Beurteilung des Vorhandenseins von CT-DNA bei Lymphom-assoziiertem HLH

Eine Vielzahl konstitutiver und erworbener Risiken lösen HLH aus. Im Allgemeinen haben Säuglinge vererbte T- und NK-Zell-Defekte, die die zytotoxische Funktion beeinträchtigen, während Erwachsene am häufigsten an Lymphomen leiden, am häufigsten an diffusem großzelligem B-Zell-Lymphom (DLBCL), Hodgkin-Lymphom und T-Zell-Lymphom. Patienten mit zugrundeliegendem Lymphom haben die schlechtesten Überlebensraten (West et al. J Intern Med 2021). Die Diagnose eines Lymphoms ist aufgrund der schweren Sepsis-ähnlichen Präsentation schwierig, was bedeutet, dass CT-PET und frühe Biopsie möglicherweise nicht möglich sind. Patienten mit verspäteter/kein Diagnose erhalten häufig empirische Chemotherapie, verzögern die Diagnose, behandeln das zugrunde liegende Lymphom unzureichend und können Infektionen verschlimmern. Epidemiologische Studien konnten keine Verbesserung des Überlebens bei Patienten mit HLH zeigen, während sie gleichzeitig eine signifikante Zunahme der Diagnosen bestätigten (West et al. J Intern Med 2021). Verbesserungen bei der schnellen Diagnose von Fällen von Lymphomen, die zu HLH führen, würden aufgrund einer schnelleren Verabreichung von (Immun-)Chemotherapien zu besseren Ergebnissen führen.

Zirkulierende Tumor-DNA (ctDNA) ist aus Blut isolierte DNA, die aus der Apoptose/Nekrose von Krebszellen stammt. ctDNA spiegelt das gesamte Tumorgenom wider und wird als „Liquid Biopsy“ bezeichnet. Diese Techniken werden bei mehreren Lymphomen untersucht, und DLBCL-spezifische Mutationen können mithilfe von ctDNA nachgewiesen und quantifiziert werden, wobei Studien die Quantifizierung als Strategie zur Überwachung des Ansprechens auf die Therapie verwenden (Kurtz et al. J Clin Onc 2018). In ähnlicher Weise können ctDNA-Mutationen beim Hodgkin-Lymphom (Spina et al. Blood 2018) und beim T-Zell-Lymphom (Otolini et al. Blood advances 2020) identifiziert werden.

Aufbauend auf dem Erfolg der DLBCL-Studie „Interim Response Evaluation for Customized Therapy (DIRECT)“ wird die vorhandene Infrastruktur in Cambridge genutzt, um eine Machbarkeitsstudie durchzuführen, in der bewertet wird, ob ctDNA von Patienten mit HLH mit zugrunde liegendem Lymphom einen Beitrag zu Diagnosen leisten kann. Aus Blutproben von Patienten mit HLH werden ctDNA und Granulozyten extrahiert und gelagert. Sobald das Lymphom bestätigt ist, wird die Biopsie angefordert und ctDNA, Granulozyten und Biopsie von jedem Patienten werden mittels flacher Gesamtgenomsequenzierung (WGS; 0,1x) und einem hochempfindlichen, gezielten Sequenzierungspanel namens LyVE-Seq (~2000x) abgefragt. . Dieses Panel umfasst kodierende Regionen von 122 Genen, die als Treiber von DLBCL involviert sind, zusätzlich zu Translokations-Hotspots für BCL6/MYC. Für Nicht-DLBCL wird das bestehende Panel so modifiziert, dass es 150 rekurrent mutierte Gene in allen Lymphom-Subtypen enthält, die als fokussiertes Panel von Twist Bioscience bestellt werden.

Demografische/Labordaten werden angefordert und mit Informationen aus klinischen Risikowerten, Tumorgenotyp und Radiologie (CT/PET-CT) integriert. Diese unschätzbaren klinischen Proben werden aufbewahrt und können für zukünftige Forschungsarbeiten verwendet werden, da bisher keine Daten für ctDNA im Zusammenhang mit HLH im Zusammenhang mit Malignität vorliegen und die Studie sehr explorativ ist.