Evaluación de la presencia de CT-DNA en HLH asociada a linfoma

Una variedad de riesgos constitutivos y adquiridos desencadenan HLH. En general, los bebés tienen defectos heredados de las células T y NK que afectan la función citotóxica, mientras que los adultos tienen más probabilidades de sufrir linfoma, más comúnmente linfoma difuso de células B grandes (DLBCL), linfoma de Hodgkin y linfoma de células T. Los pacientes con linfoma subyacente tienen las peores tasas de supervivencia (West et al J Intern Med 2021). El diagnóstico de linfoma es un desafío debido a la presentación grave similar a la sepsis, lo que significa que la CT-PET y la biopsia temprana pueden no ser posibles. Los pacientes con diagnóstico tardío o sin diagnóstico con frecuencia reciben quimioterapia empírica, lo que retrasa el diagnóstico, trata de manera inadecuada el linfoma subyacente y puede empeorar las infecciones. Los estudios epidemiológicos no han logrado mostrar mejoras en la supervivencia en pacientes con HLH, aunque también han confirmado un aumento significativo en el número de diagnósticos (West et al J Intern Med 2021). Las mejoras en el diagnóstico rápido de casos de linfoma que provocan HLH darían como resultado mejores resultados debido a una administración más rápida de (inmuno)quimioterapia.

El ADN tumoral circulante (ctDNA) es ADN aislado de la sangre, que se origina en la apoptosis/necrosis de células cancerosas. El ctDNA refleja todo el genoma del tumor y se denomina "biopsia líquida". Estas técnicas están bajo investigación en varios linfomas, y las mutaciones específicas de DLBCL pueden detectarse y cuantificarse usando ctDNA, con estudios que utilizan la cuantificación como estrategia para monitorear la respuesta a la terapia (Kurtz et al J Clin Onc 2018). De manera similar, las mutaciones de ctDNA se pueden identificar en el linfoma de Hodgkin (Spina et al Blood 2018) y el linfoma de células T (Ottolini et al Blood advances 2020).

Aprovechando el éxito del estudio DLBCL Interim Response Evaluation for Customised Therapy (DIRECT), la infraestructura existente en Cambridge se utilizará para realizar un estudio de viabilidad que evalúe si el ctDNA de pacientes con HLH con linfoma subyacente es viable para contribuir a los diagnósticos. Las muestras de sangre de pacientes con HLH tendrán ctDNA y granulocitos extraídos y almacenados. Una vez que se confirme el linfoma, se solicitará la biopsia y se interrogará el ctDNA, los granulocitos y la biopsia de cada paciente mediante secuenciación superficial del genoma completo (WGS; 0,1x) y un panel de secuenciación dirigida de alta sensibilidad denominado LyVE-Seq (~2000x) . Este panel incluye regiones codificantes de 122 genes implicados como impulsores de DLBCL, además de puntos críticos de translocación para BCL6/MYC. Para no DLBCL, el panel existente se modificará para incluir 150 genes recurrentemente mutados en todos los subtipos de linfoma, ordenados como un panel enfocado de Twist Bioscience.

Se solicitarán datos demográficos/de laboratorio y se integrarán con información de puntajes de riesgo clínico, genotipo tumoral y radiología (TC/PET-TC). Estas muestras clínicas invaluables se almacenarán y se pueden usar para investigaciones futuras ya que, hasta la fecha, no hay datos para ctDNA en el contexto de HLH asociado a malignidad y el estudio es altamente exploratorio.