Valutazione della presenza di CT-DNA nell'HLH associato al linfoma

Una varietà di rischi costitutivi e acquisiti innescano HLH. In generale, i neonati hanno difetti ereditari delle cellule T e NK che compromettono la funzione citotossica, mentre gli adulti hanno maggiori probabilità di soffrire di linfoma, più comunemente linfoma diffuso a grandi cellule B (DLBCL), linfoma di Hodgkin e linfoma a cellule T. I pazienti con linfoma sottostante hanno i peggiori tassi di sopravvivenza (West et al J Intern Med 2021). La diagnosi di linfoma è difficile a causa della grave presentazione simile alla sepsi, il che significa che la TC-PET e la biopsia precoce potrebbero non essere possibili. I pazienti con diagnosi ritardata/nessuna ricevono frequentemente chemioterapia empirica, ritardando la diagnosi, trattando in modo inadeguato il linfoma sottostante e potenzialmente peggiorando le infezioni. Gli studi epidemiologici non sono riusciti a mostrare miglioramenti nella sopravvivenza nei pazienti con HLH, pur confermando un aumento significativo del numero di diagnosi (West et al J Intern Med 2021). I miglioramenti nella diagnosi rapida dei casi di linfoma che guidano l'HLH porterebbero a risultati migliori grazie a una più rapida somministrazione di chemioterapia (immuno-).

Il DNA tumorale circolante (ctDNA) è DNA isolato dal sangue, originato dall'apoptosi/necrosi delle cellule cancerose. Il ctDNA riflette l'intero genoma del tumore e viene definito "biopsia liquida". Queste tecniche sono in fase di studio in diversi linfomi e le mutazioni specifiche di DLBCL possono essere rilevate e quantificate utilizzando il ctDNA, con studi che utilizzano la quantificazione come strategia per monitorare la risposta alla terapia (Kurtz et al J Clin Onc 2018). Allo stesso modo, le mutazioni del ctDNA possono essere identificate nel linfoma di Hodgkin (Spina et al Blood 2018) e nel linfoma a cellule T (Ottolini et al Blood Advances 2020).

Sfruttando il successo dello studio DLBCL Interim Response Evaluation for Customized Therapy (DIRECT), l'infrastruttura esistente a Cambridge sarà utilizzata per condurre uno studio di fattibilità per valutare se il ctDNA di pazienti con HLH con linfoma sottostante sia fattibile nel contribuire alle diagnosi. I campioni di sangue di pazienti con HLH avranno ctDNA e granulociti estratti e conservati. Una volta confermato il linfoma, verrà richiesta la biopsia e il ctDNA, i granulociti e la biopsia di ciascun paziente verranno interrogati utilizzando il sequenziamento dell'intero genoma superficiale (WGS; 0,1x) e un pannello di sequenziamento mirato ad alta sensibilità chiamato LyVE-Seq (~ 2000x) . Questo pannello include regioni codificanti di 122 geni implicati come driver di DLBCL, oltre agli hotspot di traslocazione per BCL6/MYC. Per i non-DLBCL, il pannello esistente sarà modificato per includere 150 geni mutati in modo ricorrente in tutti i sottotipi di linfoma, ordinati come pannello mirato da Twist Bioscience.

Saranno richiesti dati demografici/di laboratorio e saranno integrati con informazioni provenienti da punteggi di rischio clinico, genotipo tumorale e radiologia (CT/PET-CT). Questi inestimabili campioni clinici saranno conservati e potranno essere utilizzati per ricerche future poiché, ad oggi, non ci sono dati per il ctDNA nel contesto dell'HLH associato a malignità e lo studio è altamente esplorativo.