Klinische en mechanistische studie van transversaal tibiaal transport bij complexe voetzweren
20 januari 2023 bijgewerkt door: Samuel KK Ling, Chinese University of Hong Kong
TTT is een nieuwe chirurgische techniek die mogelijk het langdurige tekort aan het zoeken naar een effectieve behandeling van diabetische voetzweren kan oplossen, de noodzaak van amputaties vermindert en de sociaal-economische impact ervan verzacht. Deze proef zal 's werelds eerste prospectieve RCT zijn om de veelbelovende klinische studies over het klinische voordeel van TTT bij de behandeling van diabetische voetulcera te verifiëren. Bovendien zullen we met bloedmonsters van deze studie de verschillende systemisch circulerende oplosbare factoren in relatie tot neovascularisatie, immunomodulatie en stamcelmobilisatie kunnen bestuderen. Door het bloed en verschillende tijdstippen af te nemen, zullen we het complexe samenspel tussen verschillende biomarkers beter begrijpen. Met deze GRF kunnen we weefselmonsters verkrijgen om de histologische cellulaire veranderingen na TTT-chirurgie te analyseren. Het zal ons meer inzicht geven in hoe TTT werkt en ons mogelijk helpen de belangrijke veranderingen en tijdschema's met betrekking tot deze interventie te lokaliseren.
De PI, Co-I's en medewerkers creëren een sterk team van clinici en wetenschappers met een solide klinische en basiswetenschappelijke staat van dienst. Het team heeft richtlijnen en chirurgische technieken in TTT gepubliceerd en heeft verschillende trainingen voor kadavers gegeven om lokale orthopedisch chirurgen de TTT-chirurgische techniek te leren. Het team heeft ook een TTT-model bij ratten opgesteld en gepubliceerd over TTT-immunomodulatie en neovascularisatie naast andere lopende mechanistische experimenten bij dieren.
Deze prospectieve gerandomiseerde, gecontroleerde studie in meerdere centra kan als basis dienen voor de lancering van deze kosteneffectieve TTT-operatie om neovascularisatie, neurogenese, immunomodulatie en mobilisatie van MSC's te reguleren voor de behandeling van verschillende chronische aandoeningen. Regeneratieve geneeskunde is een industrie waarin miljoenen dollars worden uitgegeven en het potentiële gebruik van TTT kan resulteren in een reeks klinische toepassingen die niet beperkt zijn tot DFU's.
Studie Overzicht
Toestand
Nog niet aan het werven
Conditie
Interventie / Behandeling
Studietype
Ingrijpend
Inschrijving (Verwacht)
54
Fase
- Niet toepasbaar
Deelname Criteria
Onderzoekers zoeken naar mensen die aan een bepaalde beschrijving voldoen, de zogenaamde geschiktheidscriteria. Enkele voorbeelden van deze criteria zijn iemands algemene gezondheidstoestand of eerdere behandelingen.
Geschiktheidscriteria
Leeftijden die in aanmerking komen voor studie
18 jaar en ouder (Volwassen, Oudere volwassene)
Accepteert gezonde vrijwilligers
Nee
Geslachten die in aanmerking komen voor studie
Allemaal
Beschrijving
Inclusiecriteria:
- Volwassenen >18 jaar
- Patiënten met een Wagner stadium 4 voetzweer (gedeeltelijk voetgangreen)
- Geen actieve wondinfectie zoals bevestigd door bacteriële fluorescentiebeeldvorming. (het draagbare apparaat van Moleculight i:X, Smith and Nephew licht op met 405nm violet licht dat ervoor zorgt dat bacteriën karakteristieke endogene fluorescentiesignalen uitzenden die in realtime op het scherm van het apparaat worden gevisualiseerd, waardoor een objectieve meting van adequaat chirurgisch debridement mogelijk is)
- Biochemisch bevestigde diabetes met nuchtere plasmaglucose ≥ 7,0 mmol/L, of een willekeurige plasmaglucose ≥ 11,1 mmol/L of hemoglobine A1c (HbA1c)-niveau ≥ 6,5%
- Uitgeprobeerd voor angioplastiek/vasculaire bypass door de vaatchirurg
- Triage uit reconstructieve flapoperatie door de microvasculaire chirurg
Uitsluitingscriteria:
- Ongecontroleerde sepsis
- Contra-indicaties voor het aanbrengen van een extern fixatieapparaat in het scheenbeen (bovenliggende huidaandoeningen, chirurgische hardware zoals scheenbeennagels, totale knieprothese etc.)
- Ernstige medische comorbiditeiten die veilige anesthesie in de weg staan (recent myocardinfarct, beperkte longfunctie etc.)
- Geestelijke of lichamelijke handicap die het vermogen om zich aan het interventieplan te houden kan aantasten, b.v. ernstige dementie, psychose enz.
- Recente revascularisatieprocedure (<12 weken)
- Recente medicatie/interventie die de celproliferatie beïnvloedt (bijv. chemotherapie, radiotherapie enz.), radiotherapie enz.)
Studie plan
Dit gedeelte bevat details van het studieplan, inclusief hoe de studie is opgezet en wat de studie meet.
Hoe is de studie opgezet?
Ontwerpdetails
- Primair doel: Behandeling
- Toewijzing: Gerandomiseerd
- Interventioneel model: Parallelle opdracht
- Masker: Geen (open label)
Wapens en interventies
Deelnemersgroep / Arm |
Interventie / Behandeling |
|---|---|
|
Ander: Controlegroep
Conventionele behandeling: verband + negatieve druktherapie
|
Verband + negatieve drukwondtherapie
|
|
Experimenteel: TTT-groep
Verband + negatieve druk wondtherapie + transversaal tibiaal transport
|
Transversaal tibiatransport is een nieuwe aanpassing van concepten die worden gebruikt bij de histogenese van afleiding.
Het meest gebruikelijke gebruik van dit chirurgische principe is bij botverlengende chirurgie, een beproefde chirurgische procedure waarbij een externe fixator op het bot wordt aangebracht, een corticotomie wordt gemaakt en het bot geleidelijk wordt verlengd met de optimale snelheid van 0,5 mm/12 uur.
De biologische mechanismen van afleidingshistogenese omvatten het activeren van signaalroutes zoals cytokines Interleukine 1 en Interleukine 6, pro-inflammatoire markers TNF alfa, pro-osteogene TGF-bèta, BMP's en pro-angiogene factoren VEGF en angiopoëtine .
TTT maakt gebruik van het concept van afleidingshistiogenese, maar afleiding wordt uitgevoerd in het transversale vlak in plaats van een longitudinale afleiding.
Bovendien is de periode van afleiding gekoppeld aan een overeenkomstige compressieperiode en resulteert uiteindelijk niet in netto verandering in ledemaatlengte.
|
Wat meet het onderzoek?
Primaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
Wond grootte
Tijdsspanne: 0 maand
|
De grootte van de wond wordt gemeten met behulp van digitale fotografie met gestandaardiseerde markeerpunten.
|
0 maand
|
|
Wond grootte
Tijdsspanne: 1 maand
|
De grootte van de wond wordt gemeten met behulp van digitale fotografie met gestandaardiseerde markeerpunten.
|
1 maand
|
|
Wond grootte
Tijdsspanne: 3 maanden
|
De grootte van de wond wordt gemeten met behulp van digitale fotografie met gestandaardiseerde markeerpunten.
|
3 maanden
|
|
Wond grootte
Tijdsspanne: 6 maanden
|
De grootte van de wond wordt gemeten met behulp van digitale fotografie met gestandaardiseerde markeerpunten.
|
6 maanden
|
|
Wond grootte
Tijdsspanne: 12 maanden
|
De grootte van de wond wordt gemeten met behulp van digitale fotografie met gestandaardiseerde markeerpunten.
|
12 maanden
|
Secundaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
Voet functie
Tijdsspanne: 0 maand
|
De voetfunctie wordt objectief gemeten met behulp van onze gevalideerde Chinese Foot and Ankle Outcome Score of de originele Engelse versie.
|
0 maand
|
|
Voet functie
Tijdsspanne: 1 maand
|
De voetfunctie wordt objectief gemeten met behulp van onze gevalideerde Chinese Foot and Ankle Outcome Score of de originele Engelse versie.
|
1 maand
|
|
Voet functie
Tijdsspanne: 3 maanden
|
De voetfunctie wordt objectief gemeten met behulp van onze gevalideerde Chinese Foot and Ankle Outcome Score of de originele Engelse versie.
|
3 maanden
|
|
Voet functie
Tijdsspanne: 6 maanden
|
De voetfunctie wordt objectief gemeten met behulp van onze gevalideerde Chinese Foot and Ankle Outcome Score of de originele Engelse versie.
|
6 maanden
|
|
Voet functie
Tijdsspanne: 12 maanden
|
De voetfunctie wordt objectief gemeten met behulp van onze gevalideerde Chinese Foot and Ankle Outcome Score of de originele Engelse versie.
|
12 maanden
|
|
Incidentie van amputatie
Tijdsspanne: Tot 52 weken
|
Incidentie van amputatie
|
Tot 52 weken
|
|
Enkelarmdrukindex
Tijdsspanne: 0 maand
|
De enkel-armdrukindex (API) is een klinische meting van perifere vasculaire perfusie.
|
0 maand
|
|
Enkelarmdrukindex
Tijdsspanne: 1 maand
|
De enkel-armdrukindex (API) is een klinische meting van perifere vasculaire perfusie.
|
1 maand
|
|
Enkelarmdrukindex
Tijdsspanne: 3 maanden
|
De enkel-armdrukindex (API) is een klinische meting van perifere vasculaire perfusie.
|
3 maanden
|
|
Enkelarmdrukindex
Tijdsspanne: 6 maanden
|
De enkel-armdrukindex (API) is een klinische meting van perifere vasculaire perfusie.
|
6 maanden
|
|
Enkelarmdrukindex
Tijdsspanne: 12 maanden
|
De enkel-armdrukindex (API) is een klinische meting van perifere vasculaire perfusie.
|
12 maanden
|
|
ELISA van angiogene factoren
Tijdsspanne: 0 maand
|
Monsters van perifeer bloed van 10 ml worden op meerdere tijdstippen afgenomen en de vasculaire endotheliale groeifactor (VEGF), basische fibroblastgroeifactor (bFGF), epidermale groeifactor (EGF) en van bloedplaatjes afgeleide groeifactor (PDGF) van het menselijk serum worden geanalyseerd met een ELISA-kit werd verwerkt volgens het bijbehorende protocol.
|
0 maand
|
|
ELISA van angiogene factoren
Tijdsspanne: 1 maand
|
Monsters van perifeer bloed van 10 ml worden op meerdere tijdstippen afgenomen en de vasculaire endotheliale groeifactor (VEGF), basische fibroblastgroeifactor (bFGF), epidermale groeifactor (EGF) en van bloedplaatjes afgeleide groeifactor (PDGF) van het menselijk serum worden geanalyseerd met een ELISA-kit werd verwerkt volgens het bijbehorende protocol.
|
1 maand
|
|
ELISA van angiogene factoren
Tijdsspanne: 3 maanden
|
Monsters van perifeer bloed van 10 ml worden op meerdere tijdstippen afgenomen en de vasculaire endotheliale groeifactor (VEGF), basische fibroblastgroeifactor (bFGF), epidermale groeifactor (EGF) en van bloedplaatjes afgeleide groeifactor (PDGF) van het menselijk serum worden geanalyseerd met een ELISA-kit werd verwerkt volgens het bijbehorende protocol.
|
3 maanden
|
|
ELISA van angiogene factoren
Tijdsspanne: 6 maanden
|
Monsters van perifeer bloed van 10 ml worden op meerdere tijdstippen afgenomen en de vasculaire endotheliale groeifactor (VEGF), basische fibroblastgroeifactor (bFGF), epidermale groeifactor (EGF) en van bloedplaatjes afgeleide groeifactor (PDGF) van het menselijk serum worden geanalyseerd met een ELISA-kit werd verwerkt volgens het bijbehorende protocol.
|
6 maanden
|
|
ELISA van angiogene factoren
Tijdsspanne: 12 maanden
|
Monsters van perifeer bloed van 10 ml worden op meerdere tijdstippen afgenomen en de vasculaire endotheliale groeifactor (VEGF), basische fibroblastgroeifactor (bFGF), epidermale groeifactor (EGF) en van bloedplaatjes afgeleide groeifactor (PDGF) van het menselijk serum worden geanalyseerd met een ELISA-kit werd verwerkt volgens het bijbehorende protocol.
|
12 maanden
|
|
Immunokleuring van angiogene markers
Tijdsspanne: 0 maand
|
Op meerdere tijdstippen zal een ponsbiopsie van 3 mm (RazorMed) van de wondrand worden verkregen.
De monsters worden verwerkt voor paraffine-inbedding en er worden seriële dunne secties van 7 μm gesneden.
Markers voor angiogenese (CD31, alpha-SMA) en celproliferatie (Ki-67) antilichamen zullen worden gebruikt voor immunokleuring op de paraffinesectie volgens het eerder gepubliceerde protocol.
De positief gekleurde celaantallen in de DFU-zone bij elke patiënt zullen worden gekwantificeerd met behulp van beeldvormingssoftware volgens het gepubliceerde protocol.
De gepaarde T-test zal worden gebruikt om het verschil in MSC-aandeel, angiogenese en celproliferatie bij elke patiënt te vergelijken met SPSS 18.0-software voor Windows (SPSS, Chicago, IL, VS).
Niet-parametrische test zal worden gebruikt voor vergelijking van gemiddelde waarden met p<0,05 die als statistisch significant wordt beschouwd.
|
0 maand
|
|
Immunokleuring van angiogene markers
Tijdsspanne: 1 maand
|
Op meerdere tijdstippen zal een ponsbiopsie van 3 mm (RazorMed) van de wondrand worden verkregen.
De monsters worden verwerkt voor paraffine-inbedding en er worden seriële dunne secties van 7 μm gesneden.
Markers voor angiogenese (CD31, alpha-SMA) en celproliferatie (Ki-67) antilichamen zullen worden gebruikt voor immunokleuring op de paraffinesectie volgens het eerder gepubliceerde protocol.
De positief gekleurde celaantallen in de DFU-zone bij elke patiënt zullen worden gekwantificeerd met behulp van beeldvormingssoftware volgens het gepubliceerde protocol.
De gepaarde T-test zal worden gebruikt om het verschil in MSC-aandeel, angiogenese en celproliferatie bij elke patiënt te vergelijken met SPSS 18.0-software voor Windows (SPSS, Chicago, IL, VS).
Niet-parametrische test zal worden gebruikt voor vergelijking van gemiddelde waarden met p<0,05 die als statistisch significant wordt beschouwd.
|
1 maand
|
|
Immunokleuring van angiogene markers
Tijdsspanne: 3 maanden
|
Op meerdere tijdstippen zal een ponsbiopsie van 3 mm (RazorMed) van de wondrand worden verkregen.
De monsters worden verwerkt voor paraffine-inbedding en seriële dunne secties van 7 μm worden gesneden.
Markers voor angiogenese (CD31, alpha-SMA) en celproliferatie (Ki-67) antilichamen zullen worden gebruikt voor immunokleuring op de paraffinesectie volgens het eerder gepubliceerde protocol.
De positief gekleurde celaantallen in de DFU-zone bij elke patiënt zullen worden gekwantificeerd met behulp van beeldvormingssoftware volgens het gepubliceerde protocol.
De gepaarde T-test zal worden gebruikt om het verschil in MSC-aandeel, angiogenese en celproliferatie bij elke patiënt te vergelijken met SPSS 18.0-software voor Windows (SPSS, Chicago, IL, VS).
Niet-parametrische test zal worden gebruikt voor vergelijking van gemiddelde waarden met p<0,05 die als statistisch significant wordt beschouwd.
|
3 maanden
|
|
Immunokleuring van angiogene markers
Tijdsspanne: 6 maanden
|
Op meerdere tijdstippen zal een ponsbiopsie van 3 mm (RazorMed) van de wondrand worden verkregen.
De monsters worden verwerkt voor paraffine-inbedding en er worden seriële dunne secties van 7 μm gesneden.
Markers voor angiogenese (CD31, alpha-SMA) en celproliferatie (Ki-67) antilichamen zullen worden gebruikt voor immunokleuring op de paraffinesectie volgens het eerder gepubliceerde protocol.
De positief gekleurde celaantallen in de DFU-zone bij elke patiënt zullen worden gekwantificeerd met behulp van beeldvormingssoftware volgens het gepubliceerde protocol.
De gepaarde T-test zal worden gebruikt om het verschil in MSC-aandeel, angiogenese en celproliferatie bij elke patiënt te vergelijken met SPSS 18.0-software voor Windows (SPSS, Chicago, IL, VS).
Niet-parametrische test zal worden gebruikt voor vergelijking van gemiddelde waarden met p<0,05 die als statistisch significant wordt beschouwd.
|
6 maanden
|
|
Immunokleuring van angiogene markers
Tijdsspanne: 12 maanden
|
Op meerdere tijdstippen zal een ponsbiopsie van 3 mm (RazorMed) van de wondrand worden verkregen.
De monsters worden verwerkt voor paraffine-inbedding en er worden seriële dunne secties van 7 μm gesneden.
Markers voor angiogenese (CD31, alpha-SMA) en celproliferatie (Ki-67) antilichamen zullen worden gebruikt voor immunokleuring op de paraffinesectie volgens het eerder gepubliceerde protocol.
De positief gekleurde celaantallen in de DFU-zone bij elke patiënt zullen worden gekwantificeerd met behulp van beeldvormingssoftware volgens het gepubliceerde protocol.
De gepaarde T-test zal worden gebruikt om het verschil in MSC-aandeel, angiogenese en celproliferatie bij elke patiënt te vergelijken met SPSS 18.0-software voor Windows (SPSS, Chicago, IL, VS).
Niet-parametrische test zal worden gebruikt voor vergelijking van gemiddelde waarden met p<0,05 die als statistisch significant wordt beschouwd.
|
12 maanden
|
|
Semmes Weinstein monofilamenttest
Tijdsspanne: 0 maand
|
een monofilament met een afmeting van 0,57, met een knikkracht van 10 gm, is de klinisch aanvaarde grenswaarde voor de aan- of afwezigheid van een beschermend gevoel.
Metingen worden gestandaardiseerd naar 3 locaties; het 1e middenvoetsbeentje, het 3e middenvoetsbeentje en het 5e middenvoetsbeentje.
|
0 maand
|
|
Semmes Weinstein monofilamenttest
Tijdsspanne: 1 maand
|
een monofilament met een afmeting van 0,57, met een knikkracht van 10 gm, is de klinisch aanvaarde grenswaarde voor de aan- of afwezigheid van een beschermend gevoel.
Metingen worden gestandaardiseerd naar 3 locaties; het 1e middenvoetsbeentje, het 3e middenvoetsbeentje en het 5e middenvoetsbeentje.
|
1 maand
|
|
Semmes Weinstein monofilamenttest
Tijdsspanne: 3 maanden
|
een monofilament met een afmeting van 0,57, met een knikkracht van 10 gm, is de klinisch aanvaarde grenswaarde voor de aan- of afwezigheid van een beschermend gevoel.
Metingen worden gestandaardiseerd naar 3 locaties; het 1e middenvoetsbeentje, het 3e middenvoetsbeentje en het 5e middenvoetsbeentje.
|
3 maanden
|
|
Semmes Weinstein monofilamenttest
Tijdsspanne: 6 maanden
|
een monofilament met een afmeting van 0,57, met een knikkracht van 10 gm, is de klinisch aanvaarde grenswaarde voor de aan- of afwezigheid van een beschermend gevoel.
Metingen worden gestandaardiseerd naar 3 locaties; het 1e middenvoetsbeentje, het 3e middenvoetsbeentje en het 5e middenvoetsbeentje.
|
6 maanden
|
|
Semmes Weinstein monofilamenttest
Tijdsspanne: 12 maanden
|
een monofilament met een afmeting van 0,57, met een knikkracht van 10 gm, is de klinisch aanvaarde grenswaarde voor de aan- of afwezigheid van een beschermend gevoel.
Metingen worden gestandaardiseerd naar 3 locaties; het 1e middenvoetsbeentje, het 3e middenvoetsbeentje en het 5e middenvoetsbeentje.
|
12 maanden
|
|
Sectie van neurogene markers
Tijdsspanne: 0 maand
|
Op meerdere tijdstippen zal een ponsbiopsie van 3 mm (RazorMed) van de wondrand worden verkregen.
De monsters worden verwerkt voor paraffine-inbedding en seriële dunne secties van 7 μm worden gesneden.
De monsters worden van was ontdaan en gerehydrateerd.
Na antigeenherstel (door Citrate Antigen Retrieval-oplossing, ~30min, 65℃) en permeabilisatie (door Triton™ X-100), zullen markers voor axon (bèta-tubuline 3) (38) 's nachts worden geïncubeerd en het bijbehorende secundaire antilichaam zal worden geïncubeerd voor 1 uur.
Het positief gekleurde gebied in de DFU-zone bij elke patiënt zal worden gekwantificeerd met behulp van beeldvormingssoftware volgens het gepubliceerde protocol.
De gepaarde T-test zal worden gebruikt om het verschil in axongebied bij elke patiënt te vergelijken met SPSS 18.0-software voor Windows (SPSS, Chicago, IL, VS).
Niet-parametrische test zal worden gebruikt voor vergelijking van gemiddelde waarden met p<0,05 die als statistisch significant wordt beschouwd.
|
0 maand
|
|
Sectie van neurogene markers
Tijdsspanne: 1 maand
|
Op meerdere tijdstippen zal een ponsbiopsie van 3 mm (RazorMed) van de wondrand worden verkregen.
De monsters worden verwerkt voor paraffine-inbedding en seriële dunne secties van 7 μm worden gesneden.
De monsters worden van was ontdaan en gerehydrateerd.
Na antigeenherstel (door Citrate Antigen Retrieval-oplossing, ~30min, 65℃) en permeabilisatie (door Triton™ X-100), zullen markers voor axon (bèta-tubuline 3) (38) 's nachts worden geïncubeerd en het bijbehorende secundaire antilichaam zal worden geïncubeerd voor 1 uur.
Het positief gekleurde gebied in de DFU-zone bij elke patiënt zal worden gekwantificeerd met behulp van beeldvormingssoftware volgens het gepubliceerde protocol.
De gepaarde T-test zal worden gebruikt om het verschil in axongebied bij elke patiënt te vergelijken met SPSS 18.0-software voor Windows (SPSS, Chicago, IL, VS).
Niet-parametrische test zal worden gebruikt voor vergelijking van gemiddelde waarden met p<0,05 die als statistisch significant wordt beschouwd.
|
1 maand
|
|
Sectie van neurogene markers
Tijdsspanne: 3 maanden
|
Op meerdere tijdstippen zal een ponsbiopsie van 3 mm (RazorMed) van de wondrand worden verkregen.
De monsters worden verwerkt voor paraffine-inbedding en seriële dunne secties van 7 μm worden gesneden.
De monsters worden van was ontdaan en gerehydrateerd.
Na antigeenherstel (door Citrate Antigen Retrieval-oplossing, ~30min, 65℃) en permeabilisatie (door Triton™ X-100), zullen markers voor axon (bèta-tubuline 3) (38) 's nachts worden geïncubeerd en het bijbehorende secundaire antilichaam zal worden geïncubeerd voor 1 uur.
Het positief gekleurde gebied in de DFU-zone bij elke patiënt zal worden gekwantificeerd met behulp van beeldvormingssoftware volgens het gepubliceerde protocol.
De gepaarde T-test zal worden gebruikt om het verschil in axongebied bij elke patiënt te vergelijken met SPSS 18.0-software voor Windows (SPSS, Chicago, IL, VS).
Niet-parametrische test zal worden gebruikt voor vergelijking van gemiddelde waarden met p<0,05 die als statistisch significant wordt beschouwd.
|
3 maanden
|
|
Sectie van neurogene markers
Tijdsspanne: 6 maanden
|
Op meerdere tijdstippen zal een ponsbiopsie van 3 mm (RazorMed) van de wondrand worden verkregen.
De monsters worden verwerkt voor paraffine-inbedding en seriële dunne secties van 7 μm worden gesneden.
De monsters worden van was ontdaan en gerehydrateerd.
Na antigeenherstel (door Citrate Antigen Retrieval-oplossing, ~30min, 65℃) en permeabilisatie (door Triton™ X-100), zullen markers voor axon (bèta-tubuline 3) (38) 's nachts worden geïncubeerd en het bijbehorende secundaire antilichaam zal worden geïncubeerd voor 1 uur.
Het positief gekleurde gebied in de DFU-zone bij elke patiënt zal worden gekwantificeerd met behulp van beeldvormingssoftware volgens het gepubliceerde protocol.
De gepaarde T-test zal worden gebruikt om het verschil in axongebied bij elke patiënt te vergelijken met SPSS 18.0-software voor Windows (SPSS, Chicago, IL, VS).
Niet-parametrische test zal worden gebruikt voor vergelijking van gemiddelde waarden met p<0,05 die als statistisch significant wordt beschouwd.
|
6 maanden
|
|
Sectie van neurogene markers
Tijdsspanne: 12 maanden
|
Op meerdere tijdstippen zal een ponsbiopsie van 3 mm (RazorMed) van de wondrand worden verkregen.
De monsters worden verwerkt voor paraffine-inbedding en seriële dunne secties van 7 μm worden gesneden.
De monsters worden van was ontdaan en gerehydrateerd.
Na antigeenherstel (door Citrate Antigen Retrieval-oplossing, ~30min, 65℃) en permeabilisatie (door Triton™ X-100), zullen markers voor axon (bèta-tubuline 3) (38) 's nachts worden geïncubeerd en het bijbehorende secundaire antilichaam zal worden geïncubeerd voor 1 uur.
Het positief gekleurde gebied in de DFU-zone bij elke patiënt zal worden gekwantificeerd met behulp van beeldvormingssoftware volgens het gepubliceerde protocol.
De gepaarde T-test zal worden gebruikt om het verschil in axongebied bij elke patiënt te vergelijken met SPSS 18.0-software voor Windows (SPSS, Chicago, IL, VS).
Niet-parametrische test zal worden gebruikt voor vergelijking van gemiddelde waarden met p<0,05 die als statistisch significant wordt beschouwd.
|
12 maanden
|
|
Inflammatoire celflowcytometrie
Tijdsspanne: 0 maand
|
Er wordt 10 ml perifeer bloed afgenomen.
Mononucleaire cellen zullen worden verzameld door isolatie van Ficoll-Paque dichtheidsgradiëntcentrifugatie.
De populaties van klassieke en niet-klassieke monocyten zullen geanalyseerd worden door middel van flowcytometrie en geïdentificeerd worden op basis van proporties van CD172a+ en CD43+ cellen.
|
0 maand
|
|
Inflammatoire celflowcytometrie
Tijdsspanne: 1 maand
|
Er wordt 10 ml perifeer bloed afgenomen.
Mononucleaire cellen zullen worden verzameld door isolatie van Ficoll-Paque dichtheidsgradiëntcentrifugatie.
De populaties van klassieke en niet-klassieke monocyten zullen geanalyseerd worden door middel van flowcytometrie en geïdentificeerd worden op basis van proporties van CD172a+ en CD43+ cellen.
|
1 maand
|
|
Inflammatoire celflowcytometrie
Tijdsspanne: 3 maanden
|
Er wordt 10 ml perifeer bloed afgenomen.
Mononucleaire cellen zullen worden verzameld door isolatie van Ficoll-Paque dichtheidsgradiëntcentrifugatie.
De populaties van klassieke en niet-klassieke monocyten zullen geanalyseerd worden door middel van flowcytometrie en geïdentificeerd worden op basis van proporties van CD172a+ en CD43+ cellen.
|
3 maanden
|
|
Inflammatoire celflowcytometrie
Tijdsspanne: 6 maanden
|
Er wordt 10 ml perifeer bloed afgenomen.
Mononucleaire cellen zullen worden verzameld door isolatie van Ficoll-Paque dichtheidsgradiëntcentrifugatie.
De populaties van klassieke en niet-klassieke monocyten zullen geanalyseerd worden door middel van flowcytometrie en geïdentificeerd worden op basis van proporties van CD172a+ en CD43+ cellen.
|
6 maanden
|
|
Inflammatoire celflowcytometrie
Tijdsspanne: 12 maanden
|
Er wordt 10 ml perifeer bloed afgenomen.
Mononucleaire cellen zullen worden verzameld door isolatie van Ficoll-Paque dichtheidsgradiëntcentrifugatie.
De populaties van klassieke en niet-klassieke monocyten zullen geanalyseerd worden door middel van flowcytometrie en geïdentificeerd worden op basis van proporties van CD172a+ en CD43+ cellen.
|
12 maanden
|
|
Immunofluorescentiekleuring van macrofagen
Tijdsspanne: 0 maand
|
Er wordt een ponsbiopsie van 3 mm (RazorMed) verkregen en voorbereid voor paraffinecoupes.
De populaties en lokalisaties van zowel monocyten (klassieke en niet-klassieke fenotypes) als macrofagen (M1 en M2 fenotype) in de plaats van de huidwond zullen worden bepaald door immunofluorescentiekleuring met specifieke antilichamen tegen CD68 (algemene marker voor macrofaag), anti-iNOS ( M1-macrofaag), CD206 (M2-macrofaag) [32] CD172a (algemene marker voor monocyt) en CD43 (niet-klassieke monocyt-specifieke marker).
|
0 maand
|
|
Immunofluorescentiekleuring van macrofagen
Tijdsspanne: 1 maand
|
Er wordt een ponsbiopsie van 3 mm (RazorMed) verkregen en voorbereid voor paraffinecoupes.
De populaties en lokalisaties van zowel monocyten (klassieke en niet-klassieke fenotypes) als macrofagen (M1 en M2 fenotype) in de plaats van de huidwond zullen worden bepaald door immunofluorescentiekleuring met specifieke antilichamen tegen CD68 (algemene marker voor macrofaag), anti-iNOS ( M1-macrofaag), CD206 (M2-macrofaag) [32] CD172a (algemene marker voor monocyt) en CD43 (niet-klassieke monocyt-specifieke marker).
|
1 maand
|
|
Immunofluorescentiekleuring van macrofagen
Tijdsspanne: 3 maanden
|
Er wordt een ponsbiopsie van 3 mm (RazorMed) verkregen en voorbereid voor paraffinecoupes.
De populaties en lokalisaties van zowel monocyten (klassieke en niet-klassieke fenotypes) als macrofagen (M1 en M2 fenotype) in de plaats van de huidwond zullen worden bepaald door immunofluorescentiekleuring met specifieke antilichamen tegen CD68 (algemene marker voor macrofaag), anti-iNOS ( M1-macrofaag), CD206 (M2-macrofaag) [32] CD172a (algemene marker voor monocyt) en CD43 (niet-klassieke monocyt-specifieke marker).
|
3 maanden
|
|
Immunofluorescentiekleuring van macrofagen
Tijdsspanne: 6 maanden
|
Er wordt een ponsbiopsie van 3 mm (RazorMed) verkregen en voorbereid voor paraffinecoupes.
De populaties en lokalisaties van zowel monocyten (klassieke en niet-klassieke fenotypes) als macrofagen (M1 en M2 fenotype) in de plaats van de huidwond zullen worden bepaald door immunofluorescentiekleuring met specifieke antilichamen tegen CD68 (algemene marker voor macrofaag), anti-iNOS ( M1-macrofaag), CD206 (M2-macrofaag) [32] CD172a (algemene marker voor monocyt) en CD43 (niet-klassieke monocyt-specifieke marker).
|
6 maanden
|
|
Immunofluorescentiekleuring van macrofagen
Tijdsspanne: 12 maanden
|
Er wordt een ponsbiopsie van 3 mm (RazorMed) verkregen en voorbereid voor paraffinecoupes.
De populaties en lokalisaties van zowel monocyten (klassieke en niet-klassieke fenotypes) als macrofagen (M1 en M2 fenotype) in de plaats van de huidwond zullen worden bepaald door immunofluorescentiekleuring met specifieke antilichamen tegen CD68 (algemene marker voor macrofaag), anti-iNOS ( M1-macrofaag), CD206 (M2-macrofaag) [32] CD172a (algemene marker voor monocyt) en CD43 (niet-klassieke monocyt-specifieke marker).
|
12 maanden
|
|
Identificatie van regulerende cytokines voor mobilisatie van perifere bloed mesenchymale stamcellen (PB-MSC's)
Tijdsspanne: 0 maand
|
Op meerdere tijdstippen wordt 10 ml perifeer bloed afgenomen.
Elke perifere bloedmonsters worden verzameld met behulp van buisjes die K2-EDTA bevatten.
Bloedmonsters worden gecentrifugeerd bij 1800 g gedurende 6 minuten bij 4 °C om plasma te verkrijgen en verdeeld in aliquots van 1 ml en bewaard bij -80 °C.
Differentiële eiwitexpressie zal worden bepaald door middel van 8-plex isobare tags voor relatieve en absolute kwantificering (iTRAQ)-gebaseerde kwantitatieve proteomics-analyse.
|
0 maand
|
|
Identificatie van regulerende cytokines voor mobilisatie van perifere bloed mesenchymale stamcellen (PB-MSC's)
Tijdsspanne: 1 maand
|
Op meerdere tijdstippen wordt 10 ml perifeer bloed afgenomen.
Elke perifere bloedmonsters worden verzameld met behulp van buisjes die K2-EDTA bevatten.
Bloedmonsters worden gecentrifugeerd bij 1800 g gedurende 6 minuten bij 4 °C om plasma te verkrijgen en verdeeld in aliquots van 1 ml en bewaard bij -80 °C.
Differentiële eiwitexpressie zal worden bepaald door middel van 8-plex isobare tags voor relatieve en absolute kwantificering (iTRAQ)-gebaseerde kwantitatieve proteomics-analyse.
|
1 maand
|
|
Identificatie van regulerende cytokines voor mobilisatie van perifere bloed mesenchymale stamcellen (PB-MSC's)
Tijdsspanne: 3 maanden
|
Op meerdere tijdstippen wordt 10 ml perifeer bloed afgenomen.
Elke perifere bloedmonsters worden verzameld met behulp van buisjes die K2-EDTA bevatten.
Bloedmonsters worden gecentrifugeerd bij 1800 g gedurende 6 minuten bij 4 °C om plasma te verkrijgen en verdeeld in aliquots van 1 ml en bewaard bij -80 °C.
Differentiële eiwitexpressie zal worden bepaald door middel van 8-plex isobare tags voor relatieve en absolute kwantificering (iTRAQ)-gebaseerde kwantitatieve proteomics-analyse.
|
3 maanden
|
|
Identificatie van regulerende cytokines voor mobilisatie van perifere bloed mesenchymale stamcellen (PB-MSC's)
Tijdsspanne: 6 maanden
|
Op meerdere tijdstippen wordt 10 ml perifeer bloed afgenomen.
Elke perifere bloedmonsters worden verzameld met behulp van buisjes die K2-EDTA bevatten.
Bloedmonsters worden gecentrifugeerd bij 1800 g gedurende 6 minuten bij 4 °C om plasma te verkrijgen en verdeeld in aliquots van 1 ml en bewaard bij -80 °C.
Differentiële eiwitexpressie zal worden bepaald door middel van 8-plex isobare tags voor relatieve en absolute kwantificering (iTRAQ)-gebaseerde kwantitatieve proteomics-analyse.
|
6 maanden
|
|
Identificatie van regulerende cytokines voor mobilisatie van perifere bloed mesenchymale stamcellen (PB-MSC's)
Tijdsspanne: 12 maanden
|
Op meerdere tijdstippen wordt 10 ml perifeer bloed afgenomen.
Elke perifere bloedmonsters worden verzameld met behulp van buisjes die K2-EDTA bevatten.
Bloedmonsters worden gecentrifugeerd bij 1800 g gedurende 6 minuten bij 4 °C om plasma te verkrijgen en verdeeld in aliquots van 1 ml en bewaard bij -80 °C.
Differentiële eiwitexpressie zal worden bepaald door middel van 8-plex isobare tags voor relatieve en absolute kwantificering (iTRAQ)-gebaseerde kwantitatieve proteomics-analyse.
|
12 maanden
|
Medewerkers en onderzoekers
Hier vindt u mensen en organisaties die betrokken zijn bij dit onderzoek.
Sponsor
Studie record data
Deze datums volgen de voortgang van het onderzoeksdossier en de samenvatting van de ingediende resultaten bij ClinicalTrials.gov. Studieverslagen en gerapporteerde resultaten worden beoordeeld door de National Library of Medicine (NLM) om er zeker van te zijn dat ze voldoen aan specifieke kwaliteitscontrolenormen voordat ze op de openbare website worden geplaatst.
Bestudeer belangrijke data
Studie start (Verwacht)
1 december 2023
Primaire voltooiing (Verwacht)
31 januari 2026
Studie voltooiing (Verwacht)
31 januari 2026
Studieregistratiedata
Eerst ingediend
13 oktober 2022
Eerst ingediend dat voldeed aan de QC-criteria
20 januari 2023
Eerst geplaatst (Schatting)
30 januari 2023
Updates van studierecords
Laatste update geplaatst (Schatting)
30 januari 2023
Laatste update ingediend die voldeed aan QC-criteria
20 januari 2023
Laatst geverifieerd
1 januari 2023
Meer informatie
Termen gerelateerd aan deze studie
Aanvullende relevante MeSH-voorwaarden
Andere studie-ID-nummers
- TTTFootUlcers
Informatie over medicijnen en apparaten, studiedocumenten
Bestudeert een door de Amerikaanse FDA gereguleerd geneesmiddel
Nee
Bestudeert een door de Amerikaanse FDA gereguleerd apparaatproduct
Nee
Deze informatie is zonder wijzigingen rechtstreeks van de website clinicaltrials.gov gehaald. Als u verzoeken heeft om uw onderzoeksgegevens te wijzigen, te verwijderen of bij te werken, neem dan contact op met register@clinicaltrials.gov. Zodra er een wijziging wordt doorgevoerd op clinicaltrials.gov, wordt deze ook automatisch bijgewerkt op onze website .