CT-DNA:n läsnäolon arvioiminen lymfoomaan liittyvässä HLH:ssa

Useat konstitutiiviset ja hankitut riskit laukaisevat HLH:n. Yleensä pikkulapsilla on perinnöllisiä T- ja NK-soluvaurioita, jotka heikentävät sytotoksista toimintaa, kun taas aikuiset kärsivät todennäköisimmin lymfoomasta, yleisimmin diffuusista B-solulymfoomasta (DLBCL), Hodgkin-lymfoomasta ja T-solulymfoomasta. Potilailla, joilla on taustalla oleva lymfooma, on huonoin eloonjäämisaste (West et al. J Intern Med 2021). Lymfooman diagnoosi on haastavaa vaikean sepsiksen kaltaisen esiintymisen vuoksi, joten CT-PET ja varhainen biopsia eivät ehkä ole mahdollisia. Potilaat, joilla on viivästynyt diagnoosi/ei diagnoosia, saavat usein empiiristä kemoterapiaa, joka viivästyttää diagnoosia, hoitaa puutteellisesti taustalla olevaa lymfoomaa ja mahdollisesti pahenee infektioita. Epidemiologiset tutkimukset eivät ole osoittaneet parantumista eloonjäämisessä HLH-potilailla, mutta ne ovat myös vahvistaneet diagnoosien määrän lisääntyneen merkittävästi (West et al. J Intern Med 2021). Parannukset nopeasti diagnosoitavissa lymfoomatapauksissa, jotka johtavat HLH:hen, johtaisivat parempiin tuloksiin nopeamman (immuno)kemoterapian antamisen ansiosta.

Kiertävä kasvain-DNA (ctDNA) on verestä eristettyä DNA:ta, joka on peräisin syöpäsolujen apoptoosista/nekroosista. ctDNA heijastaa koko kasvaimen genomia ja sitä kutsutaan "nestebiopsiaksi". Näitä tekniikoita tutkitaan useissa lymfoomissa, ja DLBCL-spesifiset mutaatiot voidaan havaita ja kvantifioida ctDNA:n avulla, ja tutkimuksissa käytetään kvantifiointia strategiana terapian seurannassa (Kurtz et al. J Clin Onc 2018). Vastaavasti ctDNA-mutaatioita voidaan tunnistaa Hodgkin-lymfoomassa (Spina et al Blood 2018) ja T-solulymfoomassa (Ottolini et al. Blood advances 2020).

Hyödyntämällä DLBCL Interim Response Evaluation for Customised Therapy (DIRECT) -tutkimuksen menestystä, Cambridgen olemassa olevaa infrastruktuuria käytetään toteutettavuustutkimuksen tekemiseen, jossa arvioidaan, onko HLH-potilaiden, joilla on taustalla oleva lymfooma, ctDNA elinkelpoinen diagnosoinnissa. HLH-potilaiden verinäytteistä uutetaan ja säilytetään ctDNA ja granulosyytit. Kun lymfooma on vahvistettu, biopsia pyydetään ja ctDNA, granulosyytit ja biopsia jokaiselta potilaalta tutkitaan käyttämällä matalaa koko genomin sekvensointia (WGS; 0,1x) ja erittäin herkkää, kohdennettua sekvensointipaneelia nimeltä LyVE-Seq (~2000x). . Tämä paneeli sisältää 122 geenin koodausalueita, jotka liittyvät DLBCL:n ohjaimiin, BCL6/MYC:n translokaatiopisteiden lisäksi. Muiden kuin DLBCL:ien osalta olemassa olevaa paneelia muutetaan sisältämään 150 geeniä, jotka mutatoituvat toistuvasti kaikissa lymfoomaalatyypeissä ja jotka on tilattu Twist Biosciencen kohdistetuksi paneeliksi.

Demografisia/laboratoriotietoja pyydetään ja ne integroidaan kliinisistä riskipisteistä, kasvaimen genotyypistä ja radiologiasta (CT/PET-CT) saatuihin tietoihin. Nämä korvaamattomat kliiniset näytteet säilytetään ja niitä voidaan käyttää tulevaan tutkimukseen, koska toistaiseksi ei ole tietoa ctDNA:sta pahanlaatuiseen HLH:n yhteydessä ja tutkimus on erittäin tutkiva.