Avaliando a Presença de CT-DNA em HLH Associada a Linfoma

Uma variedade de riscos constitutivos e adquiridos desencadeiam HLH. Em geral, os bebês herdaram defeitos das células T e NK que prejudicam a função citotóxica, enquanto os adultos são mais propensos a sofrer de linfoma, mais comumente linfoma difuso de grandes células B (DLBCL), linfoma de Hodgkin e linfoma de células T. Pacientes com linfoma subjacente têm as piores taxas de sobrevivência (West et al J Intern Med 2021). O diagnóstico de linfoma é desafiador devido à apresentação semelhante à sepse grave, o que significa que CT-PET e biópsia precoce podem não ser possíveis. Pacientes com atraso/sem diagnóstico frequentemente recebem quimioterapia empírica, atrasando o diagnóstico, tratando inadequadamente o linfoma subjacente e potencialmente piorando as infecções. Estudos epidemiológicos falharam em mostrar melhorias na sobrevida em pacientes com HLH, ao mesmo tempo em que confirmaram um aumento significativo no número de diagnósticos (West et al J Intern Med 2021). Melhorias no diagnóstico rápido de casos de linfoma conduzindo HLH resultariam em melhores resultados devido à administração mais rápida de (imuno)quimioterapia.

DNA tumoral circulante (ctDNA) são DNAs isolados do sangue, originários da apoptose/necrose de células cancerígenas. O ctDNA reflete todo o genoma do tumor e é referido como uma "biópsia líquida". Essas técnicas estão sendo investigadas em vários linfomas, e mutações específicas de DLBCL podem ser detectadas e quantificadas usando ctDNA, com estudos usando a quantificação como estratégia para monitorar a resposta à terapia (Kurtz et al J Clin Onc 2018). Da mesma forma, as mutações do ctDNA podem ser identificadas no linfoma de Hodgkin (Spina et al Blood 2018) e linfoma de células T (Ottolini et al Blood advances 2020).

Aproveitando o sucesso do estudo DLBCL Interim Response Evaluation for Customized Therapy (DIRECT), a infraestrutura existente em Cambridge será usada para conduzir um estudo de viabilidade avaliando se o ctDNA de pacientes com HLH com linfoma subjacente é viável para contribuir com diagnósticos. Amostras de sangue de pacientes com HLH terão ctDNA e granulócitos extraídos e armazenados. Uma vez confirmado o linfoma, a biópsia será solicitada e o ctDNA, os granulócitos e a biópsia de cada paciente serão interrogados usando sequenciamento raso do genoma inteiro (WGS; 0,1x) e um painel de sequenciamento direcionado de alta sensibilidade denominado LyVE-Seq (~2000x) . Este painel inclui regiões de codificação de 122 genes implicados como condutores de DLBCL, além de hotspots de translocação para BCL6/MYC. Para não-DLBCL, o painel existente será modificado para incluir 150 genes com mutação recorrente em todos os subtipos de linfoma, ordenados como um painel focado da Twist Bioscience.

Dados demográficos/laboratoriais serão solicitados e serão integrados com informações de escores de risco clínico, genótipo tumoral e radiológico (CT/PET-CT). Essas valiosas amostras clínicas serão armazenadas e poderão ser usadas para pesquisas futuras, pois, até o momento, não há dados para ctDNA no contexto de HLH associada a malignidade e o estudo é altamente exploratório.