Ocena obecności CT-DNA w HLH związanym z chłoniakiem

Różnorodność konstytutywnych i nabytych zagrożeń wyzwala HLH. Ogólnie rzecz biorąc, niemowlęta mają odziedziczone defekty komórek T i NK upośledzające funkcje cytotoksyczne, podczas gdy dorośli najprawdopodobniej cierpią na chłoniaka, najczęściej rozlanego chłoniaka z dużych komórek B (DLBCL), chłoniaka Hodgkina i chłoniaka T-komórkowego. Pacjenci z chłoniakiem podstawowym mają najgorsze wskaźniki przeżycia (West i wsp. J Intern Med 2021). Rozpoznanie chłoniaka jest trudne ze względu na ciężki przebieg przypominający posocznicę, co oznacza, że ​​CT-PET i wczesna biopsja mogą nie być możliwe. Pacjenci z opóźnioną diagnozą lub jej brakiem często otrzymują chemioterapię empiryczną, co opóźnia diagnozę, niewłaściwie leczy podstawowego chłoniaka i potencjalnie nasila infekcje. Badania epidemiologiczne nie wykazały poprawy przeżycia u pacjentów z HLH, jednocześnie potwierdzając znaczny wzrost liczby rozpoznań (West i wsp. J Intern Med 2021). Ulepszenia w szybkim diagnozowaniu przypadków chłoniaka kierującego HLH skutkowałyby lepszymi wynikami dzięki szybszemu podawaniu (immuno)chemioterapii.

Krążące DNA guza (ctDNA) to DNA wyizolowane z krwi, pochodzące z apoptozy/nekrozy komórek nowotworowych. ctDNA odzwierciedla cały genom guza i jest określany jako „płynna biopsja”. Techniki te są badane w kilku chłoniakach, a mutacje specyficzne dla DLBCL można wykryć i określić ilościowo za pomocą ctDNA, przy czym badania wykorzystują ocenę ilościową jako strategię monitorowania odpowiedzi na terapię (Kurtz i in. J Clin Onc 2018). Podobnie, mutacje ctDNA można zidentyfikować w chłoniaku Hodgkina (Spina i wsp. Blood 2018) i chłoniaku z komórek T (Ottolini i wsp. Zaliczki krwi 2020).

Wykorzystując sukces badania DLBCL Interim Response Evaluation for Customized Therapy (DIRECT), istniejąca infrastruktura w Cambridge zostanie wykorzystana do przeprowadzenia studium wykonalności oceniającego, czy ctDNA od pacjentów z HLH z chłoniakiem podstawowym może przyczynić się do diagnozy. Próbki krwi od pacjentów z HLH zostaną poddane ekstrakcji i przechowywaniu ctDNA i granulocytów. Po potwierdzeniu chłoniaka zostanie poproszona o biopsję, a ctDNA, granulocyty i biopsja od każdego pacjenta zostaną zbadane przy użyciu płytkiego sekwencjonowania całego genomu (WGS; 0,1x) i wysokoczułego, ukierunkowanego panelu sekwencjonowania zwanego LyVE-Seq (~2000x) . Ten panel zawiera regiony kodujące 122 genów zaangażowanych jako czynniki napędzające DLBCL, oprócz hotspotów translokacji dla BCL6 / MYC. W przypadku innych niż DLBCL istniejący panel zostanie zmodyfikowany tak, aby obejmował 150 genów podlegających powtarzającym się mutacjom we wszystkich podtypach chłoniaków, zamówionych jako ukierunkowany panel z firmy Twist Bioscience.

Wymagane będą dane demograficzne/laboratoryjne, które zostaną zintegrowane z informacjami z oceny ryzyka klinicznego, genotypu nowotworu i radiologii (CT/PET-CT). Te bezcenne próbki kliniczne będą przechowywane i mogą być wykorzystane do przyszłych badań, ponieważ do tej pory nie ma danych dotyczących ctDNA w kontekście HLH związanego z nowotworami złośliwymi, a badanie ma charakter wysoce eksploracyjny.