Bedömning av närvaron av CT-DNA i lymfomassocierat HLH

En mängd olika konstitutiva och förvärvade risker utlöser HLH. I allmänhet har spädbarn ärftliga T- och NK-cellsdefekter som försämrar cytotoxisk funktion, medan vuxna är mest benägna att drabbas av lymfom, oftast diffust stort B-cellslymfom (DLBCL), Hodgkin-lymfom och T-cellslymfom. Patienter med underliggande lymfom har den sämsta överlevnaden (West et al J Intern Med 2021). Diagnos av lymfom är utmanande på grund av allvarlig sepsisliknande presentation, vilket innebär att CT-PET och tidig biopsi kanske inte är möjliga. Patienter med försenad/ingen diagnos får ofta empirisk kemoterapi, försenad diagnos, otillräcklig behandling av underliggande lymfom och potentiellt förvärrade infektioner. Epidemiologiska studier har misslyckats med att visa förbättringar i överlevnad hos patienter med HLH, samtidigt som de bekräftar en signifikant ökning av antalet diagnoser (West et al J Intern Med 2021). Förbättringar i att snabbt diagnostisera fall av lymfom som driver HLH skulle resultera i bättre resultat på grund av snabbare (immuno-)kemoterapiadministrering.

Cirkulerande tumör-DNA (ctDNA) är DNA isolerat från blod, som härrör från apoptos/nekros av cancerceller. ctDNA speglar hela tumörgenomet och kallas för en "vätskebiopsi". Dessa tekniker är under utredning i flera lymfom, och DLBCL-specifika mutationer kan detekteras och kvantifieras med hjälp av ctDNA, med studier som använder kvantifiering som en strategi för att övervaka respons på terapi (Kurtz et al J Clin Onc 2018). På liknande sätt kan ctDNA-mutationer identifieras i Hodgkins lymfom (Spina et al Blood 2018) och T-cellslymfom (Ottolini et al Blood advances 2020).

Med utnyttjande av framgången med DLBCL Interim Response Evaluation for Customized Therapy (DIRECT)-studien kommer befintlig infrastruktur i Cambridge att användas för att genomföra en genomförbarhetsstudie som bedömer om ctDNA från patienter med HLH med underliggande lymfom är lönsamt för att bidra till diagnoser. Blodprover från patienter med HLH kommer att få ctDNA och granulocyter extraherade och lagrade. När lymfom har bekräftats kommer biopsi att begäras och ctDNA, granulocyter och biopsi från varje patient kommer att förhöras med hjälp av ytlig genomsekvensering (WGS; 0,1x) och en högkänslig, riktad sekvenseringspanel kallad LyVE-Seq (~2000x) . Denna panel inkluderar kodande regioner av 122 gener som är inblandade som drivrutiner för DLBCL, förutom translokationshotspots för BCL6/MYC. För icke-DLBCL kommer den befintliga panelen att modifieras för att inkludera 150 gener som återkommande muterats över alla lymfomsubtyper, beställda som en fokuserad panel från Twist Bioscience.

Demografisk/laboratoriedata kommer att efterfrågas och kommer att integreras med information från kliniska riskpoäng, tumörgenotyp och radiologi (CT/PET-CT). Dessa ovärderliga kliniska prover kommer att lagras och kan användas för framtida forskning eftersom det hittills inte finns några data för ctDNA i samband med malignitetsassocierad HLH och studien är mycket utforskande.