna (ABPA) jest złożoną chorobą oskrzelowo-płucną wynikającą z reakcji immunologicznych przeciwko Aspergillus fumigatus.
Opracowanie modelu nabłonka oskrzeli uzyskanego od pacjentów z przewlekłą chorobą płuc umożliwi modelowanie tkanki oskrzeli w celu zrozumienia powstawania tych czopów śluzowych. Niniejsze badanie ma na celu zweryfikowanie tego modelu
Badacze proponują zweryfikowanie wykonalności pozyskania i porównania dwóch nabłonków w dwóch populacjach na podstawie następujących eksperymentów:
Różnicowanie klonu indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych (iPSC) pochodzącego z próbki krwi (komórki jednojądrzaste krwi obwodowej) zapalenia typu 2 (T2) ciężkiej astmy i alergicznej aspergilozy oskrzelowo-płucnej (ABPA) w celu uzyskania zróżnicowanego nabłonka oskrzeli in vitro.
Przegląd badań
Status
Interwencja / Leczenie
Szczegółowy opis
Astma jest ciężka, gdy nie można jej kontrolować za pomocą terapii wziewnych z maksymalną dawką, podczas gdy leczenie chorób współistniejących i innych czynników wywołujących lub zaostrzających zostało zoptymalizowane. Alergiczna aspergiloza oskrzelowo-płucna (ABPA) jest złożoną chorobą oskrzelowo-płucną wynikającą z reakcji immunologicznych przeciwko Aspergillus fumigatus.
Na poziomie komórkowym i molekularnym ciężka astma i ABPA to przewlekłe choroby oskrzeli charakteryzujące się zapaleniem dróg oddechowych typu 2 (T2), przerostem mięśni gładkich oskrzeli, nadmierną produkcją śluzu w wyniku metaplazji komórek śluzowych i przebudową nabłonka. Zapalenie typu 2 w astmie jest dominujące i charakteryzuje się nagromadzeniem komórek odpornościowych, takich jak eozynofile, komórki tuczne, komórki T pomocnicze 2 (Th2), wrodzone komórki limfoidalne typu 2 (ILC2) i komórki dendrytyczne.
Utrzymująca się obturacja dróg oddechowych pomimo maksymalnego leczenia jest obecnie uważana za największą niezaspokojoną potrzebę medyczną w leczeniu astmy. Fahy i współpracownicy opublikowali w 2018 roku kluczowy artykuł, który może wyjaśniać niedrożność dróg oddechowych. Za pomocą tomografii komputerowej klatki piersiowej wykazali obecność czopów śluzowych, które całkowicie zatykają odcinki dróg oddechowych u osób z ciężką astmą. Te czopy śluzowe są związane z dużą liczbą krążących eozynofili we krwi.
Nie ma wielkoskalowego modelu do modelowania ciężkiej astmy i ABPA. Badacze proponują opracowanie nabłonka oskrzeli z pluripotencjalnymi komórkami macierzystymi (iPSC) w interfejsie powietrze-ciecz zwanym iALI wygenerowanym od tych pacjentów w celu modelowania ciężkiej astmy i ABPA, aw szczególności nabłonka.
Drugorzędne cele, na które należy odpowiedzieć, to:
- Porównanie nabłonka dróg oddechowych pochodzącego z iPSC z komórkami nabłonka nosa wyizolowanymi od tego samego pacjenta (szczoteczka do nosa).
- Aby scharakteryzować fenotyp nabłonka dróg oddechowych pochodzącego z iPSC od pacjenta z ABPA i ciężką astmą T2, w porównaniu ze zdrową kontrolą.
- Różnicowanie iPSC w dojrzałe eozynofile
- Wspólna hodowla nabłonka z eozynofilami pochodzącymi z iPSC
- Hodowla nabłonka dróg oddechowych pochodzącego z iPSC z kryształem Charcota-Leydena
- Wykazać wykonalność uzyskania iPSC z pobierania próbek krwi obwodowej.
Typ studiów
Zapisy (Rzeczywisty)
Faza
- Nie dotyczy
Kontakty i lokalizacje
Lokalizacje studiów
-
-
-
Montpellier, Francja, 34295
- University hospital of Montpellier
-
-
Kryteria uczestnictwa
Kryteria kwalifikacji
Wiek uprawniający do nauki
Akceptuje zdrowych ochotników
Opis
Kryteria przyjęcia:
- Palenie < 10 BP i odsadzenie od piersi > 1 rok.
Kryteria diagnostyczne dla grupy astmy ciężkiej T2:
- Historia ciężkiej astmy stwierdzonej przez lekarza (według kryteriów GINA)
- Pacjent leczony kortykosteroidem wziewnym w dużych dawkach (ICS 1000 µg ekwiwalentu beklometazonu) i beta-agonistami przez co najmniej 6 miesięcy przed włączeniem
- Eozynofilia we krwi w wywiadzie (poprzednie lata) > 300/mm3
Kryteria diagnostyczne dla grupy alergicznej aspergilozy oskrzelowo-płucnej (ABPA).
- Diagnoza ABPA zdefiniowana przez następujące 3 obowiązkowe kryteria:
- Rozpoznanie astmy przez lekarza od co najmniej 12 miesięcy na podstawie zaleceń grupy Global Initiative for Asthma (GINA) z 2019 roku
- Dowód nadwrażliwości na Aspergillus fumigatus w teście skórnym (w badaniu przesiewowym lub wcześniej udokumentowanym dodatnim teście skórnym w ciągu ostatnich 12 miesięcy) lub przeciwciał swoistych dla immunoglobuliny E (IgE) w surowicy przeciwko A. Fumigatus (≥ 0,35 kUnit/l) w badaniu przesiewowym.
- Podwyższone całkowite stężenie IgE w surowicy (> 1000 IU/ml). Jeśli spełnione są 3 dodatkowe kryteria rozpoznania ABPA (poniżej), poziom IgE ≤ 1000 IU/ml jest akceptowalny. Jeśli pacjent otrzymuje doustne kortykosteroidy (OC) podczas badania przesiewowego, akceptowalny jest wcześniej udokumentowany poziom IgE >1000 IU/ml w ciągu ostatnich 12 miesięcy.
Oraz co najmniej 2 z następujących kryteriów dodatkowych:
- Liczba eozynofili we krwi >500 komórek/μl podczas badania przesiewowego u pacjentów nieotrzymujących OC podczas badania przesiewowego. W przypadku pacjentów otrzymujących OC podczas badania przesiewowego liczba eozynofili we krwi > 500 komórek/μl podczas badania przesiewowego lub udokumentowana wcześniejsza liczba eozynofili > 500 komórek/μl w ciągu ostatnich 12 miesięcy.
- Obecność precypitujących przeciwciał lub immunoglobuliny G (IgG) w surowicy przeciwko A. Fumigatus podczas badania przesiewowego.
- Udokumentowane nieprawidłowości radiologiczne zgodne z ABPA (takie jak przejściowe zatrzymanie śluzówki, hipergęsty śluz [duże rozrzedzenie czopów śluzowych], zmętnienie guzków centralno-zrazikowych, osłabienie czopów śluzowych], zmętnienie guzków centralno-zrazikowych, telektazja, rozstrzenie oskrzeli itp.) przez RTG klatki piersiowej lub tomografia komputerowa wysokiej rozdzielczości (HR-CT) w ciągu ostatnich 18 miesięcy lub w trakcie badania przesiewowego.
Kryteria wyłączenia:
- Inne powiązane choroby układu oddechowego (np. przewlekła obturacyjna choroba płuc (POChP), mukowiscydoza)
- Pacjent w okresie wykluczenia określonym innym protokołem
- Populacje chronione zgodnie z francuskim kodeksem zdrowia publicznego: Kobiety rodzące, karmiące lub ciężarne; osoby pozbawione wolności decyzją sądową lub administracyjną; Major prawnie chroniony (pod jakąkolwiek formą kurateli).
- Brak świadomej zgody
- Niebeneficjent Narodowego Systemu Ubezpieczeń Zdrowotnych
Plan studiów
Jak projektuje się badanie?
Szczegóły projektu
- Główny cel: Inny
- Przydział: Nie dotyczy
- Model interwencyjny: Zadanie dla jednej grupy
- Maskowanie: Brak (otwarta etykieta)
Broń i interwencje
Grupa uczestników / Arm |
Interwencja / Leczenie |
|---|---|
|
Eksperymentalny: Kwalifikujący się pacjenci
|
Próbka krwi i szczoteczka do nosa dla każdego uczestnika. Szczotkowanie nosa pozwoli na wyizolowanie komórek nabłonka, które posłużą jako porównanie dla tkanki oskrzeli wytworzonej z krwiopochodnego iPS. Próbka krwi o objętości około 14 ml zostanie pobrana w celu wyizolowania i zamrożenia komórek jednojądrzastych krwi umożliwiających wytworzenie iPS.
Inne nazwy:
|
Co mierzy badanie?
Podstawowe miary wyniku
Miara wyniku |
Opis środka |
Ramy czasowe |
|---|---|---|
|
Uzyskanie funkcjonalnego nabłonka oskrzeli z iPSC: tak/nie
Ramy czasowe: Dzień 0 + kultura (badanie przekrojowe)
|
Czy funkcjonalny nabłonek oskrzeli uzyskano z indukowanych przez pacjenta pluripotencjalnych komórek macierzystych z krwi? (tak/nie) Osiągnięcie funkcjonalnego nabłonka oskrzeli (iALI) z iPSC pacjenta z ciężką astmą T2 i pacjenta z ABPA zostanie ocenione poprzez oznaczenie ilościowe markerów różnicowania za pomocą immunofluorescencji, integralność nabłonka oskrzeli poprzez pomiar oporności przeznabłonkowej ( TEER), funkcja wydzielnicza poprzez pomiar stężeń mucyny (CCSP, MUC5AC i MUC5B) oraz analiza rytmu rzęskowego
|
Dzień 0 + kultura (badanie przekrojowe)
|
Miary wyników drugorzędnych
Miara wyniku |
Opis środka |
Ramy czasowe |
|---|---|---|
|
Porównanie profilu transkryptomicznego między iALI a komórkami nabłonka dróg oddechowych
Ramy czasowe: Dzień 0 + kultura (badanie przekrojowe)
|
profil transkryptomiczny iALI z iPSC pacjenta z ciężką astmą T2 i pacjenta z ABPA zostanie porównany z profilem komórek nabłonka dróg oddechowych ze szczotkowania nosa od tych samych pacjentów
|
Dzień 0 + kultura (badanie przekrojowe)
|
|
Porównanie profilu transkryptomicznego między nabłonkiem oskrzeli wytworzonym od pacjentów z ciężką astmą i od osób zdrowych
Ramy czasowe: Dzień 0 + kultura (badanie przekrojowe)
|
Profil transkryptomiczny iALI z iPSC pacjenta z ciężką astmą T2 i pacjenta z ABPA zostanie porównany z profilem zdrowych osób
|
Dzień 0 + kultura (badanie przekrojowe)
|
|
Różnicowanie iPSC w dojrzałe eozynofile: tak/nie
Ramy czasowe: Dzień 0 + kultura (badanie przekrojowe)
|
Charakterystyka eozynofili uzyskanych z iPSC pacjenta z ciężką astmą T2 i pacjenta z ABPA na obecność specyficznych markerów za pomocą cytometrii przepływowej, immunohistochemii i immunofluorescencji
|
Dzień 0 + kultura (badanie przekrojowe)
|
|
Ocena dialogu komórek odpornościowych/nabłonka oskrzeli
Ramy czasowe: Dzień 0 + kultura (badanie przekrojowe)
|
Wspólna hodowla nabłonka z eozynofilami pochodzącymi z iPSC oraz dialog komórek odpornościowych/nabłonka oskrzeli we wspólnej hodowli eozynofili z iALI zostaną ocenione poprzez aktywację eozynofili w kontakcie z nabłonkiem oraz przez charakterystykę i badanie fenotypu odsłonięty nabłonek
|
Dzień 0 + kultura (badanie przekrojowe)
|
|
Uzyskanie iPSC z pobierania próbek krwi obwodowej: tak/nie
Ramy czasowe: Dzień 0 + kultura (badanie przekrojowe)
|
Kwalifikacja krwiopochodnych linii iPSC na podstawie morfologii, zachowania hodowli, kariotypu i ekspresji specyficznych markerów
|
Dzień 0 + kultura (badanie przekrojowe)
|
Współpracownicy i badacze
Sponsor
Śledczy
- Główny śledczy: Anne Sophie GAMEZ, MD, University Hospital, Montpellier
Daty zapisu na studia
Główne daty studiów
Rozpoczęcie studiów (Rzeczywisty)
Zakończenie podstawowe (Rzeczywisty)
Ukończenie studiów (Rzeczywisty)
Daty rejestracji na studia
Pierwszy przesłany
Pierwszy przesłany, który spełnia kryteria kontroli jakości
Pierwszy wysłany (Rzeczywisty)
Aktualizacje rekordów badań
Ostatnia wysłana aktualizacja (Szacowany)
Ostatnia przesłana aktualizacja, która spełniała kryteria kontroli jakości
Ostatnia weryfikacja
Więcej informacji
Terminy związane z tym badaniem
Słowa kluczowe
Dodatkowe istotne warunki MeSH
- Choroby układu odpornościowego
- Infekcje dróg oddechowych
- Infekcje
- Choroby Układu Oddechowego
- Choroby płuc
- Choroby oskrzeli
- Choroby płuc, obturacyjne
- Nadwrażliwość oddechowa
- Nadwrażliwość, natychmiastowa
- Nadwrażliwość
- Infekcje bakteryjne i grzybice
- Choroby płuc, grzybica
- Grzybice
- Aspergiloza płucna
- Aspergiloza
- Astma
- Aspergiloza, alergia oskrzelowo-płucna
- Techniki śledcze
- Prowadzenie okazów
- Techniki laboratoryjne kliniczne
- Techniki i procedury diagnostyczne
- Diagnoza
- Nakłucia
- Procedury chirurgiczne, operacyjny
- Zbiór okazów krwi
Inne numery identyfikacyjne badania
- RECHMPL22_0384
- 2022-A02059-34 (Identyfikator rejestru: ID-RCB)
Plan dla danych uczestnika indywidualnego (IPD)
Planujesz udostępniać dane poszczególnych uczestników (IPD)?
Opis planu IPD
Ogólnym celem jest udostępnienie danych z badania zainteresowanym naukowcom, a także przedstawienie dowodu przejrzystości badania. Dane będą udostępniane osobom, które zwrócą się z uzasadnionym wnioskiem do kierownika badania.
Indywidualne dane uczestników (i towarzyszący im słownik danych) zostaną zdeidentyfikowane i potencjalnie dalej czyszczone lub agregowane, jeśli śledczy uznają to za konieczne w celu ochrony anonimowości uczestników.
Ramy czasowe udostępniania IPD
Kryteria dostępu do udostępniania IPD
Warunki, na jakich obywatele uzyskają dostęp do zbiorów danych, są następujące:
- Dane będą wykorzystywane/badane w sposób non-profit;
- Dane nie będą wykorzystywane w celu identyfikacji uczestnika lub grupy uczestników;
- Użytkownik nie pracuje dla prywatnej firmy ubezpieczeniowej;
- Dane nie będą wykorzystywane do wspierania jakiejkolwiek prywatnej polisy ubezpieczeniowej lub kar zdrowotnych;
- Dane zostaną wykorzystane/zbadane w celu rozwoju nauki/nauki z poszanowaniem prywatności i praw uczestnika/pacjenta;
- Użytkownik określi, dlaczego chce uzyskać dostęp do danych.
Typ informacji pomocniczych dotyczących udostępniania IPD
- PROTOKÓŁ BADANIA
Informacje o lekach i urządzeniach, dokumenty badawcze
Bada produkt leczniczy regulowany przez amerykańską FDA
Bada produkt urządzenia regulowany przez amerykańską FDA
produkt wyprodukowany i wyeksportowany z USA
Te informacje zostały pobrane bezpośrednio ze strony internetowej clinicaltrials.gov bez żadnych zmian. Jeśli chcesz zmienić, usunąć lub zaktualizować dane swojego badania, skontaktuj się z register@clinicaltrials.gov. Gdy tylko zmiana zostanie wprowadzona na stronie clinicaltrials.gov, zostanie ona automatycznie zaktualizowana również na naszej stronie internetowej .