Kliininen ja mekaaninen tutkimus poikittaisesta sääriluun kuljetuksesta monimutkaisissa jalkahaavoissa
perjantai 20. tammikuuta 2023 päivittänyt: Samuel KK Ling, Chinese University of Hong Kong
TTT on uusi kirurginen tekniikka, joka voi mahdollisesti ratkaista pitkäaikaisen puutteen hakea tehokasta hoitoa diabeettisiin jalkahaavoihin, vähentää amputaatioiden tarvetta ja pehmentää sen tuomia sosioekonomisia vaikutuksia. Tämä tutkimus on maailman ensimmäinen mahdollinen RCT, joka vahvistaa lupaavat kliiniset tutkimukset TTT:n kliinisestä hyödystä diabeettisten jalkahaavojen hoidossa. Lisäksi tästä tutkimuksesta otettujen verinäytteiden avulla voimme tutkia erilaisia systeemisiä verenkiertoon liukoisia tekijöitä, jotka liittyvät uudissuonituksiin, immunomodulaatioon ja kantasolujen mobilisaatioon. Ottamalla verta ja eri aikapisteitä ymmärrämme paremmin erilaisten biomarkkerien monimutkaisen vuorovaikutuksen. Tämän GRF:n avulla voimme saada kudosnäytteitä histologisten solumuutosten analysoimiseksi TTT-leikkauksen jälkeen. Se antaa meille enemmän tietoa siitä, miten TTT toimii, sekä mahdollisesti auttaa meitä paikantamaan tähän interventioon liittyvät tärkeät muutokset ja aikataulut.
PI, Co-Is ja yhteistyökumppanit luovat vahvan ryhmän kliinikoista ja tiedemiehistä, joilla on vankka kliininen ja perustiede. Ryhmä on julkaissut TTT:ssä ohjeita ja kirurgisia tekniikoita sekä järjestänyt useita ruumiinkoulutuspajoja, joissa opetetaan TTT-kirurgista tekniikkaa paikallisille ortopedeille. Ryhmä on myös luonut rotan TTT-mallin ja julkaissut TTT-immunomodulaatiosta ja uudissuonituksesta muiden meneillään olevien eläinkokeiden lisäksi.
Tämä potentiaalinen monikeskustutkimus, satunnaistettu, kontrolloitu tutkimus voi toimia perustana tälle kustannustehokkaalle TTT-leikkaukselle, joka säätelee neovaskularisaatiota, neurogeneesiä, immunomodulaatiota ja MSC-solujen mobilisaatiota erilaisten kroonisten sairauksien hoitoon. Regeneratiivinen lääketiede on monen miljoonan dollarin toimiala, ja TTT:n mahdollinen käyttö voi johtaa erilaisiin kliinisiin sovelluksiin, jotka eivät rajoitu DFU:hin.
Tutkimuksen yleiskatsaus
Tila
Ei vielä rekrytointia
Ehdot
Interventio / Hoito
Opintotyyppi
Interventio
Ilmoittautuminen (Odotettu)
54
Vaihe
- Ei sovellettavissa
Osallistumiskriteerit
Tutkijat etsivät ihmisiä, jotka sopivat tiettyyn kuvaukseen, jota kutsutaan kelpoisuuskriteereiksi. Joitakin esimerkkejä näistä kriteereistä ovat henkilön yleinen terveydentila tai aiemmat hoidot.
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
18 vuotta ja vanhemmat (Aikuinen, Vanhempi Aikuinen)
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Ei
Sukupuolet, jotka voivat opiskella
Kaikki
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
- Aikuiset >18v
- Potilaat, joilla on Wagnerin vaiheen 4 jalkahaava (osittainen jalan gangreeni)
- Ei aktiivista haavainfektiota, mikä on vahvistettu bakteerifluoresenssikuvauksella. (Moleculight i:X, Smith and Nephew -kämmenlaite valaisee 405 nm:n violetilla valolla, joka saa bakteerit lähettämään tyypillisiä endogeenisiä fluoresenssisignaaleja, jotka näkyvät reaaliajassa laitteen näytöllä, mikä mahdollistaa riittävän kirurgisen puhdistamisen objektiivisen mittauksen)
- Biokemiallisesti vahvistettu diabetes, jonka paastoplasman glukoosipitoisuus on ≥ 7,0 mmol/L tai satunnainen plasman glukoosipitoisuus ≥ 11,1 mmol/L tai hemoglobiini A1c (HbA1c) -taso ≥ 6,5 %
- Verisuonikirurgin suorittama angioplastia/verisuoniohitus
- Mikrovaskulaarikirurgi erosi korjaavasta läppäleikkauksesta
Poissulkemiskriteerit:
- Hallitsematon sepsis
- Vasta-aiheet ulkoisen kiinnityslaitteen kiinnittämiselle sääriluun (päällä olevat ihosairaudet, kirurgiset laitteet, kuten sääriluun kynnet, koko polviproteesi jne.)
- Vaikeat sairaudet, jotka estävät turvallisen anestesian (äskettäinen sydäninfarkti, rajoitettu keuhkojen toiminta jne.)
- Henkinen tai fyysinen vamma, joka voi heikentää kykyä noudattaa interventiosuunnitelmaa, esim. vakava dementia, psykoosi jne.
- Äskettäinen revaskularisaatiomenettely (<12 viikkoa)
- Viimeaikainen lääke/interventio, joka vaikuttaa solujen lisääntymiseen (esim. kemoterapia, sädehoito jne.), sädehoito jne.)
Opintosuunnitelma
Tässä osiossa on tietoja tutkimussuunnitelmasta, mukaan lukien kuinka tutkimus on suunniteltu ja mitä tutkimuksella mitataan.
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
- Ensisijainen käyttötarkoitus: Hoito
- Jako: Satunnaistettu
- Inventiomalli: Rinnakkaistehtävä
- Naamiointi: Ei mitään (avoin tarra)
Aseet ja interventiot
Osallistujaryhmä / Arm |
Interventio / Hoito |
|---|---|
|
Muut: Ohjausryhmä
Perinteinen hoito: sidos + negatiivinen paineen haavahoito
|
Sidonta + negatiivinen paineen haavahoito
|
|
Kokeellinen: TTT ryhmä
Sidonta + negatiivinen painehaavahoito + poikittainen sääriluun kuljetus
|
Transversaalinen sääriluun kuljetus on uusi sovitus häiriötekijöiden histogeneesissä käytetyistä käsitteistä.
Tämän kirurgisen periaatteen yleisin käyttö on luun pidennyskirurgiassa, joka on vakiintunut kirurginen toimenpide, jossa luuhun kiinnitetään ulkoinen kiinnitin, tehdään kortikotomia ja luuta pidennetään vähitellen optimaalisella nopeudella 0,5 mm/12 tuntia.
Häiriöhistogeneesin biologisiin mekanismeihin kuuluu aktivoivat signalointireittejä, kuten sytokiinit interleukiini 1 ja interleukiini 6, tulehdusta edistävät markkerit TNF alfa, pro-osteogeeninen TGF-beta, BMP:t ja pro-angiogeeniset tekijät VEGF ja angiopoietiini.
TTT:ssä hyödynnetään häiriöhistiogeneesin käsitettä, mutta häiriötä tehdään poikittaistasossa pituussuuntaisen häiriön sijaan.
Lisäksi häiriövaihe yhdistetään vastaavaan puristusjaksoon ja lopulta ei aiheuta nettomuutosta raajan pituudessa.
|
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Haavan koko
Aikaikkuna: 0 kuukautta
|
Haavan koko mitataan digitaalisella valokuvauksella standardoiduilla merkkipisteillä.
|
0 kuukautta
|
|
Haavan koko
Aikaikkuna: 1 kuukausi
|
Haavan koko mitataan digitaalisella valokuvauksella standardoiduilla merkkipisteillä.
|
1 kuukausi
|
|
Haavan koko
Aikaikkuna: 3 kuukautta
|
Haavan koko mitataan digitaalisella valokuvauksella standardoiduilla merkkipisteillä.
|
3 kuukautta
|
|
Haavan koko
Aikaikkuna: 6 kuukautta
|
Haavan koko mitataan digitaalisella valokuvauksella standardoiduilla merkkipisteillä.
|
6 kuukautta
|
|
Haavan koko
Aikaikkuna: 12 kuukautta
|
Haavan koko mitataan digitaalisella valokuvauksella standardoiduilla merkkipisteillä.
|
12 kuukautta
|
Toissijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Jalkatoiminto
Aikaikkuna: 0 kuukautta
|
Jalan toiminta mitataan objektiivisesti käyttämällä validoitua kiinalaista jalka- ja nilkkatulospisteemme tai alkuperäistä englanninkielistä versiota.
|
0 kuukautta
|
|
Jalkatoiminto
Aikaikkuna: 1 kuukausi
|
Jalan toiminta mitataan objektiivisesti käyttämällä validoitua kiinalaista jalka- ja nilkkatulospisteemme tai alkuperäistä englanninkielistä versiota.
|
1 kuukausi
|
|
Jalkatoiminto
Aikaikkuna: 3 kuukautta
|
Jalan toiminta mitataan objektiivisesti käyttämällä validoitua kiinalaista jalka- ja nilkkatulospisteemme tai alkuperäistä englanninkielistä versiota.
|
3 kuukautta
|
|
Jalkatoiminto
Aikaikkuna: 6 kuukautta
|
Jalan toiminta mitataan objektiivisesti käyttämällä validoitua kiinalaista jalka- ja nilkkatulospisteemme tai alkuperäistä englanninkielistä versiota.
|
6 kuukautta
|
|
Jalkatoiminto
Aikaikkuna: 12 kuukautta
|
Jalan toiminta mitataan objektiivisesti käyttämällä validoitua kiinalaista jalka- ja nilkkatulospisteemme tai alkuperäistä englanninkielistä versiota.
|
12 kuukautta
|
|
Amputaatioiden esiintyvyys
Aikaikkuna: Jopa 52 viikkoa
|
Amputaatioiden esiintyvyys
|
Jopa 52 viikkoa
|
|
Nilkan brakiaalinen paineindeksi
Aikaikkuna: 0 kuukautta
|
Ankle brachial pressure index (API) on perifeeristen verisuonten perfuusion kliininen mittaus.
|
0 kuukautta
|
|
Nilkan brakiaalinen paineindeksi
Aikaikkuna: 1 kuukausi
|
Ankle brachial pressure index (API) on perifeeristen verisuonten perfuusion kliininen mittaus.
|
1 kuukausi
|
|
Nilkan brakiaalinen paineindeksi
Aikaikkuna: 3 kuukautta
|
Ankle brachial pressure index (API) on perifeeristen verisuonten perfuusion kliininen mittaus.
|
3 kuukautta
|
|
Nilkan brakiaalinen paineindeksi
Aikaikkuna: 6 kuukautta
|
Ankle brachial pressure index (API) on perifeeristen verisuonten perfuusion kliininen mittaus.
|
6 kuukautta
|
|
Nilkan brakiaalinen paineindeksi
Aikaikkuna: 12 kuukautta
|
Ankle brachial pressure index (API) on perifeeristen verisuonten perfuusion kliininen mittaus.
|
12 kuukautta
|
|
Angiogeenisten tekijöiden ELISA
Aikaikkuna: 0 kuukautta
|
10 ml perifeerisistä verinäytteitä kerätään useissa aikapisteissä ja ihmisen seerumin verisuonten endoteelin kasvutekijä (VEGF), perusfibroblastikasvutekijä (bFGF), epidermaalinen kasvutekijä (EGF) ja verihiutaleperäinen kasvutekijä (PDGF) analysoidaan ELISA-pakkaus käsiteltiin sen protokollan mukaisesti.
|
0 kuukautta
|
|
Angiogeenisten tekijöiden ELISA
Aikaikkuna: 1 kuukausi
|
10 ml perifeerisistä verinäytteitä kerätään useissa aikapisteissä ja ihmisen seerumin verisuonten endoteelin kasvutekijä (VEGF), perusfibroblastikasvutekijä (bFGF), epidermaalinen kasvutekijä (EGF) ja verihiutaleperäinen kasvutekijä (PDGF) analysoidaan ELISA-pakkaus käsiteltiin sen protokollan mukaisesti.
|
1 kuukausi
|
|
Angiogeenisten tekijöiden ELISA
Aikaikkuna: 3 kuukautta
|
10 ml perifeerisistä verinäytteitä kerätään useissa aikapisteissä ja ihmisen seerumin verisuonten endoteelin kasvutekijä (VEGF), perusfibroblastikasvutekijä (bFGF), epidermaalinen kasvutekijä (EGF) ja verihiutaleperäinen kasvutekijä (PDGF) analysoidaan ELISA-pakkaus käsiteltiin sen protokollan mukaisesti.
|
3 kuukautta
|
|
Angiogeenisten tekijöiden ELISA
Aikaikkuna: 6 kuukautta
|
10 ml perifeerisistä verinäytteitä kerätään useissa aikapisteissä ja ihmisen seerumin verisuonten endoteelin kasvutekijä (VEGF), perusfibroblastikasvutekijä (bFGF), epidermaalinen kasvutekijä (EGF) ja verihiutaleperäinen kasvutekijä (PDGF) analysoidaan ELISA-pakkaus käsiteltiin sen protokollan mukaisesti.
|
6 kuukautta
|
|
Angiogeenisten tekijöiden ELISA
Aikaikkuna: 12 kuukautta
|
10 ml perifeerisistä verinäytteitä kerätään useissa aikapisteissä ja ihmisen seerumin verisuonten endoteelin kasvutekijä (VEGF), perusfibroblastikasvutekijä (bFGF), epidermaalinen kasvutekijä (EGF) ja verihiutaleperäinen kasvutekijä (PDGF) analysoidaan ELISA-pakkaus käsiteltiin sen protokollan mukaisesti.
|
12 kuukautta
|
|
Angiogeenisten markkerien immunovärjäys
Aikaikkuna: 0 kuukautta
|
3 mm:n biopsia (RazorMed) otetaan haavan reunasta useissa aikapisteissä.
Näytteet käsitellään parafiinin upottamista varten ja niistä leikataan 7 μm sarja ohuita leikkeitä.
Angiogeneesin (CD31, alfa-SMA) ja soluproliferaation (Ki-67) vasta-aineiden markkereita käytetään parafiiniosan immunovärjäykseen aiemmin julkaistun protokollan mukaisesti.
Positiivisesti värjäytyneiden solujen määrä DFU-vyöhykkeellä jokaisessa potilaassa määritetään käyttämällä kuvantamisohjelmistoa julkaistun protokollan mukaisesti.
Parillinen T-testi otetaan käyttöön MSC-osuuden, angiogeneesin ja solujen lisääntymisen erojen vertaamiseksi kussakin potilaassa SPSS 18.0 -ohjelmistolla Windowsille (SPSS, Chicago, IL, USA).
Ei-parametrista testiä käytetään keskiarvojen vertailuun p<0,05:lla, jota pidetään tilastollisesti merkitsevänä.
|
0 kuukautta
|
|
Angiogeenisten markkerien immunovärjäys
Aikaikkuna: 1 kuukausi
|
3 mm:n biopsia (RazorMed) otetaan haavan reunasta useissa aikapisteissä.
Näytteet käsitellään parafiinin upottamista varten ja niistä leikataan 7 μm sarja ohuita leikkeitä.
Angiogeneesin (CD31, alfa-SMA) ja soluproliferaation (Ki-67) vasta-aineiden markkereita käytetään parafiiniosan immunovärjäykseen aiemmin julkaistun protokollan mukaisesti.
Positiivisesti värjäytyneiden solujen määrä DFU-vyöhykkeellä jokaisessa potilaassa määritetään käyttämällä kuvantamisohjelmistoa julkaistun protokollan mukaisesti.
Parillinen T-testi otetaan käyttöön MSC-osuuden, angiogeneesin ja solujen lisääntymisen erojen vertaamiseksi kussakin potilaassa SPSS 18.0 -ohjelmistolla Windowsille (SPSS, Chicago, IL, USA).
Ei-parametrista testiä käytetään keskiarvojen vertailuun p<0,05:lla, jota pidetään tilastollisesti merkitsevänä.
|
1 kuukausi
|
|
Angiogeenisten markkerien immunovärjäys
Aikaikkuna: 3 kuukautta
|
3 mm:n biopsia (RazorMed) otetaan haavan reunasta useissa aikapisteissä.
Näytteet käsitellään parafiinin upottamista varten ja niistä leikataan 7 μm sarja ohuita leikkeitä.
Angiogeneesin (CD31, alfa-SMA) ja soluproliferaation (Ki-67) vasta-aineiden markkereita käytetään parafiiniosan immunovärjäykseen aiemmin julkaistun protokollan mukaisesti.
Positiivisesti värjäytyneiden solujen määrä DFU-vyöhykkeellä jokaisessa potilaassa määritetään käyttämällä kuvantamisohjelmistoa julkaistun protokollan mukaisesti.
Parillinen T-testi otetaan käyttöön MSC-osuuden, angiogeneesin ja solujen lisääntymisen erojen vertaamiseksi kussakin potilaassa SPSS 18.0 -ohjelmistolla Windowsille (SPSS, Chicago, IL, USA).
Ei-parametrista testiä käytetään keskiarvojen vertailuun p<0,05:lla, jota pidetään tilastollisesti merkitsevänä.
|
3 kuukautta
|
|
Angiogeenisten markkerien immunovärjäys
Aikaikkuna: 6 kuukautta
|
3 mm:n biopsia (RazorMed) otetaan haavan reunasta useissa aikapisteissä.
Näytteet käsitellään parafiinin upottamista varten ja niistä leikataan 7 μm sarja ohuita leikkeitä.
Angiogeneesin (CD31, alfa-SMA) ja soluproliferaation (Ki-67) vasta-aineiden markkereita käytetään parafiiniosan immunovärjäykseen aiemmin julkaistun protokollan mukaisesti.
Positiivisesti värjäytyneiden solujen määrä DFU-vyöhykkeellä jokaisessa potilaassa määritetään käyttämällä kuvantamisohjelmistoa julkaistun protokollan mukaisesti.
Parillinen T-testi otetaan käyttöön MSC-osuuden, angiogeneesin ja solujen lisääntymisen erojen vertaamiseksi kussakin potilaassa SPSS 18.0 -ohjelmistolla Windowsille (SPSS, Chicago, IL, USA).
Ei-parametrista testiä käytetään keskiarvojen vertailuun p<0,05:lla, jota pidetään tilastollisesti merkitsevänä.
|
6 kuukautta
|
|
Angiogeenisten markkerien immunovärjäys
Aikaikkuna: 12 kuukautta
|
3 mm:n biopsia (RazorMed) otetaan haavan reunasta useissa aikapisteissä.
Näytteet käsitellään parafiinin upottamista varten ja niistä leikataan 7 μm sarja ohuita leikkeitä.
Angiogeneesin (CD31, alfa-SMA) ja soluproliferaation (Ki-67) vasta-aineiden markkereita käytetään parafiiniosan immunovärjäykseen aiemmin julkaistun protokollan mukaisesti.
Positiivisesti värjäytyneiden solujen määrä DFU-vyöhykkeellä jokaisessa potilaassa määritetään käyttämällä kuvantamisohjelmistoa julkaistun protokollan mukaisesti.
Parillinen T-testi otetaan käyttöön MSC-osuuden, angiogeneesin ja solujen lisääntymisen erojen vertaamiseksi kussakin potilaassa SPSS 18.0 -ohjelmistolla Windowsille (SPSS, Chicago, IL, USA).
Ei-parametrista testiä käytetään keskiarvojen vertailuun p<0,05:lla, jota pidetään tilastollisesti merkitsevänä.
|
12 kuukautta
|
|
Semmes Weinsteinin monofilamenttitesti
Aikaikkuna: 0 kuukautta
|
monofilamentti, jonka koko on 0,57 ja nurjahdusvoima 10 gm, on kliinisesti hyväksytty raja suojatun tunteen olemassaololle tai puuttumiselle.
Mittaukset standardoidaan kolmeen paikkaan; 1. jalkapöytä, 3. jalkapöytä ja 5. jalkapöytä.
|
0 kuukautta
|
|
Semmes Weinsteinin monofilamenttitesti
Aikaikkuna: 1 kuukausi
|
monofilamentti, jonka koko on 0,57 ja nurjahdusvoima 10 gm, on kliinisesti hyväksytty raja suojatun tunteen olemassaololle tai puuttumiselle.
Mittaukset standardoidaan kolmeen paikkaan; 1. jalkapöytä, 3. jalkapöytä ja 5. jalkapöytä.
|
1 kuukausi
|
|
Semmes Weinsteinin monofilamenttitesti
Aikaikkuna: 3 kuukautta
|
monofilamentti, jonka koko on 0,57 ja nurjahdusvoima 10 gm, on kliinisesti hyväksytty raja suojatun tunteen olemassaololle tai puuttumiselle.
Mittaukset standardoidaan kolmeen paikkaan; 1. jalkapöytä, 3. jalkapöytä ja 5. jalkapöytä.
|
3 kuukautta
|
|
Semmes Weinsteinin monofilamenttitesti
Aikaikkuna: 6 kuukautta
|
monofilamentti, jonka koko on 0,57 ja nurjahdusvoima 10 gm, on kliinisesti hyväksytty raja suojatun tunteen olemassaololle tai puuttumiselle.
Mittaukset standardoidaan kolmeen paikkaan; 1. jalkapöytä, 3. jalkapöytä ja 5. jalkapöytä.
|
6 kuukautta
|
|
Semmes Weinsteinin monofilamenttitesti
Aikaikkuna: 12 kuukautta
|
monofilamentti, jonka koko on 0,57 ja nurjahdusvoima 10 gm, on kliinisesti hyväksytty raja suojatun tunteen olemassaololle tai puuttumiselle.
Mittaukset standardoidaan kolmeen paikkaan; 1. jalkapöytä, 3. jalkapöytä ja 5. jalkapöytä.
|
12 kuukautta
|
|
Neurogeenisten markkerien osa
Aikaikkuna: 0 kuukautta
|
3 mm:n biopsia (RazorMed) otetaan haavan reunasta useissa aikapisteissä.
Näytteet käsitellään parafiinin upottamista varten ja niistä leikataan 7 μm sarja ohuita leikkeitä.
Näytteistä poistetaan vaha ja ne kosteutetaan.
Antigeenin talteenoton (Citrate Antigen Retrieval -liuoksella, ~30 min, 65 ℃) ja läpäisevyyden (Triton™ X-100:lla) jälkeen aksonin (beta-tubuliini 3) (38) markkereita inkuboidaan yön yli ja vastaavaa sekundaarista vasta-ainetta inkuboidaan 1 tunnin ajan.
Jokaisen potilaan DFU-vyöhykkeen positiivisesti värjäytyneen alueen määrä määritetään käyttämällä kuvantamisohjelmistoa julkaistun protokollan mukaisesti.
Parillinen T-testi otetaan käyttöön vertaamaan kunkin potilaan aksonialueen eroa SPSS 18.0 -ohjelmistolla Windowsille (SPSS, Chicago, IL, USA).
Ei-parametrista testiä käytetään keskiarvojen vertailuun p<0,05:lla, jota pidetään tilastollisesti merkitsevänä.
|
0 kuukautta
|
|
Neurogeenisten markkerien osa
Aikaikkuna: 1 kuukausi
|
3 mm:n biopsia (RazorMed) otetaan haavan reunasta useissa aikapisteissä.
Näytteet käsitellään parafiinin upottamista varten ja niistä leikataan 7 μm sarja ohuita leikkeitä.
Näytteistä poistetaan vaha ja ne kosteutetaan.
Antigeenin talteenoton (Citrate Antigen Retrieval -liuoksella, ~30 min, 65 ℃) ja läpäisevyyden (Triton™ X-100:lla) jälkeen aksonin (beta-tubuliini 3) (38) markkereita inkuboidaan yön yli ja vastaavaa sekundaarista vasta-ainetta inkuboidaan 1 tunnin ajan.
Jokaisen potilaan DFU-vyöhykkeen positiivisesti värjäytyneen alueen määrä määritetään käyttämällä kuvantamisohjelmistoa julkaistun protokollan mukaisesti.
Parillinen T-testi otetaan käyttöön vertaamaan kunkin potilaan aksonialueen eroa SPSS 18.0 -ohjelmistolla Windowsille (SPSS, Chicago, IL, USA).
Ei-parametrista testiä käytetään keskiarvojen vertailuun p<0,05:lla, jota pidetään tilastollisesti merkitsevänä.
|
1 kuukausi
|
|
Neurogeenisten markkerien osa
Aikaikkuna: 3 kuukautta
|
3 mm:n biopsia (RazorMed) otetaan haavan reunasta useissa aikapisteissä.
Näytteet käsitellään parafiinin upottamista varten ja niistä leikataan 7 μm sarja ohuita leikkeitä.
Näytteistä poistetaan vaha ja ne kosteutetaan.
Antigeenin talteenoton (Citrate Antigen Retrieval -liuoksella, ~30 min, 65 ℃) ja läpäisevyyden (Triton™ X-100:lla) jälkeen aksonin (beta-tubuliini 3) (38) markkereita inkuboidaan yön yli ja vastaavaa sekundaarista vasta-ainetta inkuboidaan 1 tunnin ajan.
Jokaisen potilaan DFU-vyöhykkeen positiivisesti värjäytyneen alueen määrä määritetään käyttämällä kuvantamisohjelmistoa julkaistun protokollan mukaisesti.
Parillinen T-testi otetaan käyttöön vertaamaan kunkin potilaan aksonialueen eroa SPSS 18.0 -ohjelmistolla Windowsille (SPSS, Chicago, IL, USA).
Ei-parametrista testiä käytetään keskiarvojen vertailuun p<0,05:lla, jota pidetään tilastollisesti merkitsevänä.
|
3 kuukautta
|
|
Neurogeenisten markkerien osa
Aikaikkuna: 6 kuukautta
|
3 mm:n biopsia (RazorMed) otetaan haavan reunasta useissa aikapisteissä.
Näytteet käsitellään parafiinin upottamista varten ja niistä leikataan 7 μm sarja ohuita leikkeitä.
Näytteistä poistetaan vaha ja ne kosteutetaan.
Antigeenin talteenoton (Citrate Antigen Retrieval -liuoksella, ~30 min, 65 ℃) ja läpäisevyyden (Triton™ X-100:lla) jälkeen aksonin (beta-tubuliini 3) (38) markkereita inkuboidaan yön yli ja vastaavaa sekundaarista vasta-ainetta inkuboidaan 1 tunnin ajan.
Jokaisen potilaan DFU-vyöhykkeen positiivisesti värjäytyneen alueen määrä määritetään käyttämällä kuvantamisohjelmistoa julkaistun protokollan mukaisesti.
Parillinen T-testi otetaan käyttöön vertaamaan kunkin potilaan aksonialueen eroa SPSS 18.0 -ohjelmistolla Windowsille (SPSS, Chicago, IL, USA).
Ei-parametrista testiä käytetään keskiarvojen vertailuun p<0,05:lla, jota pidetään tilastollisesti merkitsevänä.
|
6 kuukautta
|
|
Neurogeenisten markkerien osa
Aikaikkuna: 12 kuukautta
|
3 mm:n biopsia (RazorMed) otetaan haavan reunasta useissa aikapisteissä.
Näytteet käsitellään parafiinin upottamista varten ja niistä leikataan 7 μm sarja ohuita leikkeitä.
Näytteistä poistetaan vaha ja ne kosteutetaan.
Antigeenin talteenoton (Citrate Antigen Retrieval -liuoksella, ~30 min, 65 ℃) ja läpäisevyyden (Triton™ X-100:lla) jälkeen aksonin (beta-tubuliini 3) (38) markkereita inkuboidaan yön yli ja vastaavaa sekundaarista vasta-ainetta inkuboidaan 1 tunnin ajan.
Jokaisen potilaan DFU-vyöhykkeen positiivisesti värjäytyneen alueen määrä määritetään käyttämällä kuvantamisohjelmistoa julkaistun protokollan mukaisesti.
Parillinen T-testi otetaan käyttöön vertaamaan kunkin potilaan aksonialueen eroa SPSS 18.0 -ohjelmistolla Windowsille (SPSS, Chicago, IL, USA).
Ei-parametrista testiä käytetään keskiarvojen vertailuun p<0,05:lla, jota pidetään tilastollisesti merkitsevänä.
|
12 kuukautta
|
|
Tulehduksellinen soluvirtaussytometria
Aikaikkuna: 0 kuukautta
|
Otetaan 10 ml ääreisverta.
Mononukleaariset solut kerätään eristämällä Ficoll-Paque-tiheysgradienttisentrifugoinnilla.
Klassisten ja ei-klassisten monosyyttien populaatiot analysoidaan virtaussytometrialla ja tunnistetaan CD172a+- ja CD43+-solujen osuuksista.
|
0 kuukautta
|
|
Tulehduksellinen soluvirtaussytometria
Aikaikkuna: 1 kuukausi
|
Otetaan 10 ml ääreisverta.
Mononukleaariset solut kerätään eristämällä Ficoll-Paque-tiheysgradienttisentrifugoinnilla.
Klassisten ja ei-klassisten monosyyttien populaatiot analysoidaan virtaussytometrialla ja tunnistetaan CD172a+- ja CD43+-solujen osuuksista.
|
1 kuukausi
|
|
Tulehduksellinen soluvirtaussytometria
Aikaikkuna: 3 kuukautta
|
Otetaan 10 ml ääreisverta.
Mononukleaariset solut kerätään eristämällä Ficoll-Paque-tiheysgradienttisentrifugoinnilla.
Klassisten ja ei-klassisten monosyyttien populaatiot analysoidaan virtaussytometrialla ja tunnistetaan CD172a+- ja CD43+-solujen osuuksista.
|
3 kuukautta
|
|
Tulehduksellinen soluvirtaussytometria
Aikaikkuna: 6 kuukautta
|
Otetaan 10 ml ääreisverta.
Mononukleaariset solut kerätään eristämällä Ficoll-Paque-tiheysgradienttisentrifugoinnilla.
Klassisten ja ei-klassisten monosyyttien populaatiot analysoidaan virtaussytometrialla ja tunnistetaan CD172a+- ja CD43+-solujen osuuksista.
|
6 kuukautta
|
|
Tulehduksellinen soluvirtaussytometria
Aikaikkuna: 12 kuukautta
|
Otetaan 10 ml ääreisverta.
Mononukleaariset solut kerätään eristämällä Ficoll-Paque-tiheysgradienttisentrifugoinnilla.
Klassisten ja ei-klassisten monosyyttien populaatiot analysoidaan virtaussytometrialla ja tunnistetaan CD172a+- ja CD43+-solujen osuuksista.
|
12 kuukautta
|
|
Makrofagi-immunofluoresenssivärjäys
Aikaikkuna: 0 kuukautta
|
Otetaan 3 mm:n biopsia (RazorMed) ja valmistetaan parafiinileikkeitä varten.
Sekä monosyyttien (klassiset ja ei-klassiset fenotyypit) että makrofagien (M1- ja M2-fenotyyppi) populaatiot ja lokalisaatiot ihohaavakohdassa määritetään immunofluoresenssivärjäyksellä spesifisillä CD68-vasta-aineilla (makrofagin yleinen markkeri), anti-iNOS ( M1-makrofagi), CD206 (M2-makrofagi) [32] CD172a (monosyyttien yleinen markkeri) ja CD43 (ei-klassinen monosyyttispesifinen markkeri).
|
0 kuukautta
|
|
Makrofagi-immunofluoresenssivärjäys
Aikaikkuna: 1 kuukausi
|
Otetaan 3 mm:n biopsia (RazorMed) ja valmistetaan parafiinileikkeitä varten.
Sekä monosyyttien (klassiset ja ei-klassiset fenotyypit) että makrofagien (M1- ja M2-fenotyyppi) populaatiot ja lokalisaatiot ihohaavakohdassa määritetään immunofluoresenssivärjäyksellä spesifisillä CD68-vasta-aineilla (makrofagin yleinen markkeri), anti-iNOS ( M1-makrofagi), CD206 (M2-makrofagi) [32] CD172a (monosyyttien yleinen markkeri) ja CD43 (ei-klassinen monosyyttispesifinen markkeri).
|
1 kuukausi
|
|
Makrofagi-immunofluoresenssivärjäys
Aikaikkuna: 3 kuukautta
|
Otetaan 3 mm:n biopsia (RazorMed) ja valmistetaan parafiinileikkeitä varten.
Sekä monosyyttien (klassiset ja ei-klassiset fenotyypit) että makrofagien (M1- ja M2-fenotyyppi) populaatiot ja lokalisaatiot ihohaavakohdassa määritetään immunofluoresenssivärjäyksellä spesifisillä CD68-vasta-aineilla (makrofagin yleinen markkeri), anti-iNOS ( M1-makrofagi), CD206 (M2-makrofagi) [32] CD172a (monosyyttien yleinen markkeri) ja CD43 (ei-klassinen monosyyttispesifinen markkeri).
|
3 kuukautta
|
|
Makrofagi-immunofluoresenssivärjäys
Aikaikkuna: 6 kuukautta
|
Otetaan 3 mm:n biopsia (RazorMed) ja valmistetaan parafiinileikkeitä varten.
Sekä monosyyttien (klassiset ja ei-klassiset fenotyypit) että makrofagien (M1- ja M2-fenotyyppi) populaatiot ja lokalisaatiot ihohaavakohdassa määritetään immunofluoresenssivärjäyksellä spesifisillä CD68-vasta-aineilla (makrofagin yleinen markkeri), anti-iNOS ( M1-makrofagi), CD206 (M2-makrofagi) [32] CD172a (monosyyttien yleinen markkeri) ja CD43 (ei-klassinen monosyyttispesifinen markkeri).
|
6 kuukautta
|
|
Makrofagi-immunofluoresenssivärjäys
Aikaikkuna: 12 kuukautta
|
Otetaan 3 mm:n biopsia (RazorMed) ja valmistetaan parafiinileikkeitä varten.
Sekä monosyyttien (klassiset ja ei-klassiset fenotyypit) että makrofagien (M1- ja M2-fenotyyppi) populaatiot ja lokalisaatiot ihohaavakohdassa määritetään immunofluoresenssivärjäyksellä spesifisillä CD68-vasta-aineilla (makrofagin yleinen markkeri), anti-iNOS ( M1-makrofagi), CD206 (M2-makrofagi) [32] CD172a (monosyyttien yleinen markkeri) ja CD43 (ei-klassinen monosyyttispesifinen markkeri).
|
12 kuukautta
|
|
Säätelevien sytokiinien tunnistaminen perifeerisen veren mesenkymaalisten kantasolujen (PB-MSC) mobilisaatiolle
Aikaikkuna: 0 kuukautta
|
10 ml ääreisverta kerätään useissa aikapisteissä.
Jokainen perifeerinen verinäyte kerätään käyttämällä K2-EDTA:ta sisältäviä putkia.
Verinäytteitä sentrifugoidaan 1800 g:ssä 6 minuuttia 4 °C:ssa plasman saamiseksi ja jaetaan 1 ml:n eriin ja säilytetään -80 °C:ssa.
Differentiaalinen proteiiniekspressio määritetään 8-plex-isobaarisilla tunnisteilla suhteelliseen ja absoluuttiseen kvantitaatioon (iTRAQ) perustuvaan kvantitatiiviseen proteomiikkaanalyysiin.
|
0 kuukautta
|
|
Säätelevien sytokiinien tunnistaminen perifeerisen veren mesenkymaalisten kantasolujen (PB-MSC) mobilisaatiolle
Aikaikkuna: 1 kuukausi
|
10 ml ääreisverta kerätään useissa aikapisteissä.
Jokainen perifeerinen verinäyte kerätään käyttämällä K2-EDTA:ta sisältäviä putkia.
Verinäytteitä sentrifugoidaan 1800 g:ssä 6 minuuttia 4 °C:ssa plasman saamiseksi ja jaetaan 1 ml:n eriin ja säilytetään -80 °C:ssa.
Differentiaalinen proteiiniekspressio määritetään 8-plex-isobaarisilla tunnisteilla suhteelliseen ja absoluuttiseen kvantitaatioon (iTRAQ) perustuvaan kvantitatiiviseen proteomiikkaanalyysiin.
|
1 kuukausi
|
|
Säätelevien sytokiinien tunnistaminen perifeerisen veren mesenkymaalisten kantasolujen (PB-MSC) mobilisaatiolle
Aikaikkuna: 3 kuukautta
|
10 ml ääreisverta kerätään useissa aikapisteissä.
Jokainen perifeerinen verinäyte kerätään käyttämällä K2-EDTA:ta sisältäviä putkia.
Verinäytteitä sentrifugoidaan 1800 g:ssä 6 minuuttia 4 °C:ssa plasman saamiseksi ja jaetaan 1 ml:n eriin ja säilytetään -80 °C:ssa.
Differentiaalinen proteiiniekspressio määritetään 8-plex-isobaarisilla tunnisteilla suhteelliseen ja absoluuttiseen kvantitaatioon (iTRAQ) perustuvaan kvantitatiiviseen proteomiikkaanalyysiin.
|
3 kuukautta
|
|
Säätelevien sytokiinien tunnistaminen perifeerisen veren mesenkymaalisten kantasolujen (PB-MSC) mobilisaatiolle
Aikaikkuna: 6 kuukautta
|
10 ml ääreisverta kerätään useissa aikapisteissä.
Jokainen perifeerinen verinäyte kerätään käyttämällä K2-EDTA:ta sisältäviä putkia.
Verinäytteitä sentrifugoidaan 1800 g:ssä 6 minuuttia 4 °C:ssa plasman saamiseksi ja jaetaan 1 ml:n eriin ja säilytetään -80 °C:ssa.
Differentiaalinen proteiiniekspressio määritetään 8-plex-isobaarisilla tunnisteilla suhteelliseen ja absoluuttiseen kvantitaatioon (iTRAQ) perustuvaan kvantitatiiviseen proteomiikkaanalyysiin.
|
6 kuukautta
|
|
Säätelevien sytokiinien tunnistaminen perifeerisen veren mesenkymaalisten kantasolujen (PB-MSC) mobilisaatiolle
Aikaikkuna: 12 kuukautta
|
10 ml ääreisverta kerätään useissa aikapisteissä.
Jokainen perifeerinen verinäyte kerätään käyttämällä K2-EDTA:ta sisältäviä putkia.
Verinäytteitä sentrifugoidaan 1800 g:ssä 6 minuuttia 4 °C:ssa plasman saamiseksi ja jaetaan 1 ml:n eriin ja säilytetään -80 °C:ssa.
Differentiaalinen proteiiniekspressio määritetään 8-plex-isobaarisilla tunnisteilla suhteelliseen ja absoluuttiseen kvantitaatioon (iTRAQ) perustuvaan kvantitatiiviseen proteomiikkaanalyysiin.
|
12 kuukautta
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Täältä löydät tähän tutkimukseen osallistuvat ihmiset ja organisaatiot.
Sponsori
Opintojen ennätyspäivät
Nämä päivämäärät seuraavat ClinicalTrials.gov-sivustolle lähetettyjen tutkimustietueiden ja yhteenvetojen edistymistä. National Library of Medicine (NLM) tarkistaa tutkimustiedot ja raportoidut tulokset varmistaakseen, että ne täyttävät tietyt laadunvalvontastandardit, ennen kuin ne julkaistaan julkisella verkkosivustolla.
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus (Odotettu)
Perjantai 1. joulukuuta 2023
Ensisijainen valmistuminen (Odotettu)
Lauantai 31. tammikuuta 2026
Opintojen valmistuminen (Odotettu)
Lauantai 31. tammikuuta 2026
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Torstai 13. lokakuuta 2022
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Perjantai 20. tammikuuta 2023
Ensimmäinen Lähetetty (Arvio)
Maanantai 30. tammikuuta 2023
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Arvio)
Maanantai 30. tammikuuta 2023
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Perjantai 20. tammikuuta 2023
Viimeksi vahvistettu
Sunnuntai 1. tammikuuta 2023
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja
Muut tutkimustunnusnumerot
- TTTFootUlcers
Lääke- ja laitetiedot, tutkimusasiakirjat
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää lääkevalmistetta
Ei
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää laitetuotetta
Ei
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .