- ICH GCP
- Registr klinických studií v USA
- Klinická studie NCT05704075
Klinická a mechanická studie příčného tibiálního transportu u komplexních vředů nohy
TTT je nová chirurgická technika, která může potenciálně vyřešit dlouhodobý deficit hledání účinné léčby diabetických vředů na noze, snížit potřebu amputací a zmírnit socioekonomické dopady, které přináší. Tato studie bude první prospektivní RCT na světě, která ověří slibné klinické studie klinického přínosu TTT při léčbě vředů diabetické nohy. Krevní vzorky z této studie nám navíc umožní studovat různé systémové cirkulující rozpustné faktory ve vztahu k neovaskularizaci, imunomodulaci a mobilizaci kmenových buněk. Odběrem krve a různých časových bodů lépe porozumíme složité souhře mezi různými biomarkery. Tento GRF nám umožní získat vzorky tkáně pro analýzu histologických buněčných změn po operaci TTT. Poskytne nám více informací o tom, jak TTT funguje, a také nám potenciálně pomůže určit důležité změny a časové rámce související s tímto zásahem.
PI, Co-Is a spolupracovníci vytvářejí silný tým klinických lékařů a vědců se solidními klinickými a základními vědeckými výsledky. Tým publikoval pokyny a chirurgické techniky v TTT a vedl několik školení zaměřených na kadaverózní workshopy, které místní ortopedické chirurgy učí operační techniku TTT. Tým také vytvořil potkaní model TTT a publikoval o imunomodulaci a neovaskularizaci TTT vedle dalších probíhajících mechanistických experimentů na zvířatech.
Tato prospektivní multicentrická randomizovaná kontrolovaná studie může sloužit jako základ pro zahájení této nákladově efektivní operace TTT k regulaci neovaskularizace, neurogeneze, imunomodulace a mobilizace MSC pro léčbu různých chronických stavů. Regenerativní medicína je mnohomilionový průmysl a potenciální použití TTT může vést k řadě klinických aplikací neomezených na DFU.
Přehled studie
Postavení
Podmínky
Intervence / Léčba
Typ studie
Zápis (Očekávaný)
Fáze
- Nelze použít
Kritéria účasti
Kritéria způsobilosti
Věk způsobilý ke studiu
Přijímá zdravé dobrovolníky
Pohlaví způsobilá ke studiu
Popis
Kritéria pro zařazení:
- Dospělí >18 let
- Pacienti s Wagnerovým vředem na chodidle 4 (částečná gangréna nohy)
- Žádná aktivní infekce rány, jak bylo potvrzeno bakteriálním fluorescenčním zobrazením. (ruční zařízení Moleculight i:X, Smith and Nephew se osvětluje 405nm fialovým světlem, které způsobuje, že bakterie emitují charakteristické endogenní fluorescenční signály, které jsou vizualizovány v reálném čase na obrazovce zařízení, což umožňuje objektivní měření adekvátního chirurgického debridementu)
- Biochemicky potvrzený diabetes s plazmatickou glukózou nalačno ≥ 7,0 mmol/l nebo náhodnou plazmatickou glukózou ≥ 11,1 mmol/l nebo hladinou hemoglobinu A1c (HbA1c) ≥ 6,5 %
- Cévním chirurgem vytříděno pro angioplastiku/vaskulární bypass
- Vytříděno z rekonstrukční operace chlopně mikrovaskulárním chirurgem
Kritéria vyloučení:
- Nekontrolovaná sepse
- Kontraindikace pro aplikaci externího fixátoru v holenní kosti (překrývající se kožní onemocnění, chirurgický hardware jako jsou tibiální hřeby, totální protéza kolena atd.)
- Závažné lékařské komorbidity vylučující bezpečnou anestezii (nedávný infarkt myokardu, omezená funkce plic atd.)
- Mentální nebo fyzické postižení, které může zhoršit schopnost dodržovat plán intervence, např. těžká demence, psychóza atd.
- Nedávná revaskularizační procedura (<12 týdnů)
- Nedávná medikace/intervence ovlivňující buněčnou proliferaci (např. chemoterapie, radioterapie atd.), radioterapie atd.)
Studijní plán
Jak je studie koncipována?
Detaily designu
- Primární účel: Léčba
- Přidělení: Randomizované
- Intervenční model: Paralelní přiřazení
- Maskování: Žádné (otevřený štítek)
Zbraně a zásahy
Skupina účastníků / Arm |
Intervence / Léčba |
|---|---|
|
Jiný: Kontrolní skupina
Konvenční léčba: Převaz + Terapie ran negativním tlakem
|
Obvaz + Negativní tlaková terapie ran
|
|
Experimentální: Skupina TTT
Převaz + Negativní tlaková terapie rány + Příčný transport tibie
|
Příčný tibiální transport je novou adaptací konceptů používaných v histogenezi distrakce.
Nejčastější využití tohoto chirurgického principu je v chirurgii prodlužování kosti, což je osvědčený chirurgický výkon přiložením zevního fixátoru na kost, vytvořením kortikotomie a postupným prodlužováním kosti optimální rychlostí 0,5 mm/12hod.
Biologické mechanismy distrakční histogeneze zahrnují aktivaci signálních drah, jako jsou cytokiny Interleukin 1 a Interleukin 6, prozánětlivé markery TNF alfa, proosteogenní TGF-beta, BMP a proangiogenní faktory VEGF a angiopoetin.
TTT využívá koncept histiogeneze distrakce, ale distrakce se provádí v transverzální rovině namísto podélné distrakce.
Kromě toho je doba distrakce spojena s odpovídající periodou komprese a nakonec nevede k žádné čisté změně délky končetiny.
|
Co je měření studie?
Primární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Velikost rány
Časové okno: 0 měsíc
|
Velikost rány bude měřena pomocí digitální fotografie se standardizovanými značkovacími body.
|
0 měsíc
|
|
Velikost rány
Časové okno: 1 měsíc
|
Velikost rány bude měřena pomocí digitální fotografie se standardizovanými značkovacími body.
|
1 měsíc
|
|
Velikost rány
Časové okno: 3 měsíce
|
Velikost rány bude měřena pomocí digitální fotografie se standardizovanými značkovacími body.
|
3 měsíce
|
|
Velikost rány
Časové okno: 6 měsíců
|
Velikost rány bude měřena pomocí digitální fotografie se standardizovanými značkovacími body.
|
6 měsíců
|
|
Velikost rány
Časové okno: 12 měsíců
|
Velikost rány bude měřena pomocí digitální fotografie se standardizovanými značkovacími body.
|
12 měsíců
|
Sekundární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Funkce nohou
Časové okno: 0 měsíc
|
Funkce nohy bude objektivně měřena pomocí našeho ověřeného čínského skóre výsledků pro nohy a kotníky nebo původní anglické verze.
|
0 měsíc
|
|
Funkce nohou
Časové okno: 1 měsíc
|
Funkce nohy bude objektivně měřena pomocí našeho ověřeného čínského skóre výsledků pro nohy a kotníky nebo původní anglické verze.
|
1 měsíc
|
|
Funkce nohou
Časové okno: 3 měsíce
|
Funkce nohy bude objektivně měřena pomocí našeho ověřeného čínského skóre výsledků pro nohy a kotníky nebo původní anglické verze.
|
3 měsíce
|
|
Funkce nohou
Časové okno: 6 měsíců
|
Funkce nohy bude objektivně měřena pomocí našeho ověřeného čínského skóre výsledků pro nohy a kotníky nebo původní anglické verze.
|
6 měsíců
|
|
Funkce nohou
Časové okno: 12 měsíců
|
Funkce nohy bude objektivně měřena pomocí našeho ověřeného čínského skóre výsledků pro nohy a kotníky nebo původní anglické verze.
|
12 měsíců
|
|
Výskyt amputace
Časové okno: Až 52 týdnů
|
Výskyt amputace
|
Až 52 týdnů
|
|
Index tlaku na kotník
Časové okno: 0 měsíc
|
Kotníkový tlakový index (API) je klinickým měřením periferní vaskulární perfuze.
|
0 měsíc
|
|
Index tlaku na kotník
Časové okno: 1 měsíc
|
Kotníkový tlakový index (API) je klinickým měřením periferní vaskulární perfuze.
|
1 měsíc
|
|
Index tlaku na kotník
Časové okno: 3 měsíce
|
Kotníkový tlakový index (API) je klinickým měřením periferní vaskulární perfuze.
|
3 měsíce
|
|
Index tlaku na kotník
Časové okno: 6 měsíců
|
Kotníkový tlakový index (API) je klinickým měřením periferní vaskulární perfuze.
|
6 měsíců
|
|
Index tlaku na kotník
Časové okno: 12 měsíců
|
Kotníkový tlakový index (API) je klinickým měřením periferní vaskulární perfuze.
|
12 měsíců
|
|
ELISA angiogenních faktorů
Časové okno: 0 měsíc
|
10ml vzorky periferní krve budou odebrány v několika časových bodech a budou analyzovány lidský sérový vaskulární endoteliální růstový faktor (VEGF), základní fibroblastový růstový faktor (bFGF), epidermální růstový faktor (EGF) a destičkový růstový faktor (PDGF). souprava ELISA byla zpracována podle jejího protokolu.
|
0 měsíc
|
|
ELISA angiogenních faktorů
Časové okno: 1 měsíc
|
10ml vzorky periferní krve budou odebrány v několika časových bodech a budou analyzovány lidský sérový vaskulární endoteliální růstový faktor (VEGF), základní fibroblastový růstový faktor (bFGF), epidermální růstový faktor (EGF) a destičkový růstový faktor (PDGF). souprava ELISA byla zpracována podle jejího protokolu.
|
1 měsíc
|
|
ELISA angiogenních faktorů
Časové okno: 3 měsíce
|
10ml vzorky periferní krve budou odebrány v několika časových bodech a budou analyzovány lidský sérový vaskulární endoteliální růstový faktor (VEGF), základní fibroblastový růstový faktor (bFGF), epidermální růstový faktor (EGF) a destičkový růstový faktor (PDGF). souprava ELISA byla zpracována podle jejího protokolu.
|
3 měsíce
|
|
ELISA angiogenních faktorů
Časové okno: 6 měsíců
|
10ml vzorky periferní krve budou odebrány v několika časových bodech a budou analyzovány lidský sérový vaskulární endoteliální růstový faktor (VEGF), základní fibroblastový růstový faktor (bFGF), epidermální růstový faktor (EGF) a destičkový růstový faktor (PDGF). souprava ELISA byla zpracována podle jejího protokolu.
|
6 měsíců
|
|
ELISA angiogenních faktorů
Časové okno: 12 měsíců
|
10ml vzorky periferní krve budou odebrány v několika časových bodech a budou analyzovány lidský sérový vaskulární endoteliální růstový faktor (VEGF), základní fibroblastový růstový faktor (bFGF), epidermální růstový faktor (EGF) a destičkový růstový faktor (PDGF). souprava ELISA byla zpracována podle jejího protokolu.
|
12 měsíců
|
|
Imunobarvení angiogenních markerů
Časové okno: 0 měsíc
|
3mm biopsie děrování (RazorMed) bude získána z okraje rány v několika časových bodech.
Vzorky budou zpracovány pro zalití parafínem a budou nařezány sériové tenké řezy 7μm.
Markery pro angiogenezi (CD31, alfa-SMA) a protilátky proti buněčné proliferaci (Ki-67) budou použity pro imunobarvení parafinového řezu podle dříve publikovaného protokolu.
Pozitivně obarvené počty buněk v zóně DFU u každého pacienta budou kvantifikovány pomocí zobrazovacího softwaru podle publikovaného protokolu.
Párový T test bude použit k porovnání rozdílu v poměru MSC, angiogenezi a buněčné proliferaci u každého pacienta pomocí softwaru SPSS 18.0 pro Windows (SPSS, Chicago, IL, USA).
Neparametrický test bude použit pro srovnání středních hodnot s p<0,05 považovanými za statisticky významné.
|
0 měsíc
|
|
Imunobarvení angiogenních markerů
Časové okno: 1 měsíc
|
3mm biopsie děrování (RazorMed) bude získána z okraje rány v několika časových bodech.
Vzorky budou zpracovány pro zalití parafínem a budou nařezány sériové tenké řezy 7μm.
Markery pro angiogenezi (CD31, alfa-SMA) a protilátky proti buněčné proliferaci (Ki-67) budou použity pro imunobarvení parafinového řezu podle dříve publikovaného protokolu.
Pozitivně obarvené počty buněk v zóně DFU u každého pacienta budou kvantifikovány pomocí zobrazovacího softwaru podle publikovaného protokolu.
Párový T test bude použit k porovnání rozdílu v poměru MSC, angiogenezi a buněčné proliferaci u každého pacienta pomocí softwaru SPSS 18.0 pro Windows (SPSS, Chicago, IL, USA).
Neparametrický test bude použit pro srovnání středních hodnot s p<0,05 považovanými za statisticky významné.
|
1 měsíc
|
|
Imunobarvení angiogenních markerů
Časové okno: 3 měsíce
|
3mm biopsie děrování (RazorMed) bude získána z okraje rány v několika časových bodech.
Vzorky budou zpracovány pro zalití parafínem a budou nařezány sériové tenké řezy 7μm.
Markery pro angiogenezi (CD31, alfa-SMA) a protilátky proti buněčné proliferaci (Ki-67) budou použity pro imunobarvení parafinového řezu podle dříve publikovaného protokolu.
Pozitivně obarvené počty buněk v zóně DFU u každého pacienta budou kvantifikovány pomocí zobrazovacího softwaru podle publikovaného protokolu.
Párový T test bude použit k porovnání rozdílu v poměru MSC, angiogenezi a buněčné proliferaci u každého pacienta pomocí softwaru SPSS 18.0 pro Windows (SPSS, Chicago, IL, USA).
Neparametrický test bude použit pro srovnání středních hodnot s p<0,05 považovanými za statisticky významné.
|
3 měsíce
|
|
Imunobarvení angiogenních markerů
Časové okno: 6 měsíců
|
3mm biopsie děrování (RazorMed) bude získána z okraje rány v několika časových bodech.
Vzorky budou zpracovány pro zalití parafínem a budou nařezány sériové tenké řezy 7μm.
Markery pro angiogenezi (CD31, alfa-SMA) a protilátky proti buněčné proliferaci (Ki-67) budou použity pro imunobarvení parafinového řezu podle dříve publikovaného protokolu.
Pozitivně obarvené počty buněk v zóně DFU u každého pacienta budou kvantifikovány pomocí zobrazovacího softwaru podle publikovaného protokolu.
Párový T test bude použit k porovnání rozdílu v poměru MSC, angiogenezi a buněčné proliferaci u každého pacienta pomocí softwaru SPSS 18.0 pro Windows (SPSS, Chicago, IL, USA).
Neparametrický test bude použit pro srovnání středních hodnot s p<0,05 považovanými za statisticky významné.
|
6 měsíců
|
|
Imunobarvení angiogenních markerů
Časové okno: 12 měsíců
|
3mm biopsie děrování (RazorMed) bude získána z okraje rány v několika časových bodech.
Vzorky budou zpracovány pro zalití parafínem a budou nařezány sériové tenké řezy 7μm.
Markery pro angiogenezi (CD31, alfa-SMA) a protilátky proti buněčné proliferaci (Ki-67) budou použity pro imunobarvení parafinového řezu podle dříve publikovaného protokolu.
Pozitivně obarvené počty buněk v zóně DFU u každého pacienta budou kvantifikovány pomocí zobrazovacího softwaru podle publikovaného protokolu.
Párový T test bude použit k porovnání rozdílu v poměru MSC, angiogenezi a buněčné proliferaci u každého pacienta pomocí softwaru SPSS 18.0 pro Windows (SPSS, Chicago, IL, USA).
Neparametrický test bude použit pro srovnání středních hodnot s p<0,05 považovanými za statisticky významné.
|
12 měsíců
|
|
Test monofilu Semmes Weinstein
Časové okno: 0 měsíc
|
monofil o velikosti 0,57 se vzpěrnou silou 10 gm je klinicky uznávanou hranicí pro přítomnost nebo nepřítomnost ochranného pocitu.
Měření budou standardizována na 3 místech; 1. metatarzální, 3. metatarzální a 5. metatarzální.
|
0 měsíc
|
|
Test monofilu Semmes Weinstein
Časové okno: 1 měsíc
|
monofil o velikosti 0,57 se vzpěrnou silou 10 gm je klinicky uznávanou hranicí pro přítomnost nebo nepřítomnost ochranného pocitu.
Měření budou standardizována na 3 místech; 1. metatarzální, 3. metatarzální a 5. metatarzální.
|
1 měsíc
|
|
Test monofilu Semmes Weinstein
Časové okno: 3 měsíce
|
monofil o velikosti 0,57 se vzpěrnou silou 10 gm je klinicky uznávanou hranicí pro přítomnost nebo nepřítomnost ochranného pocitu.
Měření budou standardizována na 3 místech; 1. metatarzální, 3. metatarzální a 5. metatarzální.
|
3 měsíce
|
|
Test monofilu Semmes Weinstein
Časové okno: 6 měsíců
|
monofil o velikosti 0,57 se vzpěrnou silou 10 gm je klinicky uznávanou hranicí pro přítomnost nebo nepřítomnost ochranného pocitu.
Měření budou standardizována na 3 místech; 1. metatarzální, 3. metatarzální a 5. metatarzální.
|
6 měsíců
|
|
Test monofilu Semmes Weinstein
Časové okno: 12 měsíců
|
monofil o velikosti 0,57 se vzpěrnou silou 10 gm je klinicky uznávanou hranicí pro přítomnost nebo nepřítomnost ochranného pocitu.
Měření budou standardizována na 3 místech; 1. metatarzální, 3. metatarzální a 5. metatarzální.
|
12 měsíců
|
|
Sekce neurogenních markerů
Časové okno: 0 měsíc
|
3mm biopsie děrování (RazorMed) bude získána z okraje rány v několika časových bodech.
Vzorky budou zpracovány pro zalití parafínem a budou nařezány sériové tenké řezy 7μm.
Vzorky budou zbaveny vosku a rehydratovány.
Po získání antigenu (roztokem Citrate Antigen Retrieval, ~30 minut, 65 °C) a permeabilizaci (pomocí Triton™ X-100) budou přes noc inkubovány markery pro axon (beta-tubulin 3) (38) a budou inkubovány odpovídající sekundární protilátky. po dobu 1 hodiny.
Pozitivně obarvená oblast v zóně DFU u každého pacienta bude kvantifikována pomocí zobrazovacího softwaru podle publikovaného protokolu.
Párový T test bude použit k porovnání rozdílu v ploše axonu u každého pacienta pomocí softwaru SPSS 18.0 pro Windows (SPSS, Chicago, IL, USA).
Neparametrický test bude použit pro srovnání středních hodnot s p<0,05 považovanými za statisticky významné.
|
0 měsíc
|
|
Sekce neurogenních markerů
Časové okno: 1 měsíc
|
3mm biopsie děrování (RazorMed) bude získána z okraje rány v několika časových bodech.
Vzorky budou zpracovány pro zalití parafínem a budou nařezány sériové tenké řezy 7μm.
Vzorky budou zbaveny vosku a rehydratovány.
Po získání antigenu (roztokem Citrate Antigen Retrieval, ~30 minut, 65 °C) a permeabilizaci (pomocí Triton™ X-100) budou přes noc inkubovány markery pro axon (beta-tubulin 3) (38) a budou inkubovány odpovídající sekundární protilátky. po dobu 1 hodiny.
Pozitivně obarvená oblast v zóně DFU u každého pacienta bude kvantifikována pomocí zobrazovacího softwaru podle publikovaného protokolu.
Párový T test bude použit k porovnání rozdílu v ploše axonu u každého pacienta pomocí softwaru SPSS 18.0 pro Windows (SPSS, Chicago, IL, USA).
Neparametrický test bude použit pro srovnání středních hodnot s p<0,05 považovanými za statisticky významné.
|
1 měsíc
|
|
Sekce neurogenních markerů
Časové okno: 3 měsíce
|
3mm biopsie děrování (RazorMed) bude získána z okraje rány v několika časových bodech.
Vzorky budou zpracovány pro zalití parafínem a budou nařezány sériové tenké řezy 7μm.
Vzorky budou zbaveny vosku a rehydratovány.
Po získání antigenu (roztokem Citrate Antigen Retrieval, ~30 minut, 65 °C) a permeabilizaci (pomocí Triton™ X-100) budou přes noc inkubovány markery pro axon (beta-tubulin 3) (38) a budou inkubovány odpovídající sekundární protilátky. po dobu 1 hodiny.
Pozitivně obarvená oblast v zóně DFU u každého pacienta bude kvantifikována pomocí zobrazovacího softwaru podle publikovaného protokolu.
Párový T test bude použit k porovnání rozdílu v ploše axonu u každého pacienta pomocí softwaru SPSS 18.0 pro Windows (SPSS, Chicago, IL, USA).
Neparametrický test bude použit pro srovnání středních hodnot s p<0,05 považovanými za statisticky významné.
|
3 měsíce
|
|
Sekce neurogenních markerů
Časové okno: 6 měsíců
|
3mm biopsie děrování (RazorMed) bude získána z okraje rány v několika časových bodech.
Vzorky budou zpracovány pro zalití parafínem a budou nařezány sériové tenké řezy 7μm.
Vzorky budou zbaveny vosku a rehydratovány.
Po získání antigenu (roztokem Citrate Antigen Retrieval, ~30 minut, 65 °C) a permeabilizaci (pomocí Triton™ X-100) budou přes noc inkubovány markery pro axon (beta-tubulin 3) (38) a budou inkubovány odpovídající sekundární protilátky. po dobu 1 hodiny.
Pozitivně obarvená oblast v zóně DFU u každého pacienta bude kvantifikována pomocí zobrazovacího softwaru podle publikovaného protokolu.
Párový T test bude použit k porovnání rozdílu v ploše axonu u každého pacienta pomocí softwaru SPSS 18.0 pro Windows (SPSS, Chicago, IL, USA).
Neparametrický test bude použit pro srovnání středních hodnot s p<0,05 považovanými za statisticky významné.
|
6 měsíců
|
|
Sekce neurogenních markerů
Časové okno: 12 měsíců
|
3mm biopsie děrování (RazorMed) bude získána z okraje rány v několika časových bodech.
Vzorky budou zpracovány pro zalití parafínem a budou nařezány sériové tenké řezy 7μm.
Vzorky budou zbaveny vosku a rehydratovány.
Po získání antigenu (roztokem Citrate Antigen Retrieval, ~30 minut, 65 °C) a permeabilizaci (pomocí Triton™ X-100) budou přes noc inkubovány markery pro axon (beta-tubulin 3) (38) a budou inkubovány odpovídající sekundární protilátky. po dobu 1 hodiny.
Pozitivně obarvená oblast v zóně DFU u každého pacienta bude kvantifikována pomocí zobrazovacího softwaru podle publikovaného protokolu.
Párový T test bude použit k porovnání rozdílu v ploše axonu u každého pacienta pomocí softwaru SPSS 18.0 pro Windows (SPSS, Chicago, IL, USA).
Neparametrický test bude použit pro srovnání středních hodnot s p<0,05 považovanými za statisticky významné.
|
12 měsíců
|
|
Průtoková cytometrie zánětlivých buněk
Časové okno: 0 měsíc
|
Bude odebráno 10 ml periferní krve.
Mononukleární buňky budou shromážděny izolací Ficoll-Paque hustotní gradientovou centrifugací.
Populace klasických a neklasických monocytů budou analyzovány průtokovou cytometrií a identifikovány z podílů CD172a+ a CD43+ buněk.
|
0 měsíc
|
|
Průtoková cytometrie zánětlivých buněk
Časové okno: 1 měsíc
|
Bude odebráno 10 ml periferní krve.
Mononukleární buňky budou shromážděny izolací Ficoll-Paque hustotní gradientovou centrifugací.
Populace klasických a neklasických monocytů budou analyzovány průtokovou cytometrií a identifikovány z podílů CD172a+ a CD43+ buněk.
|
1 měsíc
|
|
Průtoková cytometrie zánětlivých buněk
Časové okno: 3 měsíce
|
Bude odebráno 10 ml periferní krve.
Mononukleární buňky budou shromážděny izolací Ficoll-Paque hustotní gradientovou centrifugací.
Populace klasických a neklasických monocytů budou analyzovány průtokovou cytometrií a identifikovány z podílů CD172a+ a CD43+ buněk.
|
3 měsíce
|
|
Průtoková cytometrie zánětlivých buněk
Časové okno: 6 měsíců
|
Bude odebráno 10 ml periferní krve.
Mononukleární buňky budou shromážděny izolací Ficoll-Paque hustotní gradientovou centrifugací.
Populace klasických a neklasických monocytů budou analyzovány průtokovou cytometrií a identifikovány z podílů CD172a+ a CD43+ buněk.
|
6 měsíců
|
|
Průtoková cytometrie zánětlivých buněk
Časové okno: 12 měsíců
|
Bude odebráno 10 ml periferní krve.
Mononukleární buňky budou shromážděny izolací Ficoll-Paque hustotní gradientovou centrifugací.
Populace klasických a neklasických monocytů budou analyzovány průtokovou cytometrií a identifikovány z podílů CD172a+ a CD43+ buněk.
|
12 měsíců
|
|
Imunofluorescenční barvení makrofágů
Časové okno: 0 měsíc
|
Bude získána 3mm biopsie (RazorMed) a připravena pro parafínové řezy.
Populace a lokalizace monocytů (klasické i neklasické fenotypy) a makrofágů (fenotyp M1 a M2) v místě poranění kůže budou určeny imunofluorescenčním barvením specifickými protilátkami proti CD68 (obecný marker pro makrofágy), anti-iNOS ( makrofág M1), CD206 (makrofág M2) [32] CD172a (obecný marker pro monocyty) a CD43 (neklasický marker specifický pro monocyty).
|
0 měsíc
|
|
Imunofluorescenční barvení makrofágů
Časové okno: 1 měsíc
|
Bude získána 3mm biopsie (RazorMed) a připravena pro parafínové řezy.
Populace a lokalizace monocytů (klasické i neklasické fenotypy) a makrofágů (fenotyp M1 a M2) v místě poranění kůže budou určeny imunofluorescenčním barvením specifickými protilátkami proti CD68 (obecný marker pro makrofágy), anti-iNOS ( makrofág M1), CD206 (makrofág M2) [32] CD172a (obecný marker pro monocyty) a CD43 (neklasický marker specifický pro monocyty).
|
1 měsíc
|
|
Imunofluorescenční barvení makrofágů
Časové okno: 3 měsíce
|
Bude získána 3mm biopsie (RazorMed) a připravena pro parafínové řezy.
Populace a lokalizace monocytů (klasické i neklasické fenotypy) a makrofágů (fenotyp M1 a M2) v místě poranění kůže budou určeny imunofluorescenčním barvením specifickými protilátkami proti CD68 (obecný marker pro makrofágy), anti-iNOS ( makrofág M1), CD206 (makrofág M2) [32] CD172a (obecný marker pro monocyty) a CD43 (neklasický marker specifický pro monocyty).
|
3 měsíce
|
|
Imunofluorescenční barvení makrofágů
Časové okno: 6 měsíců
|
Bude získána 3mm biopsie (RazorMed) a připravena pro parafínové řezy.
Populace a lokalizace monocytů (klasické i neklasické fenotypy) a makrofágů (fenotyp M1 a M2) v místě poranění kůže budou určeny imunofluorescenčním barvením specifickými protilátkami proti CD68 (obecný marker pro makrofágy), anti-iNOS ( makrofág M1), CD206 (makrofág M2) [32] CD172a (obecný marker pro monocyty) a CD43 (neklasický marker specifický pro monocyty).
|
6 měsíců
|
|
Imunofluorescenční barvení makrofágů
Časové okno: 12 měsíců
|
Bude získána 3mm biopsie (RazorMed) a připravena pro parafínové řezy.
Populace a lokalizace monocytů (klasické i neklasické fenotypy) a makrofágů (fenotyp M1 a M2) v místě poranění kůže budou určeny imunofluorescenčním barvením specifickými protilátkami proti CD68 (obecný marker pro makrofágy), anti-iNOS ( makrofág M1), CD206 (makrofág M2) [32] CD172a (obecný marker pro monocyty) a CD43 (neklasický marker specifický pro monocyty).
|
12 měsíců
|
|
Identifikace regulačních cytokinů pro mobilizaci mezenchymálních kmenových buněk periferní krve (PB-MSC).
Časové okno: 0 měsíc
|
10 ml periferní krve bude odebráno v několika časových bodech.
Každý vzorek periferní krve bude odebrán pomocí zkumavek obsahujících K2-EDTA.
Vzorky krve budou centrifugovány při 1800 g po dobu 6 minut při 4 °C, aby se získala plazma, a rozděleny do 1 ml alikvotů a skladovány při -80 °C.
Diferenciální proteinová exprese bude určena pomocí 8-plexových izobarických značek pro kvantitativní proteomickou analýzu založenou na relativní a absolutní kvantifikaci (iTRAQ).
|
0 měsíc
|
|
Identifikace regulačních cytokinů pro mobilizaci mezenchymálních kmenových buněk periferní krve (PB-MSC).
Časové okno: 1 měsíc
|
10 ml periferní krve bude odebráno v několika časových bodech.
Každý vzorek periferní krve bude odebrán pomocí zkumavek obsahujících K2-EDTA.
Vzorky krve budou centrifugovány při 1800 g po dobu 6 minut při 4 °C, aby se získala plazma, a rozděleny do 1 ml alikvotů a skladovány při -80 °C.
Diferenciální proteinová exprese bude určena pomocí 8-plexových izobarických značek pro kvantitativní proteomickou analýzu založenou na relativní a absolutní kvantifikaci (iTRAQ).
|
1 měsíc
|
|
Identifikace regulačních cytokinů pro mobilizaci mezenchymálních kmenových buněk periferní krve (PB-MSC).
Časové okno: 3 měsíce
|
10 ml periferní krve bude odebráno v několika časových bodech.
Každý vzorek periferní krve bude odebrán pomocí zkumavek obsahujících K2-EDTA.
Vzorky krve budou centrifugovány při 1800 g po dobu 6 minut při 4 °C, aby se získala plazma, a rozděleny do 1 ml alikvotů a skladovány při -80 °C.
Diferenciální proteinová exprese bude určena pomocí 8-plexových izobarických značek pro kvantitativní proteomickou analýzu založenou na relativní a absolutní kvantifikaci (iTRAQ).
|
3 měsíce
|
|
Identifikace regulačních cytokinů pro mobilizaci mezenchymálních kmenových buněk periferní krve (PB-MSC).
Časové okno: 6 měsíců
|
10 ml periferní krve bude odebráno v několika časových bodech.
Každý vzorek periferní krve bude odebrán pomocí zkumavek obsahujících K2-EDTA.
Vzorky krve budou centrifugovány při 1800 g po dobu 6 minut při 4 °C, aby se získala plazma, a rozděleny do 1 ml alikvotů a skladovány při -80 °C.
Diferenciální proteinová exprese bude určena pomocí 8-plexových izobarických značek pro kvantitativní proteomickou analýzu založenou na relativní a absolutní kvantifikaci (iTRAQ).
|
6 měsíců
|
|
Identifikace regulačních cytokinů pro mobilizaci mezenchymálních kmenových buněk periferní krve (PB-MSC).
Časové okno: 12 měsíců
|
10 ml periferní krve bude odebráno v několika časových bodech.
Každý vzorek periferní krve bude odebrán pomocí zkumavek obsahujících K2-EDTA.
Vzorky krve budou centrifugovány při 1800 g po dobu 6 minut při 4 °C, aby se získala plazma, a rozděleny do 1 ml alikvotů a skladovány při -80 °C.
Diferenciální proteinová exprese bude určena pomocí 8-plexových izobarických značek pro kvantitativní proteomickou analýzu založenou na relativní a absolutní kvantifikaci (iTRAQ).
|
12 měsíců
|
Spolupracovníci a vyšetřovatelé
Sponzor
Termíny studijních záznamů
Hlavní termíny studia
Začátek studia (Očekávaný)
Primární dokončení (Očekávaný)
Dokončení studie (Očekávaný)
Termíny zápisu do studia
První předloženo
První předloženo, které splnilo kritéria kontroly kvality
První zveřejněno (Odhad)
Aktualizace studijních záznamů
Poslední zveřejněná aktualizace (Odhad)
Odeslaná poslední aktualizace, která splnila kritéria kontroly kvality
Naposledy ověřeno
Více informací
Termíny související s touto studií
Další relevantní podmínky MeSH
Další identifikační čísla studie
- TTTFootUlcers
Informace o lécích a zařízeních, studijní dokumenty
Studuje lékový produkt regulovaný americkým FDA
Studuje produkt zařízení regulovaný americkým úřadem FDA
Tyto informace byly beze změn načteny přímo z webu clinicaltrials.gov. Máte-li jakékoli požadavky na změnu, odstranění nebo aktualizaci podrobností studie, kontaktujte prosím register@clinicaltrials.gov. Jakmile bude změna implementována na clinicaltrials.gov, bude automaticky aktualizována i na našem webu .
Klinické studie na Diabetický vřed na nohou
-
National Taiwan University HospitalNábor
-
Riphah International UniversityDokončeno
-
University Hospital, MontpellierDokončeno
-
Bnai Zion Medical CenterNeznámý
-
Stephen BarrettUS Neuropathy CentersDokončeno
-
BioMimetic TherapeuticsDokončenoFoot FusionSpojené státy, Kanada
-
Bozok UniversityZatím nenabírámePohodlí | Diabetik | Jóga smíchu
-
US Neuropathy CentersZápis na pozvánku
-
University of Wisconsin, MadisonUnited States Department of DefenseDokončenoAmputace dolní končetiny | Drop FootSpojené státy
-
Kessler FoundationNeznámý
Klinické studie na Konvenční
-
Inonu UniversityDokončenoMrtvice | Snímky motoru | Výcvik pozorování akcí | Odstupňované snímky motoruTurecko (Türkiye)